Manual de control de calidad en microbiología (página 3)

Enviado por Lic. Eric Caballero J

Partes: 1, 2, 3, 4

b) Observe el termorregulador por
cualquiera alteración en su posición
preestablecida.

c) Coloque las muestras, platos y tubos,
en una posición segura.

d) Un papel de filtro humedecido con
agua en el
fondo de la incubadora, es adecuado para mantener la humedad
requerida.

e) Las incubadoras de CO2 requieren
medir el nivel de gas
diariamente.

f) El jefe de sección debe ser
notificado cuando una incubadora falla en mantener el rango
de temperatura aceptable.
g) Observe macroscopicamente los platos
Petri para observar desecación.
h) En incubadoras de CO2 , se puede
colocar un cultivo de N. gonorrhoeae ATCC 43069 ,
subcultivandola cada día, para observar su
óptimo crecimiento, ya que es un microorganismo que necesariamente requiere CO2
para crecer.
i) Todas las incubadoras deben ser
limpiadas mensualmente y llevar un récord de mantenimiento
preventivo.

b) Autoclaves :

Procedimiento Por corrida Diario Semanal Mensual

1. Examine récord de Temperatura y
Presión
X

2. Utilice Indicadores de
Esterilización X

3. Récord de uso, fecha, temperaturas,
presión X

4. Chequeo del nivel de agua X

5. Uso de Indicadores biológicos de
Esterilidad X

6. Chequeo de la válvula de seguridad
X

7. Limpieza del Interior y Exterior. X

8. Limpieza de la Pantalla de Temperatura
X

9. Limpieza del drenaje y sellos X

Control de calidad del autoclave :

Para controlar la eficiencia del autoclave,
recomendamos utilizar la cepa control Geobacillus (antes
Bacillus ) stearothermophilus ATCC 7953.

También puede utilizarse otros controles
comerciales, tales como las tiras reactivas, tapes para
autoclave, cápsulas spot, etc.

De no contarse con ninguna de las anteriores, un
método
cualitativo consiste en colocar una cepa de Bacillus subtilis en
un Tioglicolato. Incubar por 24 horas a 35ºC y
posteriormente colocar el tubo durante la rutina de trabajo del
autoclave. Luego de la esterilización, se transfiere con
un hisopo a un agar sangre el cual se
incuba a 35ºC por 24 horas. No debe haber crecimiento en el
agar sangre, si la autoclave a trabajado adecuadamente.

c) Cámaras de bioseguridad :

a) Apague la lámpara Ultravioleta
antes de comenzar a trabajar.
b) Prenda el blower 15 minutos antes de
utilizar.
c) Observe que no se obstruye el flujo
de aire.
d) Si hay derrame dentro de la cabina,
limpie con un desinfectante apropiado, manteniendo apagada la
cabina.
e) Evite el uso de mecheros de flama
dentro de la cabina.
f) Lleve un control de la medida del
flujo de aire.
g) Lleve un control de la
calibración del flujo de aire.
h) Lleve un control del reemplazo de los
filtros.
i) Compruebe los sistemas de alarma de
funcionamiento.
j) La superficie interior de la mesa de
trabajo de la cabina, puede ser cultivada semanalmente para
detectar contaminación.
k) Desinfecte la cabina antes y
después de utilizar.
l) No utilice las cabinas
biológicas para hacer mezclas de
sustancias químicas y viceversa.
m) Cuando trabaje en la cabina, evite la
entrada brusca de aire y el uso innecesario de las puertas
del área.

c1) Control de calidad de las cabinas de
seguridad biológicas :

Es altamente recomendado controlar la calidad de
la integridad operativa de las cabinas de seguridad ( CSB ). Para
ello es recomendable que las mismas sean certificadas al menos
una vez al año, por un certificador autorizado. Los
test que a
continuación se detallan, son aplicables a los 3 tipos de
CSB :

