Tipos de electroforesis

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1. Tipos de electroforesis

Existen principalmente dos métodos electroforéticos ampliamente utilizados: la electroforesis convencional y la electroforesis capilar. La primera se lleva a cabo sobre papel o sobre un gel, en los que se aplica la muestra directamente. La disolución tampón, que será el medio conductivo, cubre la capa de papel o de gel. Seguidamente se aplica el potencial de corriente continua a través de la placa. Cuando se considera que se han completado las separaciones se interrumpe el paso de la corriente y, si es necesario, las muestras se tiñen para visualizarlas.

1.1 Electroforesis de frente móvil o libre

1.2. Electroforesis de zona:
• Electroforesis en papel

• Electroforesis en gel
Existe una gran
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Además, el EEF aumenta su resolución al disminuir el intervalo de gradiente de pH.
Por todo esto, el disponer de un gradiente estable de pH es lo esencial del EEF; para ello, se emplean compuestos anfóteros de bajo peso molecular llamados anfolitos portadores, que son pequeñas poliaminas (alrededor de 750 kDa) con abundantes grupos ácidos y básicos, con un pI que abarca desde 2.5 hasta 11.0, con gran capacidad de tamponación cerca de su pI y con una gran solubilidad y conductividad.
Una disolución de una mezcla de estos anfolitos tendrán un pH próximo al promedio de los pI. Si esta disolución se emplea para la preparación de un gel de poliacrilamida, al aplicar una diferencia de potencial cada molécula de anfolito migrará hacia uno u otro polo en función de su carga, hasta alcanzar la zona de su pI. Cuando se alcanza el equilibrio queda formado un gradiente de pH a lo largo del gel. Si, debido a la difusión, los anfolitos abandonasen la zona de su pI, adquirirían carga y experimentarían el efecto focalizante mencionado anteriormente.
Una de las aplicaciones más importantes del EEF es el cálculo de pI (figura ..); en el pocillo I se aplican los marcadores de pI, y en el II la

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