Que es el pcr ensayo

793 palabras 4 páginas
PCR
Que es el PCR
El PCR o Reacción en cadena de la polimerasa por sus siglas en inglés es un procedimiento relativamente sencillo que toma una secuencia especifica de DNA y la reproduce millones de veces en aproximadamente 2 horas. Aunque en teoría es un procedimiento sin muchas complicaciones siempre existen variables; como por ejemplo el cambio de pH que puede llegar a suceder mientras se dan los ciclos, y pueden cambiar las reacciones buscadas y cambiar as polimerasas. También el hecho de que se comienza con solo un poco de DNA y se puede terminar con grandes cantidades de ese mismo pedazo de DNA replicado
Como se hace:
Se trata de un ciclo relativamente sencillo de pasos que son:
Se encuentran 2 partes de los nucleótidos que se
…ver más…
Este tipo de PCR es muy específica.
PCR Múltiple: Se lleva a cabo la reacción de PCR tradicional, pero con más de 2 primers, para amplificar varias regiones al mismo tiempo.
Se puede utilizar para identificar especies.
PCR Invertido: Aquí se utilizan varios primers, y se espera que amplifiquen varios segmentos del DNA en estudio.
Mediante este método, se puede obtener un patrón semi-unico, que podría ser característico para cada especie.
Los primers aquí utilizados, tiene un largo de 6-12 nucleótidos.
Real Time PCR (r t PCR): Es una versión mejorada del tradicional PCR.
TaqMan: En este real time PCR, se añade una sonda que puede alinear con el término de la amplificación de una hebra. Esta sonda contiene un fluoro acomplejado a un extremo del fragmento que alinea, y en el otro extremo hay un compuesto quencher, que por ende absorbe la luz emitida por el floro. Cuando el DNA polimerasa llega hasta la ubicación de la sonda unida al fragmento de DNA, la actividad exonucleasa de la enzima, rompe el DNA sonda, y el quencher se aleja del fluoro, esto se refleja como un aumento de luminiscencia en la muestra. La cual se puede cuantificar para estimar la cantidad de DNA amplificado.
SYBR-Green: En este real time PCR, se utiliza como aditivo, el SYBR Green, que es un fluoro que se intercala en el DNA de doble hebra. Por ende, mientras más DNA amplificado exista en el medio, mas SYBR Green se intercalara y la luminiscencia aumentara proporcionalmente a los

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