Test de velocidad
del aire. Incluir la rata de aire expelida.
Rata de flujo de aire en el perímetro
de trabajo. Es bueno anotar que el test de humo es un
indicador de flujo de la dirección del aire, no de su
velocidad.
Test de integridad del filtro HEPA.
Prueba de presión. Es para determinar
fuga en la estructura
de la cabina. Se debe realizar durante la instalación
inicial, después de ser movida de posición y/o
después de reparación o cambio de
filtros.
El test de seguridad, se realiza para
verificar potenciales peligros en el sistema
eléctrico, polaridad, interruptores y resistencia de
circuitos
a tierra.
Test de la intensidad de la luz durante
la operación de la cabina.
Test de vibración de la cabina.
Test de ruido de
la cabina. Estos últimos test, sirven para evitar
fatiga en el operario.
Test de la lámpara ultravioleta ( UV )
. El método es como sigue :
Encender la lámpara ultravioleta por 5
minutos.
Colocar el sensor de medición de UV en el centro de la mesa
de trabajo.
La radiación medida no debe ser menor de
40 microwatts por cm² a 254 nanometros (nm).

d) Incinerador :

a) En condiciones normales el
incinerador logra la temperatura óptima de
esterilización ( 81.5 °C ) 10 minutos
después de haber sido encendido.
b) Bastan 5 segundos para lograr la
destrucción de bacterias, hongos y
micobacterias.
c) No es necesario observar
incandescencia en el asa para lograr la
esterilización.
d) Inspeccione la cerámica del incinerador por
rajaduras.
e) Aleje el incinerador de elementos que
puedan incendiarse por el calor generado.

e) Generadores de ambiente (
Sistema GasPak®) :

a) Mantenga los generadores de gas a
temperatura ambiente y el sobre sellado.
b) Mantenga los catalizadores en lugar
seco, a temperatura ambiente y las bolsas sellados.
c) Mantenga los indicadores de
anaerobiosis a temperatura de refrigeración

( 2-8°C ).

d) El tiempo de
generación de la atmósfera dentro de la jarra es de 30
minutos.
e) El indicador de anaerobiosis cambia
de color azul
a blanco dentro de la jarra en 4 a 5 horas.
f) Una evidencia sugestiva de ambiente
anaerobio, es el cambio de color a rojo vino del agar
sangre.
g) Algunos microbiólogos utilizan
un agar inoculado con Clostridium novyi B

( ATCC 19402 ) como indicador de ambiente
anaerobio, ya que el mismo es anaerobio estricto.

h) Los catalizadores de Paladio, pueden
ser regenerados colocándolos en horno a 160 °C por
2 horas. Guardar los pellets en envase cerrado.
i) Control biológico de
crecimiento:

CEPA ATCC RESULTADO

Cl. perfringes 13124 Crece

Micrococcus luteus 9341 No crece

Campylobacter jejuni 33291 Crece

f) Refrigeradoras :

a) Control diario de la temperatura en
hoja de formato mensual.
b) Coloque los platos Petri en
posición invertida con la tapa hacia abajo.
c) Mantenga la temperatura entre 4
– 8 ° C.
d) Utilice refrigeradoras que no hacen
escarcha.
e) No coloque medios de
cultivo aún ligeramente calientes dentro de la
refrigeradora.
f) Evite abrir con frecuencia la puerta
de la refrigeradora.
g) Lleve un registro de
problemas de funcionamiento, causa y solución.
h) No guarde alimentos en
refrigeradoras para especimenes clínico.

g) Microscopios :

Cuidados y mantenimiento Diario Mensual Semestral

1. Limpieza del aceite de
objetivos,
condensador, etc X

2. Apagar la fuente de luz X

3. Colocar cobertor contra el polvo X

4. Limpieza de Ocular, condensador, diafragma

con líquido de limpieza de lentes X

5. Limpieza y ajuste del sistema óptico
X

6. Limpieza y ajuste del sistema lumínico
X

7. Limpieza y lubricación del sistema
mecánico X

_____________________________________________

h) Centrífugas :

