Determinacion De Transaminasas

622 palabras 3 páginas
DETERMINACION DE ENZIMAS: TRANSAMINASAS
OBJETIVOS:
• Conocer la utilidad que tiene la determinación de la actividad de la TGP y la TGO en el suero.
• Interpretar bioquímicamente la elevación de las enzimas en el suero.
• Conocer su importancia como enzimas de diagnóstico clínico.

FUNDAMENTO:
La GOT cataliza la siguiente reacción:
L – aspartato + a- cetoglutarato GOT > glutamato + oxalacetato
La GPT cataliza la siguiente reacción:
L – alanina + a- cetoglutarato GOT > glutamato + piruvato
El piruvato formado ( el oxalacetato es inestable y se transforma en piruvato), reacciona con la 2,4 dinitrofenilhidrazina produciéndose, en medio alcalino, un compuesto coloreado que se mide a 505 nm.
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Aplicaciones clínicas de las enzimas:
La medición de la actividad enzimática es útil para el seguimiento de enfermedades declaradas, de tendencias genéticas hacia ciertos estados patológicos y de la respuesta de un paciente a ciertos tratamientos.
MATERIAL EMPLEADO:
• Espectrofotómetro.
• Micro pipetas.
• Pipetas.
• Tubos de ensayo.
• Baño de agua a 37°C
• Suero.
• Reactivos de transaminasas.
METODO:
En dos tubos de fotocolorímetro marcados B ( blanco) y D (desconocido), colocar: B D
Sustrato ( GOT o GPT ) 0.5 ml. 0.5 ml.
Colocar en baño de agua a37 oC unos minutos. Luego agregar:
Suero - 0.1 ml.
Agua 0.1 ml -
Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 30 minutos y agregar:
Diluyente para enzimas 5 ml. 5 ml.
Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de dos minutos leer la absorbancia en el espectrofotómetro a 505 nm llevando el

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