Formiato Deshidrogenasa

3497 palabras 15 páginas
HIPÓTESIS.
Si la síntesis de la formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa en Escherichia coli aumenta en condiciones anaerobias que en aerobias entonces habrá una mayor actividad enzimática.
Si la formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa de Escherichia coli requieren de oligoelementos como cofactores entonces en presencia de ellos habrá mayor actividad enzimática.
Si en presencia de nitrato la formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa aumentan su síntesis entonces habrá una mayor actividad enzimática.
DISEÑO EXPERIMENTAL.
Se obtuvieron cuatro cultivos de E. coli que se sometieron a diferentes condiciones de crecimiento: 1. Sin KNO3, con oligoelementos y en anaerobiosis. 2. Con KNO3, con oligoelementos y en anaerobiosis.
…ver más…
Finalmente se lee 600 nm.
OBJETIVO GENERAL.
Determinar la actividad enzimática de formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa de Escherichia coli en diferentes condiciones de crecimiento.
OBJETIVOS PARTICULARES.
Cuantificar el efecto que tiene el NO3- en la síntesis de formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa.
Observar el efecto de aerobiosis y anaerobiosis en la síntesis de formiato deshidrogenasa y nitrato reductasa.
Observar el efecto de la carencia y presencia de oligoelementos en la actividad de deshidrogenasa y nitrato reductasa.
RESULTADOS (REGISTRO Y MANEJO DE DATOS).

TABLA 1. Curva tipo de nitritos. Tubo No. | Nitrito (nanomoles) | Absorbencia λ = 520 nm | 1 | 0 | 0.000 | 2 | 5 | 0.124 | 3 | 10 | 0.235 | 4 | 20 | 0.458 | 5 | 30 | 0.707 | 6 | 40 | 0.920 | 7 | 50 | 1.140 |

GRÁFICO 1. Curva tipo de nitritos.
TABLA 2. Curva tipo de albúmina. Tubo No. | Albúmina (μg) | Absorbencia λ = 600 nm | 1 | 0 | 0.000 | 2 | 100 | 0.303 | 3 | 200 | 0.558 | 4 | 300 | 0.733 | 5 | 400 | 0.861 | 6 | 500 | 1.057 |

GRÁFICO 2. Curva tipo de albúmina.
TABLA 3. Determinación de proteína. Extracto de los cultivos | Alícuotas de la dilución (mL) | Absorbencia λ = 600 nm | X (A600) | Proteína (μg/alícuota) | Proteína (mg/mL) | 1 | 0.1 | 0.303 | 0.272 | 0.288 | 105.85 | 21.17 | 2 | 0.1 | 0.263 | 0.276 | 0.270 | 96.85 | 19.37 | 3 | 0.1 | 0.289 | 0.305 | 0.297 | 110.60 | 22.12 | 4 | 0.1 | 0.330 | 0.373 |

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