_____________________________________________

Elemento / acción
Por corrida Diario Semanal Mensual Anual

1. Verificar tubos por rajaduras X

2. Verificar por restos de vidrio o
líquido

dentro del portatubo o las copas X

3. Verificar por balance de cada lote X

4. Verificar por la temperatura de

funcionamiento ( Refrigeradas ) X

5. Limpieza de cualquier derrame X

6. Limpieza de la olla del rotor X

7. Limpieza externa X

8. Desinfección de la olla del rotor X

9. Verificación de brochas X

10. Chequeo del circuito eléctrico X

11. Certificación del velocímetro
X

12. Medición de la temperatura interna
X

con termómetro calibrado ( Centrífugas
refrigeradas )

Problemas y Limitaciones:

Vibración

Chequear por balance apropiado.
Chequear tamaño de los tubos.
Mirar si la centrífuga está
sobre una superficie plana.

Rotura

Chequear tamaño de los tubos.
Balance correcto.
Verificar el interior de los portatubos

Desprendimiento de tapas:

a) Utilice tapas de rosca.
b) Si no es posible, use Parafilm sobre
los tapones de caucho.
c) Siempre que sea posible utilice tubos
de plástico.

4) No centrifuge grandes volúmenes de
líquidos inflamables, los cuales pueden

producir vapores que pueden incendiarse durante
la operación del equipo.

d) La concentración de materiales
infecciosos para cultivo puede realizarse en el área
rutinaria de cultivo, siempre y cuando los tubos estén
bien cerrados.

e) No colocar las tazas o los portatubos
en el horno o autoclave para descontaminar.

f) Evitar utilizar para la limpieza
soluciones
que contengan cloro o sal, ya que son altamente
corrosivas.

8. CONTROL DE CALIDAD DE EQUIPOS
AUTOMATIZADOS

El laboratorio de microbiología moderno se auxilia de equipos
computarizados para ayudar en la rapidez y precisión del
diagnóstico etiológico. En la
sección de Microbiología del Laboratorio
Clínico del C.H.M,Dr. A.A. Madrid
contamos hasta la fecha de 4 sistemas computarizados:
BacT/Alert y Bactec para los hemocultivos, Vitek
System para la identificación y antibiogramas y el
Bactec MGIT 960 para la detección de
micobacterias.

Cada uno de éstos equipos, consta de sus
propios sistemas para el control de calidad. A
continuación presentamos algunas observaciones relativas
al control de calidad de los referidos equipos:

a) BacT/Alert ® :

El sistema BacT/Alert es utilizado para la
detección temprana de microorganismos en hemocultivos u
otros fluidos corporales. El sistema utiliza un sensor
colorimétrico y una luz reflejada para monitorear la
presencia y producción de CO2 disuelto en el medio de
cultivo. Si existen microorganismos en la muestra, se
genera CO2 cuando los microorganismos metabolizan los substratos
del medio de cultivo. Si el crecimiento de los microorganismos
genera CO2, el color del sensor gas-permeable instalado en el
fondo de cada frasco de cultivo cambia de verde a amarillo.

Cada equipo trae consigo un kit de reflectancia
estándar para los procedimientos de control de calidad y
de calibración. Además, de un software para ayudar en
pantalla a realizar el mismo. A parte de esto, cada lote de
frascos de cultivo es suministrado con un Certificado de Análisis de control de calidad de
fábrica.

El BacT/Alert utiliza 3 determinantes de control
de calidad: Control de calidad de las celdas, Calibración
de las celdas y Calibración de la temperatura del
equipo.

La opción Control de Calidad de las
Celdas es utilizada para asegurar que las celdas del
instrumento están en su óptima capacidad de
detección.. Este control debe ser parte del mantenimiento
normal del sistema. Un kit estándar de reflectancia es
proporcionado con cada instrumento para los procesos de
control de calidad y calibración. Son dos
estándares de reflectancia en cada kit, sin embargo, el
proceso de
control de calidad solo utiliza el estándar de
reflectancia B. El anillo al final de los estándares
identifica su número estándar de reflectancia.
Cuando el control de calidad de una celda falla y no es
recalibrada, ésta automáticamente es
inactivada.

