Hidroxilamina como agente mutagénico para neurospora crassa

2760 palabras 11 páginas
HIDROXILAMINA COMO UN AGENTE MUTAGÉNICO PARA NEUROSPORA CRASSA

H.V. Malling
Divisón de Biología,Laboratorio Nacional Oak Ridge, Oak Ridge, Tennessi (E.U.A.)
(Recibido el 21 de Junio de 1966)

Resumen
La mutagenicidad de la hidroxilamina (HA) ha sido probada en 8 diferentes mutantes dependientes de adenina (ad-3B) de Neurospora crassa: 4 mutantes de éste conjunto de prueba después de ser tratados con ácido nítrico y etil-metasulfonato indican que se puede revertir por una sustitución de una par de bases, 2 mutantes se revierten sólo después de ser tratados con ICR-170 lo que indica que se revierten por una inserción o por un corte de bases, y 2 mutantes se revierten solo espontáneamente.

HA indujo reversiones en 3 de los 4
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(b) Preparación del cultivo

En todos los experimentos de tratamiento mutagénico se llevaron en suspensiones de conidios cosechados de matraces erlenmeyer de 125 ml que contenían 20ml de glicerol medio completo (10ml de glicerol por litro en vez de 20ml) + sufato de adenina (25mg/l).

Los matraces fueron inoculados y después incubados por 1 día a 30º y luego por 6-9 días a 25º. Los conidios fueron cosechados de la primer mezcla de cultivos con cuentas de vidrio (4nm de diámetro) para romper las cadenas de conidios; luego se suspendieron en salina (0.9%), filtrados a través de redes de platino, lavados 2 veces por centrifugación, y luego resuspendidos en salina. Los mutantes ad-3 son diferentes de otros respecto a su desarrollo de un pigmento morado en el micelio y en el conidio cuando crecen completamente en glicerol, pero al añadir 250 mg de adenin sulfato por litro la acumulación del pigmento morado es esencialmente eliminada. La densidad de las suspensiones de conidios fueron medidos en un colorímetro (Spectronic 20, Baush and Lomb, Rochester, Nueva York) y el pico de las absorbencias de 750 m??.

(c) tratamientos
Todos los tratamientos fueron hechos en suspensiones de conidios en matraces de erlenmeyer en un agitador rotatorio en baño de agua a 25º para mantener los conidios en suspensión durante todo el tratamiento. 5 minutos antes de inactivar los conidios fueron centrifugados y el supernadante fue

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