Determinacion de azucares totales y reductores

1231 palabras 5 páginas
DETERMINACION DE AZUCARES
REDUCTORES Y TOTALES

INTRODUCCION.-

Los carbohidratos son polihidroxialdehidos y polihidroxicetonas derivados de alcoholes. Se clasifican de acuerdo al numero de carbonos que contiene la cadena (triosas, tetrosas, pentosas, etc...) y de acuerdo al numero de monómeros que posea la molécula (monosacáridos, disacáridos, polisacáridos, etc...). Los carbohidratos, conocidos generalmente como azúcares, son de los compuestos orgánicos más abundantes en la naturaleza, la mayoría de ellos proceden de las plantas y solo unos cuantos son de origen animal.
Las propiedades químicas y físicas de los carbohidratos varían de acuerdo a su composición, por lo que se han diseñado pruebas especificas para su detección y
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Para la muestra, se toman directamente 2 ml del filtrado.
4. Despues, a cada uno de los tubos, agregar 6ml del reactivo de color 2,4 dinitrofenol, incluyendo el tubo con la muestra, tapar y agitar.
5. Calentar los tubos en bano Maria a ebullición durante 6 minutos. Enfriar a chorro de agua a temperatura ambiente y leer en espectrofotómetro a 560 nm de longitud de onda.

Azucares totales.-
Para la determinación de azucares totales, primero debe realizarse una inversión acida:
1. Tomar 25ml del filtrado anterior en un matraz aforado de 50ml.
2. Agregar 3ml de HCl al 25% y calentar en la hornilla a 70 C durante 10min, agitar constantemente.
3. Enfriar rápidamente a 20 C.
4. Con un papel indicador, verificar el ph de la solución, debe ser acida, entonces se neutraliza el exceso de acido con NaOH 4N hasta que el pH este entre 8 y 9,5.
5. Tomar 2ml de esta solución para realizar la curva patrón.

Preparacion de la curva de calibración:
1. Se disuelven 200g de sacarosa en 100ml de agua.
2. Con esta solución estándar, se preparan los tubos para la curva de igual forma que se hizo para azucares reductores.
3. Leer en espectrofotómetro a 560nm.

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