Generalmente el periodo de control de calidad
para cada celda está configurado en 30 días en base
al menú Editar Configuración del Sistema del
capítulo Mantenimiento de Funciones del
Sistema. Este control solo se puede realizar en celdas
vacías. Al final de que todas las celdas han sido
evaluadas, puede obtenerse por impresión un reporte del
estado de las
Celdas, luego de lo cual el instrumento retorna
automáticamente al menú Funciones de Mantenimiento
del Instrumento.

La opción Calibración de
Celdas, es utilizada para recalibrar cualquier celda que haya
fallado el control de calidad. El kit viene con dos
estándares de reflectancia. El procedimiento
utiliza ambos. El instrumento automáticamente recalibra la
celda una vez se ha introducido el estándar cuando lo
indique el instrumento. Si la calibración de la celda
falla, el instrumento automáticamente inactiva la celda.
Al final se puede obtener un reporte del estado del instrumento y
la pantalla retorna automáticamente al menú de
Funciones de Mantenimiento del Instrumento.

La opción Calibración de la
Temperatura, es utilizada para calibrar la temperatura dentro
del instrumento. Primero se mide la temperatura interna del
instrumento utilizando el proceso descrito en Verificación
de la Temperatura del capítulo Mantenimiento Preventivo.
Solo utilice ésta opción si hay discrepancia entre
la temperatura marcada por el equipo y la temperatura
óptima preestablecida.

En el Menú principal ir a Otras
Funciones BacT/Alert.
Mantenimiento del Instrumento.

a1) Control de calidad.

b1) Control de calidad de celdas.

c1) Lista de Celdas

d1) Seleccionar la tecla F9

f1) Introducir los estándares de
calibración de celdas siguiendo las

instrucciones de la pantalla.

a2) Calibrar celdas.

b2) Quiere calibrar la celda "x "

c2) Si

d2) Introducir el estándar I en la celda
"x"

a3) Calibrar temperatura

b3) Seleccionar y ajustar la temperatura del
equipo.

Observaciones y Limitaciones del Test:

1) En cada frasco se debe anotar su
número de laboratorio y la casilla asignada.
2) Colocar los frascos hasta el fondo de
la celda.
3) No aerear los frascos anaerobios.
4) Todo frasco con frotis negativo, debe
ser colocado nuevamente en el aparato.
5) Ciertas variantes de H.
influenzae, N. Meningitidis, N. Gonorrhoeae y

P. anaerobius, pueden ser sensibles al
anticoagulante ( SPS ) lo que resulta en una falta de crecimiento
o baja producción de CO2.

6) En el caso de cultivo de otros
fluidos corporales, se requiere agregar sangre

u otro suplemento al frasco si se intenta
recuperar organismos tales como H. influenzae y N.
gonorrhoeae.

7) En contadas ocasiones pueden
presentarse BacT/Alert positivos, con frotis y subcultivos
negativos, debido a una excesiva cantidad de glóbulos
blancos en la muestra de sangre.
8) Se recomienda quitar del aparato,
aquellos frascos considerados positivos por el BacT/Alert,
para evitar cultivos no viables debido a autolisis,
especialmente en microorganismos fastidiosos como el S.
pneumoniae.

b) BACTEC 9240 ® :

El sistema Bactec 9240 es utilizado para la
detección temprana de microorganismos en hemocultivos por
el método de la fluorescencia.

Cada frasco contiene un sensor que puede detectar
aumentos del CO2 producido por el crecimiento de los
microorganismos. Cada 10 minutos el instrumento verifica el
aumento de la fluorescencia del sensor, la que se relaciona con
la cantidad de CO2 presente.

Observaciones y limitaciones del
test:

1.. No utilice frascos con signos
evidentes de deterioro.

