Catalasa y deshidrogenasa lactica

2854 palabras 12 páginas
INGENIERÍA BIOQUÍMICA, BIOQUÍMICA I, PRÁCTICA 5, 2010, PÁGS 1-7

CATALASA Y DESHIDROGENASA LÁCTICA

ERIKA GARCÍA

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE LA PAZ
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

JUEVES 28 DE OCTUBRE DE 2010

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La catalasa (EC 1.11.1.6) y la deshidrogenasa láctica (EC 1.1.1.28), son dos enzimas pertenecientes a la clase de las oxidorreductasas. La catalasa tiene como función la destrucción del H2O2, producto de varias oxidaciones biológicas, para ser convertido en H2O y O2. La deshidrogenasa láctica cataliza una reacción redox, en la que el piruvato es reducido a lactato gracias a la oxidación de NADH a NAD+. La reacción es reversible. El objetivo de esta práctica es observar la
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En el método para la reacción de la catalasa se colocaron 4 tubos de ensayo en una gradilla, los cuales fueron numerados del 1 al 4 respectivamente. Se añadió con una pipeta, a cada uno de los 4 tubos 2 ml de peróxido de hidrogeno (H2O2) al 3%, se agregaron 5 gotas de cianuro de sodio (NaCN) al 5% al tubo 3 y 5 gotas de nitrato de plomo (Pb (NO3)2) al 5% al tubo 4. En un tubo de ensayo aparte se colocaron 3 ml de sangre diluida 1:50, se calentaron en agua hirviendo por 5 minutos y se agregó al tubo 2. Se añadieron 3 ml de sangre diluida sin calentar a los tubos 1,3 y 4. Se agitó suave pero rápidamente y se llevaron los tubos a baño de agua a 37°C. Se dejaron estar durante 5 minutos.
Para el procedimiento de la reacción de la deshidrogenasa láctica, primeramente se colocaron 3 tubos de ensayo en una gradilla, numerados del 1 al 3. Se agregó 5 ml de azul de metileno al 0.02% a cada uno de los 3 tubos. Después se añadió 10 gotas de lactado de sodio al 5%, a los tubos 1 y 2. En un tubo de ensayo aparte, se colocaron 5 ml de suspensión de levadura al 20%, se calentó en un baño de agua hirviendo durante 5 minutos y se agregó al tubo 2. Se añadieron 5 ml de suspensión de levadura al 20% sin calentar a los tubos 1 y 3, se mezcló bien y se cubrió los tubos con una capa de aceite mineral, inclinando los tubos y dejando que el aceite corriera por la pared del tubo lentamente. Se colocaron los tubos en baño de agua a 37°C y se observó el resultado a los 3, 6, 9,12

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