Difusion doble de ouchterlony

834 palabras 4 páginas
INFORME DE INMUNOLOGIA

REACCIONES DE PRECIPITACIÓN
La reacción de la precipitación se presenta cuando un antígeno multivalente en estado soluble, se une con su anticuerpo específico y así da lugar a la formación de un complejo insoluble. Se utiliza ampliamente para demostrar y cuantificar antígenos y anticuerpos y se puede llevar a cabo en medio de líquido o semisólido.
DIFUSIÓN DOBLE DE OUCHTERLONY

FUNDAMENTO
El método de difusión doble de Ouchterlonygel se basa en la inmunoprecipitación de la difusión de los antígenos y anticuerpos en medio sólido (normalmente un gel de agarosa) con pozos. Consiste en enfrentar en pequeñas perforaciones efectuadas en el agar, las soluciones de antígeno y anticuerpo. Al difundir y ponerse en
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Luego se colocó esta solución en un porta objeto hasta que el gel se solidificó, se abren los pozos con un pipeta Pasteur, se adiciono en el primer pozo Anti Ig y en el segundo IgG.

DIFUSIÓN RADIADA

FUNDAMENTO
La inmunodifusión radial (IDR) es una técnica que puede determinar cuantitativamente la concentración de un antígeno. Es una técnica sensible que es usada clínicamente para detectar niveles de proteínas plasmáticas. Esta técnica se basa en la difusión cuando un antígeno difunde desde un orificio al agar que lleva incorporado un anticuerpo específico, en un comienzo está presente en una concentración relativamente alta y forma complejos solubles; al difundir el antígeno se genera un gradiente de concentración, a medida que el antígeno difunde más, la concentración disminuye de modo continuo hasta que se alcanza el punto en el cual los reactantes están más cerca de las proporciones óptimas (zona de equivalencia), el inmunocomplejo se insolubiliza y se forma un anillo de precipitación.

PROCEDIMIENTO:

* Colocar la lámina horizontalmente y con la ayuda de un hisopo estéril embadurnar con agarosa al 3% toda la superficie. Dejar secar por unos minutos. * Con la ayuda de una pipeta serológica verter el contenido del tubo con agarosa 12 % fundida a una temperatura de unos 37-40C. * Dejar enfriar. Horadar los pozos sobre el agar como se indica

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