Aislamiento, purificación e inoculación de hongo fitopatógeno Fusarium oxisporum W en Hibiscus Sabdarifa. L.

Aislamiento, purificación e inoculación de hongo fitopatógeno Fusarium oxisporum. W, en planta de Jamaica Hibiscus sabdarifa. L.


INTRODUCCIÓN Actualmente la agricultura se enfrenta con un sinnúmeros de problemas en los que se destacan las plagas y enfermedades en los cultivos. La fitopatología es una rama de ciencia que se encarga a su estudio en relación a la planta y el patógeno. En nuestro estado de Guerrero; es el estado que ocupa el primer lugar a nivel nacional en la producción de este cultivo de Jamaica Hibiscus sabdarifa. L, colocando a nuestro país como séptimo lugar a nivel mundial después de la India (INEGI, 2005).


ANTECEDENTES A mediado del siglo XX se ha demostrado hongos fitopatógeno que causan enfermedades como. Botrytis, el Oidium, las enfermedades de suelo, Phytophthora, Fusarium, etc ( Rojas, 1999). En Argentina en el 2000, se ha detectado el Fusarium oxysporum como responsable de podricion en bulbo y tallos en plantas de tulipán (Hibiscos sp) de dichos síntomas A los 14 días de la inoculación se observaron los primeros síntomas sobre los bulbos y tallos( Dicianti y Turro, 2000). En 1989. Se aislaron cepas de Phytophthora parasítica que se aislaron de diferentes localidades de la región jamaiquera del municipio de Ayutla de libres; Guerrero. Bajo la dirección del instituto de Investigación Científica en Areas de Ciencias Naturales de la U.A.G y la Sociedad Mexicana de Fitopatología. Este fitopatogeno de acuerdo a la observación en campo se mostro necrosis en la base del tallo de la planta de Jamaica (Escalante,1989).


• • GENERALIDADES ORIGEN Según l.M. Perry, datos de 1980 la Rosa de Jamaica es nativa de Africa, datos 1971 de J. Kerharo, que es procedente de América Central, y de K. MC. Lean, en 1973, dice que procede de áreas tropicales de la India, Java, Sri Lanka. La Jamaica Hibiscus sabdariffa. L, es originaria de la India desde donde se ha distribuido a los trópicos del Nuevo Mundo, probablemente traída de África a América por los esclavos a la llegada de los españoles en nuestro territorio mexicano. (Escalante,1989).


Morfología de la planta Jamaica. Hibiscus sabdarifa. L • Planta: anual, semi-leñosa. • Tallo: erecto- ramificado de color rojo. • Hoja: alternas, peciolo largo. • Flores: axilares y solitarias, corola acampanada. • Caliz: carnoso, rojizo y alargado. • Fruto: cápsula es seco, oval, densamente velloso, de cinco lóbulos.


CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA. Según Linneo, 1753. • Reino: Plantae • División: Magnoliophyta • Clase: Magnoliopsida • Subclase: Dilleniidae • Orden: Malvales • Familia: Malvaceae • Subfamilia: Malvoideae • Genero: Hibiscus • Especie: H.sabdariffa. L • Nombre común: Jamaica


• • • • • Morfología del patógeno Micelio: septado. Reproduccion: asexual. Estructura de reproducción: conidios. Macro y Microconidios. Clamidosporas características distintiva para su clasificación. Es de color rojo púrpura.


• • • • • • • CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA. Según Whittaker.1969. Reino: Fungí División: Eumycota Clase: Deuteromycete Orden: Monoliales Familia: Monoliacea Genero: Fusarium Especie: F. oxisporum. W.


Imágenes observadas en 40x con M.O.Fusarium oxisporum.w Clamidospora Hifas septados


HIPÓTESIS • El siguiente estudio se espera que al llevar a cabo las técnicas de aislamiento, purificación e inoculación en plantas de Jamaica H.sabdariffa. L, se demuestre el hongo fitopatógeno mediante los postulados de koch.


OBJETIVOS ?Emplear las técnicas de colectas, aislamientos, purificación e inoculación en plantas de Jamaica con hongos fitopatógenos. ?Demostrar los postulados de koch en plantas de Jamaica sembradas en macetas.


