Bioquímica

964 palabras 4 páginas
Practica 4

Estudio del bombeo de protones por levaduras; efecto de los inhibidores de la cadena de transporte de electrones y de los desacoplantes. Objetivos:

1.- Que el alumno relacione el consumo de glucosa con los cambios de pH producidos por las levaduras.
2.- Que el alumno describa las vías por las cuales la glucosa genera cambios de pH.
3.- Que el alumno interprete el efecto de los inhibidores y los desacoplantes sobre la salida de protones.

* Responde a las siguientes preguntas:

1.- ¿Cuáles son las fuentes de carbono que usa la levadura?

Los aminoácidos, los carbohidratos, además de cierta acción por parte del nitrógeno y de algunas vitaminas. De la segunda fuente se pueden mencionar a la glucosa, fructosa,
…ver más…
Todos estos, se encargan de bloquear la síntesis de ATP, al tiempo que se permite continuar con el transporte electrónico a lo largo de la cadena respiratoria hasta el O2. Su principal función es el inhibir el transporte de electrones en la cadena de la respiración.

6.- ¿Cuál es el mecanismo por medio del cual los protonoforos desacoplan la fosforilacion oxidativa? Describa su efecto sobre el consumo de 02 y la síntesis del ATP.

La acción de estos consiste en disociar la oxidación en la cadena respiratoria. Bloquean la síntesis de ATP, al tiempo que permite que continúe el transporte electrónico a lo largo de la cadena respiratoria hasta lo que es O2.

Hipotesis:

Si las levaduras consumen glucosa, se observará una disminución progresiva de su concentración en el medio de cultivo con el tiempo y cambios de pH extracelular.

Método:

Experimento 1 (control)
1 .Diluir 5 ml de la levadura con 40 ml de agua destilada.
2. Determinar el pH de la solución y repetir la medición dos veces más con intervalos de 3 minutos para obtener la línea basal.
3. Adicionar 5 ml de glucosa a 10 %, agitar y medir el pH.
4. Determinar el pH de la solución cada 5 minutos 4 veces, y luego cada 10 minutos 2 veces más.

EXPERIMENTO 2 (DINITROFENOL)
1. Diluir 5 ml de la levadura con

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