No utilice frascos de cultivo después
de la fecha de caducidad.
Los frascos inoculados deben ponerse en el
instrumento tan pronto como sea posible.
Si se ha tardado en colocar un frasco
inoculado en el instrumento, y se puede ver crecimiento, el
frasco no debe colocarse en el instrumento, sino
subcultivarse y hacer placa por Gram, considerándolo
como un frasco presuntamente positivo.
Se recomienda analizar el rendimiento de cada
lote de frascos recibidos, utilizando un control positivo y
uno negativo. El frasco positivo debe inocularse con 1.0 ml
de una suspensión de E. coli o S.
aureus con un estándar McFarland de 0.5.

El control negativo está constituido por
un frasco sin inocular.

Dado que la sangre puede neutralizar la
acción tóxica del anticoagulante SPS

sobre algunas Neiserias y cocos Grampositivos
anaerobios, se recomienda utilizar volúmenes de sangre no
menores a 1.0 ml para facilitar el crecimiento.

Ciertos organismos exigentes como el H.
influenzae requieren para su crecimiento de elementos
que se encuentran en la sangre como el factor V. Si la
muestra de sangre es reducida, es posible que se requiera
agregar éstos suplementos al frasco si se sospecha de
éstos microorganismos.
Puede darse casos de falso positivo en
pacientes con un conteo de leucocitos muy elevado.

c) Sistema Vitek ® :

El control de calidad , es un subsistema del
Vitek, que examina la seguridad de sus tarjetas. El control de
calidad opera similarmente a la evaluación
de exámenes clínicos: El test clínico
identifica el organismo, el examen de control de calidad valida
el test.

Realizar control de calidad a toda nueva tarjeta
de identificación o de sensibilidad, una vez se ha
recibido en el laboratorio. No se requiere ningún otro
control de calidad si todos los resultados están dentro de
los límites
esperados. Realizar control de calidad por 5 días
consecutivos si se observan resultados fuera de control.

INTERFERENCIAS :

No utilice tarjetas Viek vencidas debido a
que pueden causar resultados con lectura errónea.
El mantenimiento inapropiado de las cepas
control, subcultivos y mal llenado de las tarjetas, puede
resultar en inconsistencias o bipatrones erróneos.

ALMACENAMIENTO DE LAS TARJETAS :

Las tarjetas Vitek deben ser mantenidas a 2
– 5 ºC. Si la temperatura de las tarjetas está
comprometida, las tarjetas deben ser descartadas.

Consideraciones específicas :

1. El programa de control de calidad
evalúa el kit del Vitek y los

organismos de control de calidad listados en el
paquete.

2. Las tarjetas de control de calidad
utilizan 7 dígitos ( formato : 000000-0 ) compuestos
de 2 partes:

Los primeros 6 dígitos identifican el tipo
de tarjeta y un organismo ATCC.

El séptimo dígito identifica el
número de lote y es asignado automáticamente.

3. Cada número predefinido de
referencia en el control de calidad significa un tipo

de test y un organismo. Un número de
referencia de control de calidad es más

que un número de identificación de
tarjeta. Cada uno de éstos números significa

la paridad de un tipo de tarjeta con un
organismo. Así por ejemplo el número de

referencia 900101 corresponde al Proteus
mirabilis ( ATCC 7002 ) y el 900102

a la Ps. aeruginosa ( ATCC 27853 ).

4. Un campo para control de calidad
demográfico está accesible para la información del lote de la tarjeta.
5. El control de calidad provee su
propio set especial de reporte.
6. El flujo de operación del
control de calidad es idéntico al flujo de una muestra
clínica.
7. Los resultados de control de calidad
se transfieren de la incubadora/lector a la base de
datos, si la opción de transferir la tarjeta
finalizada está activa.
8. Todos los resultados se mueven a
través del manejador de desviaciones del control de
calidad, el cual compara los resultados actuales con los
conocidos.
9. El programa de control de calidad
Vitek permite ver los resultados del control en pantalla.,
los cuales aparecen en 3 diferentes formatos: Resultado de la
identificación, resultado de la sensibilidad a los
antibióticos y resultado de la identificación
de urocultivos. La pantalla nos indica :

