Cuantificación de proteínas por espectrofotometría

2987 palabras 12 páginas
PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DE VALPARAISO
FACULTAD DE AGRONOMÍA

QUI-343
BIOQUÍMICA
INFORME Nº 1: ESPECTROFOTOMETRÍA: CUANTIFICACIÓN

2do. Semestre 2010
Introducción

La absorción de luz por parte de una sustancia es una propiedad característica de ella, que puede ser utilizada para su identificación y cuantificación. Todas las sustancias absorben luz en alguna región del espectro electromagnético (VIS, UV, IR, etc.). La absorción de luz depende de la estructura química del compuesto absorbente, y en especial de ciertos grupos funcionales, de modo que es posible identificar un compuesto por medio de las características de su espectro de absorción.

Para medir este valor de
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Objetivos

a) Generales:

- Comprender los fundamentos teóricos de la espectrofotometría y su aplicación en la cuantificación de proteínas.

- Comprender los fundamentos teóricos de los métodos de Biuret y Lowry, para luego cuantificar proteínas ocupando ambas técnicas espectroscópicas.

b) Específicos:

- Realizar algunos problemas relacionados con cuantificación de proteínas mediante análisis espectrofotométrico

- Determinar la concentración de proteínas en una muestra problema de caseína y leche, mediante el método de Biuret.

- Determinar la concentración de proteína en la muestra problema, mediante el método de Lowry.

- Responder algunas preguntas relacionadas con la espectrofotometría y la cuantificación de proteínas.

Desarrollo Ejercicios

- Problema 1:

a) Una disolución de cobalto de 5x10-3 M se coloca en una cubeta con una longitud de paso de 1cm. La absorbancia a 580 nm es 0,416. ¿Cuál es el valor de a 580 nm?

R: Utilizando la fórmula: A = ε l C, reemplazamos

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