MATERIALES Y MÉTODOS

La metodología para desarrollar el programa de control biológico clásico de malezas consideró los protocolos utilizados internacionalmente (Wapshere et al., 1989; Goeden y Andrés, 1999). Esto es, se reunió la información actualizada sobre la taxonomía, biología y distribución de la maleza y sus herbívoros, para posteriormente solicitar al Servicio Agrícola y Ganadero (SAG) el permiso correspondiente de internación de los bioagentes seleccionados. Paralelamente, se establecieron contactos con investigadores extranjeros a fin de obtener su cooperación para la eventual colecta o envío de los insectos.

La selección del tipo de herbívoro a utilizar en el proyecto obedeció a la combinación de variados criterios. Primero, se prefirió bioagentes especializados en ocupar nichos en el follaje de la maleza, dada la carencia en Chile de fitófagos efectivos utilizando estructuras vegetativas del U. europaeus. Tal criterio sigue los lineamientos sugeridos por Harris (1991), en el sentido de atacar puntos vulnerables que afecten la competitividad y sobrevivencia de la maleza. Segundo, la disponibilidad para colectar herbívoros de reconocida especificidad, ya sea en las regiones de origen de la maleza o su obtención a través de cooperación internacional desde países donde ya han sido introducidos (tranferencia de bioagentes, Goeden y Andrés, 1999). Tercero, la factibilidad de internar poblaciones desde regiones con diferentes regímenes climáticos, a fin de facilitar su eventual adaptación en distintas áreas agroclimáticas de Chile, después de su liberación en el campo (Wapshere, 1982; Hill et al., 1993).

Para la búsqueda de A. ulicetella en el extranjero se realizaron contactos con investigadores con el objeto de precisar los lugares y períodos más prácticos para realizar las colectas, privilegiando la obtención de pupas en la medida de lo posible. Las pupas encontradas en el matorral de U. europaeus, fueron extraídas cortando los brotes infestados, los que posteriormente fueron transportados hasta laboratorios de las instituciones extranjeras cooperadoras, donde las pupas fueron separadas de los brotes mediante pinzas entomológicas y depositadas en envases de cartón de 17 x 9 cm. Se agregaron tiras de viruta para proveer un lugar de reposo a los adultos que pudieran emerger durante el transporte a la cuarentena chilena, y un pequeño contenedor con agua y miel aseguró la alimentación de los adultos. En el caso de bioagentes colectados en estado larval, se procedió en igual forma, excepto que se utilizaron contenedores plásticos (Shif Ò ) de 18 x 5 cm con tapa de Jersey 15-D, y se agregaron diariamente brotes tiernos de U. europaeus como alimento para el desarrollo de las larvas. Los insectos y los certificados fitosanitarios pertinentes describiendo el material biológico, se transportaron desde su país de origen hasta las oficinas del SAG del Aeropuerto Arturo Merino Benítez, Santiago, Chile, en una nevera de 17 x 30 cm de capacidad interior.

Una vez cumplidos los protocolos de internación en el aeropuerto internacional, los insectos fueron ingresados a la cuarentena del INIA en el CEE La Cruz. Los bioagentes en estado pupal fueron depositados en jaulas entomológicas del tipo diseñado por S. E. Flanders (Fisher y Andrés, 1999), hasta lograr la emergencia de los adultos. En el caso de bioagentes internados en estado larval y que no puparon durante el viaje, se continuó alimentándolos permanentemente con brotes tiernos de U. europaeus en los contenedores plásticos, hasta que alcanzaron el estado de pupa. Posteriormente, las pupas fueron manejadas en jaulas de emergencia tipo Flanders.