La identificación del organismo
esperado ( ATCC ).
Resultado de la identificación
actual.
Lote de la tarjeta.
Fecha del test.
Fecha de expiración de la tarjeta.
Reacciones bioquímicas esperadas y de
la prueba actual. Cada uno de los test bioquímicos son
señalados tanto en lo esperado como en el resultado
actual, y se genera una lista de los test que se han desviado
del resultado esperado.
Igual patrón al anterior muestra la
tarjeta de sensibilidad a los antibióticos.
Todos los resultados de control de calidad
pueden ser impresos guardar en un libro récord.

10. La base de datos de los
equipos de identificación computarizados, deben
ser

frecuentemente revisados para actualizarlo en lo
referente a los cambios

taxonómicos que ocurran. Igualmente se
debe prestar atención a la información

proveniente de la casa manufacturera acerca del
producto y las
investigaciones

que con el equipo aparezcan en la literatura
especializada.

11. Los informes
de control de calidad y reporte de desviaciones, son
mantenidos en el Libro de control de calidad del Vitek.
12. El sistema Vitek también
cuenta con un programa que ayuda a evaluar los resultados,
minimizando los errores de interpretación. Se trata del
bioMérieux Vitek Expert System. Los sistemas expertos
se basa en marcadores fenotípicos y el uso de
categorías de susceptibilidad ya definidas, que
interpretan los resultados basados en criterios locales y
mundiales. El sistema experto trabaja con una selección determinada de
antibióticos e implica la alimentación de
bases de
datos donde los géneros y especies bacterianas se
agrupan en fenotipos caracterizados por un perfil global de
susceptibilidad producto de mecanismos intrínsecos y
extrínsecos de resistencia a través de los
cuales se optimiza la identificación y el informe
microbiológico. Estas bases de datos se construyen

amparadas en un extenso conocimiento
de las distribuciones de las

concentración inhibitorias mínimas
(CIM) a numerosos antibióticos y los

fenotipos caracterizados dentro de cada especie
bacteriana. Cuando un perfil

fenotípico se valida se está
comparando ese perfil específico contra los perfiles

de las bases de datos, permitiendo deducir
resultados de los fenotipos observados, corregir resultados y
finalmente, realizar recomendaciones sobre las bases de un
consenso general y de acuerdo con los parámetros
internacionales que se adopten. El sistema experto ayuda a
realizar un control de calidad de los resultados de laboratorio
pues encuentra resultados inusuales y plantea, mediante alarmas,
las correcciones o verificaciones oportunas. El programa puede
detectar:

Identificaciones que son inconsistente con
los resultados de sensibilidad.
Errores técnicos
Fenotipos raros o improbables.
Expresiones de resistencia incompleta.
Resistencia cruzada.

13. El sistema también permite la
adición de reglas ( CAR ) en la que se establecen
parámetros que debe cumplir el reporte antes de su
impresión.
14. El nuevo sistema informático
COPERNICO, permite integrar los equipos
Vitek, BacT/ALERT y mini API, para transformar la data
analítica en valores
clínicamente útiles. El Programa trata de
superar las limitaciones del Sistema Informático del
laboratorio ( LIS ) en el campo de la
microbiología.

i ) Cepas ATCC recomendadas para control de
calidad de tarjetas de identificación y sensibilidad con
métodos automatizados :

BioMerieux Vitek® Tarjeta para
identificación de Gram Negativos (GNI) QC Set

Acinetobacter baumannii ATCC®
19606Bordetella bronchiseptica ATCC®
10580Klebsiella pneumoniae ATCC® 13883Proteus
mirabilis ATCC® 7002Pseudomonas aeruginosa
ATCC® 27853Serratia odorifera ATCC®
33077Yersinia kristensenii ATCC® 33639

