Problemas en geles de poliacrilamida

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GUIA DE PROBLEMAS EN LOS GELES DE POLIACRILAMIDA Los geles de poliacrilamida presentan muchas veces errores, a continuación se describen muchos de esos errores y cuales son los causales para que presenten esto: Las concentraciones en los geles de las diferentes soluciones con las que se preparan no siempre son las mismas, es aquí donde empiezan a existir variaciones en la obtención de resultados, por lo cual se recomienda que al realizar un gel se tenga la mayor precisión posible así se disminuirán errores en este. PROBLEMA | CAUSA | SOLUCION | 1. EFECTO SONRISA- patrón de bandas se curva hacia arriba a ambos lados del gel. | En el centro de gel hay mas calor y correr más que cualquiera de los extremos de este. | El tampón no …ver más…
| | Sales en la muestra | eliminar las sales por diálisis, la desalinización de columnas, columnas micro Bio-Spin, etc. | | Interfaz de gel desigual. | disminuir la tasa de polimerización. geles de superposición con mucho cuidado. | 5. CARRILES ESTRECHOS EN LA PARTE INFERIOR DEL GEL | Fuerza iónica de la muestra superior a la del gel de los alrededores. | Desalizar la muestra y las muestras vecinas | 6.TENIENDO INUSUALMENTE LARGO PLAZO | Tampón de demasiado concentrada | Verificar en el protocolo, diluir si es necesario. | | Exceso de sal en la muestra | Desalizar la muestra | 7. CORRIDO MUY RAPIDO | Tampón demasiados diluidos | Revisar protocolo del buffer, y diluir si es necesario | | Voltaje muy alto | Disminuir el voltaje en un 25-28% | 8. DOBLETES OBSERVADOS EN PROTEINA DE UNA UNICA ESPECIE (SDS-PAGE) | Una porción de la proteína puede haber sido reoxida durante la ejecución o no haber sido reduzca totalmente antes de la ejecución | Prepare una solución nueva solución tampón de muestra si es mayor de 30 días de edad, aumentar la concentración de 2-mercaptoetanol en el tampón de muestra; TDT sustituto de BME | 9. MENOS BANDAS DE LO ESPERADO Y UNA BANDA DE HEAVY EN LA PARTE DELANTERA SECA | La migración de la proteína en la parte delantera tinte | Aumentar

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