Cromatografia de pigmentos fotosinteticos

3219 palabras 13 páginas
PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

PALABRAS CLAVES

Pigmentos, absorbancia, carotenos, xantofilas, clorofilas, espectro de luz, propiedades, plantas verdes.

RESUMEN

Se extrajeron los pigmentos de hojas de espinaca (spinacia sp.) y se lograron identificar por medio de la cromatografía de papel; por este método se encontró que la migración de los carotenoides fue mayor a la de las clorofilas debido a su mayor afinidad por los disolventes orgánicos, con resultados de Rfs: 0.19; 0.35; 0.59; y 0.77 para la clorofila b, la clorofila a, las xantofilas y los carotenos, respectivamente. Posteriormente se separaron los pigmentos en medio líquido, para lo cual se utilizaron disolventes de diferente polaridad. Al realizar la técnica de
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Cromatografía.

A cada grupo se le suministraron 15 ml del extracto de pigmentos que se obtuvo calentando hojas de espinaca en etanol del 96% hasta que quedaron blancas. A este extracto se le realizó los siguientes tratamientos:

a) Con un capilar se colocó la muestra en el punto de origen en la tira de papel de filtro, con gotas pequeñas y manteniendo el diámetro de la mancha alrededor de 5 mm. Se realizaron varias aplicaciones hasta que quedó una mancha verde oscuro.

b) se introdujo luego la tira de papel con la muestra en un tubo largo, en el que previamente se había puesto la mezcla de solventes para la cromatografía (acetona: éter petróleo (10:90 por volumen)). Se tapó bien el tubo y se sostuvo en posición vertical con la ayuda de un soporte y una pinza-nuez.

c) se dejó desarrollar el cromatograma en la oscuridad (colocando una cubierta de tela oscura sobre el tubo) 45 min.

d) Al terminar, se sacó el cromatograma y se secó al aire en la oscuridad, durante algunos minutos.

e) finalmente, se observaron las posiciones relativas y los colores de cada componente. Se Delineó su perímetro con lápiz, para determinar los Rfs.

2. Separación de los pigmentos en medio líquido.

a) A 10 ml de éter de petróleo se le adicionó 5 ml del extracto de pigmentos y se agitó bien.

b) Se tomaron 5 ml de la parte superior de la suspensión resultante y se le añadió 2.5 ml de una solución de KOH al 10%. Se agitó bien y se dejó reposar

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