Dot Blot

607 palabras 3 páginas
OBJETIVO GENERAL
Aprender a detectar biomoleculas por medio de la tecnica llamada Dot Blot

OBJETIVO ESPECIFICO
Detectar IgG humana anti Virus de la influenza y Rotavirus mediante el inmunoensayo dot blot

FUNDAMENTO

Una mancha de puntos (o dot blot) es una técnica en biología molecular para detectar biomoléculas. Se representa una simplificación de la transferencia Northern, Southern blot, o métodos de western blot. En un dot blot las biomoléculas para ser detectados no se separan primero por cromatografía. En su lugar, una mezcla que contiene la molécula a ser detectada se aplica directamente sobre una membrana como un punto. Esto es seguido por la detección por cualquiera de las sondas de nucleótidos (para una
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En esta imagen se pueden observar que los resultados con mayor intensidad y por lo tanto mayor cantidad de anticuerpos son las muestras 2 , 7 , 8 y 12 para las muestras del virus de influenza, y las muestras 7,10, 11 y 12 muestran mayor intensidad para rotavirus.

DISCUSION

Al revisar los resultados se puede apreciar que hay una gran variedad en estos, tanto en tamaño como en la intensidad del color. Al consultar la literatura nos podemos dar cuenta de que el tamaño de los puntos dependerá de la habilidad de la persona que los realizo pero la intensidad del color es más dependiente de la cantidad de anticuerpo presente en el suero problema, a pesar de que esta también se puede ver afectada por error humano al agregar una mayor cantidad de muestra o bien al no realizar bien los lavados; esto ultimo de haber ocurrido se habría encontrado fondo en la muestra y la tira de nitrocelulosa se vería con una coloración morada. podemos darnos cuenta de que la dilución de la muestra problema dependerá de la cantidad que se sospecha presente de anticuerpo o antígeno.

CONCLUSIONES

En la presente práctica se comprendió el procedimiento para realizar la técnica de dot blot, así como sus ventajas y desventajas.

Se analizó la importancia del bloqueo de la membrana, así como el de los lavados para disminuir la probabilidad de

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