Tincion de gram

729 palabras 3 páginas
PRACTICA 3_ TINCION DE GRAM
OBJETIVO:
Clasificar a los microorganismos si son gran positivos o gran negativas de acuerdo a la técnica de tinción de gran.
MATERIAL:
* Portaobjetos * Asa bacteriológica * Mechero de bunsen * Microscopio óptico

* Colorante inicial (cristal violeta) * Solución mordiente (lugol) * Solución decolorante (alcohol-acetona) * Colorante de contraste (safranina).
GENERALIDADES:
La tinción de Gram o coloración Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Hans Christian Joachim Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a
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* . Los microorganismos de reacción positiva a los colorantes básicos pueden hacerse gram-negativos por aumentar la acidez. * . En la zona isoeléctrica característica de cada especie es muy escasa la tendencia a retener cualquier colorante. * . Parece estar bien demostrado que las proteínas de las bacterias no son simples, sino más bien una débil combinación de sustancias proteínicas con otras lipoideas o grasas.

DESARROLLO:
Fijar un frotis * Con la ayuda de un mechero, flamear un asa bacteriológica y esperar que enfríe un poco. * Tomar el asa (previamente flameada) y con ésta tomar un poco de muestra. * Una vez obtenida una pequeña cantidad de la muestra (con el asa), hacer que ésta tenga contacto con una lámina portaobjetos, la cual servirá para depositar la muestra contenida en el asa. * Con el asa (conteniendo la muestra) sobre la lámina portaobjetos, proceder a realizar la extensión de la muestra en el portaobjetos mediante movimientos giratorios (dar vueltas con el asa) sobre la lámina, de tal forma que al terminar la extensión, tengamos como producto una espiral en la parte media de la lámina. * Esperar que seque al aire libre o ayudarse con la llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el calor no debe ser directo (sólo se pasa por la llama), puesto que el calor excesivo puede cambiar la morfología celular de las bacterias a

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