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Uso del sulfato de cobre como confirmación de la toma de calostro y determinación de la anemia del ternero (página 2)




Partes: 1, 2


Basados en estos principios nos propusimos como objetivo demostrar que las soluciones de sulfato de cobre penta hidratadp en diferentes grado de dilución son confiables para determinar deficiencias de manejo en la ingesta de calostro y la presencia de anemia en ternero.

Materiales y Método

Se prepararon patrones de proteínas a partir de albúmina bovina fracción V de forma tal de obtener concentraciones desde 28.8 g/l hasta 198.00 g/l de forma tal que cada incremento se correspondiera con un punto de 3 aumento en el peso especifico del SO4CU (5 H2O)a partir de una solución madre de 159 g de la sal diluido en un litro de agua destilada desionizada.

Las soluciones de trabajo, su peso especifico y concentración de proteínas utilizadas se exponen en la tabla 1.

ml. de la solución patrón a diluir hasta ml.

Peso especifico

G/L de proteínas

14.26

1.015

28.8

15.25

1.016

32.40

16.24

1.017

36.00

17.23

1.018

39.60

18.22

1.019

43.20

19.21

1.020

46.80

20.20

1.021

50.40

21.19

1.022

54.00

22.17

1.023

57.60

23.15

1.024

61.20

24.14

1.025

64.80

25.12

1.026

68.40

26.10

1.027

72.00

27.08

1.028

75.60

28.06

1.029

79.20

29.04

1.030

83.80

30.00

1.031

86.40

31.00

1.032

90.00

32.00

1.033

93.60

33.00

1.034

97.20

34.00

1.035

100.80

35.00

1.036

104.20

36.00

1.037

108.00

37.00

1.038

111.50

38.00

1.039

115.10

39.00

1.039

118.90

40.00

1.040

122.30

41.00

1.041

126.00

42.00

1.042

129.50

43.00

1.043

133.20

44.00

1.044

136.80

45.00

1.045

140.30

46.00

1.046

144.00

47.00

1.047

147.50

48.00

1.048

151.20

49.00

1.049

154.70

50.00

1.050

158.50

51.00

1.051

162.00

52.00

1.052

165.00

53.00

1.053

169.10

54.00

1.054

172.90

55.00

1.055

176.20

56.00

1.056

180.00

57.00

1.057

183.80

58.00

1.058

187.20

59.00

1.059

190.80

60.00

1.060

194.30

61.00

1.061

198.00

Las concentraciones de proteína fueron determinadas por el método Biuret y confrontadas con las determinaciones a partir de las soluciones patrones contra el sulfato de cobre aplicándose un test de correlación entre ambas determinaciones analizadas.

Como soluciones de trabajo para condiciones de campo para la determinaciones de proteínas del suero de terneros neonatos fue empleada la dilución 18.22 ml de la solución patrón con adición de 81.78 ml de agua destilada desionizada, suficiente para determinar una concentración máxima de 50.4 g/l de proteína (del suero de la sangre de terneros recién nacidos).

Para el caso del diagnostico de campo de la anemia fue utilizada una dilución da 46 ml de la solución patrón en 54 ml de agua destilada desionizada con el fin de tener la capacidad de diagnostico para niveles de hemoglobina inferior a 70 g/l de sangre, considerando la concentración de proteínas totales normales.

Técnica para las determinaciones en condiciones de campo

La técnica empleada para el diagnostico de los niveles de proteínas fue descrita por Phillips y col. 1945, y posteriormente demostrada su utilidad por Archer en 1966. Wintrobe (1974) la emplea para el diagnostico rápido de la anemia en los bancos de sangre y en nuestro caso se basa en una adaptación y corroboración del uso de esta técnica para diagnosticar la confirmación de la ingesta de calostro así como para el diagnóstico de anemia en terneros.

En el caso del diagnostico de la anemia se utiliza una gota de sangre total con EDTA (2mg/ml) dejada caer a una distancia de un centímetro en un frasco de 100 ml de capacidad que tiene en su interior sulfato de cobre , se diagnostica positiva a la presencia de anemia si la gota de sangre se mantiene por 10 segundos o mas suspendida en la solución y como negativa si esta inmediatamente precipita, observándose una mayor velocidad de sedimentación a medida que mas alta sea la concentración de hemoglobina en la sangre. Para validar la técnica se emplearon un total 260 terneros de diferentes edades determinándose los niveles de hemoglobina por el método de la Cianmetahemoglobina y la técnica descrita para el sulfato de cobre.