Asimismo, en la cuarentena chilena se confirmó la identificación del bioagente y se le sometió a inspección, estudio y separación de organismos indeseables, especialmente hiperparásitos (Fisher y Andrés, 1999). Los adultos así obtenidos, fueron criados hasta completar un ciclo de vida sobre plántulas de espinillo con abundantes brotes tiernos. El hospedero natural aseguró un substrato para apareamiento y oviposición, así como para la subsecuente alimentación y refugio de las larvas de la nueva generación, a medida que eclosaron. Previo a la autorización de levantamiento cuarentenario se remitieron especímenes de A. ulicetella al SAG.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Se internó a la cuarentena de Chile una población de A. ulicetella establecida en la Isla de Hilo, Hawaii (Markin et al., 1996), caracterizada por ser un híbrido de poblaciones originariamente introducidas desde Portugal (100 km al norte de Lisboa) y desde Londres (G. Markin, comunicación personal). Otras poblaciones fueron colectadas en Inglaterra, en las cercanías de las ciudades de Norwich y Plymouth (Cuadro 1).

Cuadro 1. Introducción y crianza cuarentenaria de la polilla Agonopterix ulicetella en Chile.
Table 1. Introduction and quarantine breeding of the moth Agonopterix ulicetella in Chile.

* Población no liberada por cuanto no originó una nueva generación en cuarentena.

La población de Hawaii, "ecotipo Hilo", consistió de 800 pupas colectadas en junio de 1996 en la montaña Mounakea de la Isla de Hilo, y 100 adultos posdiapáusicos previamente colectados por los investigadores del Departamento de Agricultura de Hawaii. Otros 300 especímenes adultos, donados por los científicos hawaianos, fueron enviados desde Hilo por vía aérea en noviembre de 1996. Sin embargo, este material se extravió en Miami, demorando seis días su retiro del Servicio de Aduanas y procesamiento en la cuarentena. Ello implicó un 50 % de mortalidad de los adultos durante el viaje y un significativo deterioro de las alas de los sobrevivientes, lo cual no permitió obtener una nueva generación de esta partida en cuarentena. No obstante estos inconvenientes, la colonia base de la población de Hilo introducida en junio y que sobrevivió la cuarentena, permitió iniciar su manejo de cría, lo que resultó en la obtención de nuevas generaciones en 1996, a partir de las cuales se incrementó la población hasta obtener 2.600 larvas y 3.100 adultos en 1997 (Cuadro 1).

Las poblaciones de Inglaterra consistieron de 300 larvas de distintos estadíos colectadas en Norwich el 01/07/97 y 600 larvas de cuarto y quinto estadío colectadas en Plymouth, dos días más tarde (Cuadro 1). El manejo cuarentenario de las larvas tuvo serias complicaciones, debido a la gran mortalidad de larvas producto del hacinamiento, y a la alta humedad y contaminación originada por el alimento y las fecas, a que fueron expuestas durante el transporte. Este efecto fue mayor sobre las larvas de Norwich, las cuales fueron colectadas primero, y por lo tanto tuvieron mayor manipulación durante los procesos de alimentación y limpieza, previos al transporte a Chile. A pesar de la mortalidad antes señalada, las poblaciones inglesas completaron su ciclo biológico en la cuarentena, aunque solamente el ecotipo Plymouth originó una nueva generación de 2670 larvas y 265 adultos (Cuadro 1).

Las nuevas generaciones del bioagente resultantes de las crianzas sirvieron para dos propósitos: realizar la confirmación de su especificidad en condiciones cuarentenarias nacionales, lo cual ha sido documentado por Martínez (1998), y multiplicación del bioagente para implementar las liberaciones de campo en Chile.