BioMerieux Vitek® Tarjeta para
identificación de Gram Positivos (GPI) QC Set

Enterococcus durans ATCC®
6056Enterococcus faecalis ATCC®
29212Erysipelothrix rhusiopathiae ATCC®
19414Staphylococcus xylosus ATCC®
29971Streptococcus bovis ATCC® 9809Streptococcus
equi ATCC® 9528Streptococcus pyogenes ATCC®
19615

BioMerieux Vitek® Tarjetas para
sensibilidad de Gram Negativos (GNS) QC Set

Enterococcus faecalis ATCC®
29212Escherichia coli ATCC® 25922Escherichia
coli ATCC® 35218Pseudomonas aeruginosa
ATCC® 27853

BioMerieux Vitek® Tarjetas para
sensibilidad de Gram Positivos (GPS) QC
Set

Enterococcus faecalis ATCC®
29212

Enterococcus faecalis ATCC®
51299Escherichia coli ATCC® 35218Staphylococcus
aureus ATCC® 29213201-126

BioMerieux Vitek® Levaduras (YBC) QC
Set

Cryptococcus humicolus ATCC®
9949Candida albicans ATCC® 14053Cryptococcus
albidus ATCC® 34140Yarrowia lipolytica
ATCC® 9773

d) Sistema Bactec MGIT 960 ® :

El sistema Bactec MGIT 960 es utilizado para la
detección temprana de micobacterias en especimenes
clínicos. El control de calidad del instrumento es
automático y está activo continuamente para
asegurar la operación confiable del sistema.

El reporte de control de calidad suministra una
lista del estado de todos los detectores del instrumento con la
fecha y hora de la última verificación, e incluso
la lista de las celdas bloqueadas, temperatura de cada
incubadora, estado de los sensores,
etc.

Control diario del Equipo:

Verificar la operación de las
gavetas/incubadoras y las lámparas indicadoras de
estación.
Realizar test de las luces LED indicadoras (
Verde y Roja ).
Chequear el termómetro apretando el
botón de test.

Cada vez que se recibe un lote nuevo de tubos
MGIT , se sugiere control de

calidad de cepas ATCC en caldo Middlebrook
7H9.

_____________________________________________

Especie ATCC Dilución 0.5 McFarland
Días para ser detectado

( Suspensión en salina )
Positivo

_____________________________________________

M. tuberculosis 27294 1:500 6 –
10

M. kansasii 12478 1:50000 7 –
11

M. fortuitum 6841 1:5000 1 – 3

Control de Calidad Negativo:

Utilice un frasco MGIT con solución
descontaminante MycoPrep kit y PANTA ( Mezcla antimicrobiana
). colóquelo en la incubadora/detector.
Colocar un frasco de MGIT sin muestra y sin
descontaminante y colóquelo en la
incubadora/detector.
Inocule una suspensión de E.
coli dentro de un tubo MGIT y colóquelo dentro de
la incubadora/detector.

Control de Calidad Positivo:

a. Inocule un frasco de MGIT con una
cepa control doméstica de Mycobacterium
tuberculosis o una cepa control de M. Tuberculosis
ATCC 25177 o M. Intracellulare ATCC 13950 y
colóquelo en la incubadora.
b. Es importante comprobar que el agua,
reactivos de tinción, suplementos, etc, están
libres de contaminación por micobacterias ambientales
especialmente M. Gordonae y M. Terrae.

9. CONTROL DE CALIDAD EN
MYCOBACTERIOLOGÍA :

El programa de aseguramiento de la calidad en
Mycobacteriología, consta de tres componentes:
confirmación diagnóstica, rondas de
evaluación externa del desempeño e inspecciones de calidad.