En el caso del uso de la técnica para determinar si el ternero ingiere o no calostro se obtiene unos 5 ml de sangre sin anticoagulante, la que se deja reposar hasta que comience a separarse el suero del que se toma una gota y se realiza la misma operación que para la anemia.

En general fueron utilizados 50 terneros recién nacidos a los que se les extrajo sangre antes de ingerir colostro y 24 horas después de la ingestión de mismo determinándose en ambas muestras los niveles de proteínas totales, utilizándose tanto el método Biuret como el de sulfato de cobre.

Los resultados se procesaron mediante el test no paramétrico de Krukal Wallis tanto para la anemia como para la concentración de proteínas en el suero.

Resultados y discusión

Los estudios en condiciones de laboratorio entre las técnicas de diagnostico de proteinas totales por los metodo Biuret y sulfato de cobre no presentaron diferencias estadísticas encontrándose un 5% de error técnico para el Biuret y 8.3% en el caso del sulfato de cobre, entre ambas técnicas se encontro una correlacion de R=0.95 para una p<0.001.

En el caso de las hemoglobinas, los errores fueron de un 6% para la Cianmetahemoglobina y de 8% para el sulfato de cobre. Las correlaciones entre ambas técnicas fueron altamente significativas (p<0.001) con una R=0.91

En condiciones de campo se demostró con 100% de efectividad la capacidad diagnóstica para las anemias con un índice de presentación del 53.2% y 64.5% de los terneros investigados.

Recría A

Animales anémicos

Animales normales

Total general

Leve

Moderada

Grave

Total

Total

n

23

39

12

74

65

139

%

16.55

38.06

8,63

53.24

46.76

100.00

Recría B

Animales anémicos

Animales normales

Total general

Leve

Moderada

Grave

Total

Total

N

5

37

36

78

43

121

%

4.13

30.57

29.75

64.46

35.54

100.00

En el caso de las proteínas totales como método de detección de la ingesta o no de calostro por los terneros aplicados a 50 terneros recién nacidos se encontró que antes de la ingesta de calostro, los 50 terneros dieron diagnostico confirmativo de no haber ingerido calostro y a las 24 horas posteriores a la toma de clostro el diagnostico fue negativo para un 100% de coincidencia cuando esto se determino por el método de Biuret.

Se demostró la utilidad del uso del sulfato de cobre como técnica útil para el diagnostico de anemia y la confirmación o no de la ingestión de calostro por el ternero.

Bibliografía

  1. Archert, (1966). Técnica de hemoglobina clínica.
  2. M.m wintrobe.(1974).Hematología clínica.
  3. Lehninger.(1980):Bioquimicade Johns Hop kins.
  4. Martinez, Margot y A. Granado.(1980)Comportamiento inmunologicode terneros recién nacidos sometidos a dos tipos de manejos en condiciones tropicales. Rev. Salud Animal. 2 (1-2) 145-156.
  5. Martinez, Margot (1981). Inmunoglobulinas séricas en terneros 5/8 Holstein por 3/8 Cebú al nacimiento. Rvta .Salud Anim. 3 (3): 51-54.
  6. Mohar, F.; Lesmes, R.; Roserio , E.; Mitat, Alina. (1981). Estudio de las proteínas del suero del calostro de la vaca Cebú, F1 Hostein Cebú. Revta. Salud Anium. 3 (19): 23-30.
  7. Mohar, F¸Fustes, E.; Gonzalez, Ma, D. (1992). Las proteínas totales del suero sanguíneo del ternero recién nacido y su relación con la mortalidad. Rvta. Cubana de Cien. Vet. 23 (1): 49-54.
  8. Figueredo, J.M. (2000). Diagnóstico de anemia ferropénica en terneros lactantes y su implicación en las diarreas y neumonías. Tesis en opción al grado de Dr. en Ciencias Veterinarias. CENSA. La Habana. Cuba.
  9. R. Mayarí y Colomé H. (1984). Niveles plasmáticos de cing y cobre en terneros en desarrollo. Revta. Salud Anium. 6 (2): 227.

 

 

Figueredo, J.M.

Vega, E.

Valdés Elena

E. Kelvin

Grupo de Clínica, Dirección de Salud y Producción Animal. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), Apartado 10, San José de las Lajas, La Habana, Cuba.


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