Los resultados obtenidos en este proyecto revelaron que en Chile es posible realizar internaciones de bioagentes para el control biológico de malezas. Lo anterior se logró, a pesar de varios aspectos que dificultaron el proceso cuarentenario. A saber, la biología del insecto de presentar una generación al año y larga diapausa, y los requisitos de completar un ciclo biológico antes de autorizar el levantamiento cuarentenario. A este respecto, cabe mencionar que países como Nueva Zelandia han debido recurrir a la internación de polillas posdiapáusicas desde Hawaii (K. Teramoto, comunicación personal) debido a las considerables dificultades para completar el ciclo biológico del insecto en la cuarentena neozelandeza. Todo lo anterior avalaría la liberación directa de especies con una generación al año, y por lo tanto de difícil crianza, una vez realizada la identificación y el examen del material internado en cuarentena para garantizar la ausencia de parásitos y entomopatógenos, lo que concuerda con lo señalado por Goeden y Andrés (1999). Es particularmente relevante tener en cuenta tal criterio para futuras introducciones de A. ulicetella que puedan ser requeridas para reforzar el proyecto de control biológico del espinillo en Chile.

Por otra parte, la frustrante experiencia de la alta mortalidad de las 300 polillas enviadas vía cargo aéreo desde Hawaii, sugiere la conveniencia de preferir el transporte por mano, a fin de reducir los riesgos de demoras o extravíos inmanejables por los investigadores. La introducción de A. ulicetella en el estado de larva desde Inglaterra, implicó un incremento de los problemas inherentes al manejo de estados móviles de bioagentes, tales como debilitamiento de los individuos, lo cual condujo a una baja sobrevivencia. A este respecto, nuestros resultados recomiendan la colecta de pupas de A. ulicetella y su transporte por mano a la cuarentena chilena, para lograr una mayor sobrevivencia del bioagente hasta el estado adulto, en comparación con la colecta de larvas, y refuerzan la recomendación de Fisher y Andrés (1999) de preferir estados no móviles en un programa de introducciones. Sin embargo, hay que tener en cuenta, como en nuestro caso, que no siempre es posible precisar con anticipación la fecha más oportuna para colectar dichos estados de desarrollo en el país de origen, a pesar de la información proporcionada por los cooperadores internacionales. Esta dificultad para predecir los días o la semana ideal para efectuar la colecta del bioagente en su estado de pupa, es particularmente relevante en el caso de especies que tienen una sola generación al año, ya que las condiciones climáticas varían año a año, e influyen ya sea acelerando o retardando las fenologías de la maleza hospedera y de los bioagentes.

CONCLUSIONES

Los procesos de selección, colecta, transporte, internación, cuarentena y crianza de la polilla del espinillo resultaron en la obtención de nuevas generaciones de dos poblaciones del bioagente; los ecotipos Hilo, procedente de Hawai, y Plymouth, originario de Inglaterra. La crianza y multiplicación de ambos ecotipos del bioagente, logradas en la cuarentena, permitieron completar los estudios de especificidad de hospederos e iniciar la liberación de poblaciones fundadoras de A. ulicetella en el campo.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a K. Teramoto, S. Matayoshi, C. Hirayama, P. Conant, del Departamento de Agricultura de Hawaii, cuya ayuda permitió la colecta y obtención de la población Hilo de A. ulicetella; G. Markin del USDA Forest Service, Montana, USA; R. Hill y H. Gourlay del Landcare Research, New Zealand, por los envíos de la polilla en 1986 y 1988; K. Spencer y Hugo Campos de Quiroz, por orientarnos hacia infestaciones de U. europaeus en Inglaterra; y a Guillermo Martínez de la Universidad Austral de Chile por su valiosa cooperación durante la fase de crianza del bioagente en la cuarentena.

LITERATURA CITADA

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Hernán Norambuena M. ², Sergio Escobar S. ² y Fernando Rodríguez A. ^3
1 Financiamiento: Proyecto FONDECYT N° 1960030, FNDR IX Región Nº 20098066.
² Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Regional de Investigación Carillanca, Casilla 58 – D, Temuco, Chile.
³ Instituto de Investigaciones Agropecuarias, Centro Experimental de Entomología La Cruz, Csilla 3, La Cruz, Chile.
hnorambu[arroba]carillanca.inia.cl