DIAGRAMA DE TRABAJO SELECCION DE HOSPEDANTES COLECCION DE MUESTRAS EN CAMPO INOCULACION AISLAMIENTO PURIFICACION RESULTADOS DISCUSION CONCLUSION BIBLIOGRAFIAS


METODOLOGÍA 1. Para llevar a cabo la muestra se realizó con las técnicas de cinco de oro • COLECTA DE MUESTRAS en parcela de una hectárea. Esta parcela cuyo cultivo son de Jamaica H. sabddarifa.L. 2. las muestras son especímenes de planta previamente infectadas por un fitopatógenos. 3. En la laboratorios de Fitopatología vegetal de la UAG, se realizó el diagnostico y aislamiento y purificación


METODOLOGÍA • PREPARACIÓN DE PDA Cuarto de asepsia libre de agentes saprofitos y antagónicos Campana de flujo laminar


MORFOLOGÍA CRECIMIENTO DE HONGO EN MEDIOS SINTETICOS


METODOLOGÍA • PURIFICACIÓN


• METODOLOGÍA INOCULACIÓN Para llevar a cabo los postulado se tuvieron que cultivar plantas de Jamaica H.sabdariffa. en bolsas de polietileno con arcillas. Esperando su desarrollo completo se llevo la inoculación con cepa del hongo fitopatógenos para causar la enfermedad.


RESULTADOS Se ha demostrado que el fitopatogeno aislado fue eficiente en la aparición de los síntomas iníciales en Hibiscus sabdarifa. L De acuerdo a la inoculación realizada, llevada acabo el día 05 de Octubre, y los síntomas aparecieron el día 16 de Octubre. Tan solo con los 12 días después de su inoculación, esto permitió la infección, invasión a los tejidos, bloqueando principalmente a los conductos vasculares, dando como resultado los síntomas. Por otro lado el Fusarium oxisporum, ataca principalmente en los vasos xilemáticos bloqueando la corriente de los minerales. Este genero es conocido por la forma como ataca Sistomas principalmente sistémica. Invasión completa(muerte)


RESULTADOS Punto de la inoculación Hospedante-patógeno


DISCUSIÓN • Llevar acabo las técnicas de aislamiento y purificación, es necesario tener en cuenta un buen espacio de esterilidad, ya que las probabilidades son de que los medios sintético se contaminen. • En relación al Patogeno-Hospedante; es necesario tener un buen diagnostico en cuanto su morfología y características distintivas. El Fusarium oxisporum presenta un color amarillo intenso inicialmente siguiendo de un color rojizo purpuro intenso. Macroconio en forma de vainas de frijol de Phaseolus vulgaris. L


CONCLUSIÓN • De acuerdo a la hipótesis de trabajo de investigación. Se comprueba una ves mas, mediante los postulados de koch, que el Fusarium oxisporum. W; es un fitopatógeno, es un patogenos sistémico, ya que bloquea los conductos vasculares causando la clorosis y marchitamiento en regiones foliares, ya que presenta una estrecha relación con el Phytophthora infestan causante del tizón o pata prieta en Hibiscus sabdarifa. L.


• • • • • • • • REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Martínez, A. et al. 2000. Fundamentos de Agrotecnología de cultivo de plantas medicinales iberoamericanas. Publicación y convenio Andrés Bello y el Programa Ibereroamericano de Ciencia y Tecnología para el Desarrollo. Santa Fe de Bogotá, Colombia. 524 p. Ocampo, R. 1986. Cultivo y utilización de Sorrel (Hibiscus sabdariffa) en Costa Rica. Colegio de Ingenieros Agrónomos. San José-Costa Rica. Mimeografiado. 5 p. • Ordoñez, J.O. 1989. Estudio agroeconómico de la asociación de rosa de Jamaica (Hibiscus sabdariffa L.) con frijol y sorgo, utilizando dos distancias de siembra en San Juan Tecuaco, Santa Rosa. Tesis Ing. Agr. Guatemala. Universidad de San Carlos, Guatemala. Facultad de Agronomía. 72 p. Rojas, P. 1999. Perspectivas de ampliación del mercado de la Jamaica (Hibiscus sabdariffa L.), del estado de Guerrero. Tesis de licenciatura. Universidad Autónoma de Chapingo. División de Ciencias Económico Administrativas. Chapingo, México 67 p. Monzón, Rodríguez .J.2000. Infecciones causada por el género Fusarium sp. 3era Edición. Centro de investigaciones microbiológicas. España. INSTITUTO NACIONAL DE GEOGRAFIA E INFORMATICA.INEGI. 2005. Anuario estadísticos del estado de Guerrero. Dicianti, I y Turro R. 2000. Estado de perspectivas de la producción del bulbos de Tulipán en el noroeste de la provincia de Chubut, Argentina. CORFO Chubut, Convenio CORFO-INTA. Escalante.E.Y.1989.Descripcion sintomatologica nivel de campo de la Enfermedades llamada Pata Prieta de la Jamaica (Hibiscus saddarifa.L), en Ayutla de los libres. Memoria de XVI. Congreso Nacional de la Sociedad Mexicana de Fitopatologia. Montecillo. Edo de México.