La confirmación diagnóstica y las
rondas de evaluación externas del desempeño
evalúan al personal que
realiza y tiñe los frotis y al microscopista que reporta
los resultados. Esto constituye la piedra angular de la Red de laboratorios contra
la tuberculosis. La primera modalidad permite conocer los
resultados del trabajo diario del laboratorio; la segunda
modalidad evalúa al microscopista que reporta y aporta
información sobre el desempeño de toda la Red. En
éste sentido, el control de calidad se inicia con una
adecuada muestra, y el resto del trabajo a realizar depende
directamente de ésta etapa inicial.

Las inspecciones de calidad permiten conocer el
entorno en el que se desenvuelve el microbiólogo, el cual
influye directamente en la calidad del trabajo efectuado. Por lo
tanto, los tres componentes de este programa son complementarios
y conjuntamente brindan una visión integral de la calidad
del laboratorio en el diagnóstico de la tuberculosis.

Los indicadores de calidad son los porcentajes de
falsos positivos y negativos de donde se deriva la sensibilidad y
especificidad, el valor
predictivo positivo y negativo y la concordancia. Recomendamos el
seguimiento del protocolo de
trabajo de la Red Nacional.

Por otro lado, los nuevos métodos de
amplificación del ADN para detectar
m. tuberculosis, se han incrementado como un arma más del
laboratorio en su diagnóstico. Sin embargo, la
sensibilidad y especificidad de éstas pruebas ha
sido cuestionada, como la falta de reactivos estándar para
su control de calidad, por lo que se recomienda tomar las medidas
de control requeridas.

10. CONTROL DE CALIDAD EN MICOLOGÍA
:

El Control de calidad en micología a
tomado gran impulso gracias entre otras cosas, por el interés de
las empresa
productoras de materiales de laboratorio, por incursionar en un
campo aún en desarrollo.
Asi como ejemplo, las siguientes marcas realizan esfuerzos en
métodos para antifungigramas :

Sensititree ( Izasa )
Fungitest ( BioRad )
ATB-Fungus ( Biomerieux )
Candifast ( Oxoid )
E-Test

Algunas cepas control ATCC para micología
son :

C. albicans ATCC 14053
C. albicans ATCC 60193
C. albicans ATCC 90028
C. tropicales ATCC 66029
C. parapsilosis ATCC 22019
C. krusei ATCC 6258
Aspergillus Níger ATCC 10428
C. glabrata DMS 70614
Mucor racemosus ATCC 42647
Penicilium commune ATCC 10428
Saccharomyces cereviseaea ATCC 9763
Geotrichum candidum DMS 1240
Microsporum gallinae ATCC 12108

a) Control de calidad de tinciones en
micología :

Tinta China

Cryptococcus albidus : Presencia de
cápsula

C. albicans : Negativo por cápsula

b) Hidróxiodo de potasio

Combinar con una muestra de esputo para confirmar
que se disuelve

c) Lactofenol – azul de algodón

Penicillium sp : Se observa la pared celular de
azul intenso

d) Calcoflúor

Candida albicans : Color azul brillante o
verde

Control negativo : KOH mezclado con el blanco del
calcoflúor

b) Control de calidad de procedimientos de
identificación en micología :

a) Tubos germinales

Candida albicans ATCC 60193 : Control positivo.
Tubos germinativos.

Candida tropicales ATCC 66029 : Control negativo.
Ausencia de tubos

germinativos

b) Perforación de cabello

Trichophyton mentagrophytes : Control positivo.
Perforación del cabello

Trychophiton rubrum : Control negativo. Ausencia
de perforación

c) Conversión dimórfica

Histoplasma capsulatum :
Crecimiento/conversión a levadura

Sin inóculo : No crecimiento

d) Termotolerancia

Aspergillus fumigatus : Control positivo.
Crecimiento a 45-50°C

Aspergillus flavus : Control negativo. Ausencia
de crecimiento

c) Control de calidad de pruebas
bioquímicas en micología :

Levaduras – Asimilación de
carbohidratos

MEDIO ORGANISMO RESULTADO ESPERADO

Control ( Libre ) Candida albicans ATCC 10231 No
crecimiento

Celobiosa Cryptococcus laurentii ATCC 18803
Crecimiento