RELATÓRIO 2

Prática 2 e 3: Obtenção de cultura pura
Observação a fresco e coloração Gram

EN2105- Microbiologia Ambiental
1º Quadrimestre 2013
Prof.Luísa/Dácio

Alexandre Issao Yoneya
Amanda Domingues Moraes
Barbara Simiramis T. Martins
Carolina Basseto Dias
Gabriela Pena Massari
Wesley Santos da Silva

Santo André
Junho de 2013

1. INTRODUÇÃO

1.1Obtenção de cultura pura Na natureza a grande maioria dos microorganismos são encontrados vivendo em comunidades, ou seja, diversas populações interagindo umas com as outras. De modo que uma amostra é composta por uma grande diversidade de microorganismos. Para se obter culturas puras vários métodos podem ser …exibir mais conteúdo…

Já as Gram-negativas apresentam uma estrutura mais complexa com uma membrana citoplasmática, uma fina camada de peptideoglicano e uma segunda membrana externa que contém lipopolissacarídeos (LPS), fosfolipídeos e proteínas. As membranas interna e externa são unidas por pontos de adesão e no espaço periplasmático entre elas existem proteínas de transporte, de degradação e de síntese de parede celular (Figura 2). [4]

Figura 2. Esquema comparando a estrutura da parede celular entre bactérias Gram-positivas e Gram -negativas

Apesar dessa divisão ter sido baseada no método de coloração de Gram, existem outras formas de identificação da estrutura da parede de bactérias que não esta técnica. Uma técnica alternativa é o tratamento de colônias de bactérias com KOH. Nesta técnica uma colônia é depositada em uma lâmina e então sobre a colônia é colocada uma gota de KOH (3%). Essa combinação é misturada adquirindo uma aparência homogênea. A fina parede das bactérias Gram-negativas não resiste à solução alcalina ocorrendo a lise celular. Com isso há liberação do conteúdo citoplasmático. O DNA reage com o KOH ocorrendo a formação de uma mistura mais viscosa. Já a parede das bactérias Gram-positivas é resistente à solução alcalina e por isso não ocorre lise celular. Dessa forma a partir da viscosidade da mistura é possível identificar a