Transformacion celular

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Introducción La transformación genética consiste en la adición de DNA exógeno extraído de un cultivo donante dentro del genoma bacteriano, este DNA foráneo puede provenir de un plásmido, el cual le puede otorgar al huésped genes beneficiosos para su supervivencia y adaptación a nuevos ambientes. Esta transformación puede demostrarse utilizando genes de resistencia a ciertos compuestos químicos o antibióticos, contenidos en el vector en cuestión. (1) El proceso de transformación comienza con la permeabilización de la pared celular de la bacteria a transformar, luego se inserta el vector por medio de un shock térmico o bien mediante estímulos eléctricos, y por último se debe cultivar la célula transformada con los nutrientes necesarios …ver más…
Esto podría deberse a un mala manipulación y esterilización durante el proceso.

DNA - / LB/ AMP:

En este medio que permite seleccionar las cepas de E.coli que presentan resistencia a ampicilina no debió existir crecimiento bacteriano, ya que estas bacterias no contenían el plásmido pGLO que les confiere resistencia a este antibiótico beta-lactámico, el cual es capaz de penetrar en las bacterias inhibiendo la síntesis de la pared celular, lo que lleva a la destrucción de la pared y lisis celular, causando la muerte de los microorganismos.

Sin embargo se observó la proliferación de E.coli, este resultado inesperado pudo deberse, a que la ampicilina al ser termosensible, durante la preparación del medio, pudo haber alcanzado altas temperaturas, lo que pudo provocar su denaturación, perdiendo su efectividad antimicrobiana.

DNA+ /LB/AMP:

Este medio que contiene antibiótico se utilizó para seleccionar las cepas, debido a que la ampicilina evita que bacterias no transformadas crezcan en el medio de cultivo, sólo proliferarían las bacterias transformadas, ya que éstas deberían tener incorporado el plásmido pGLO, el cual contiene una secuencia específica (gen) que codifica para una proteína que le otorga resistencia a ampicilina, esta proteína corresponde a una beta-lactamasa, enzima capaz de degradar por hidrólisis el anillo betalactámico impidiendo la acción del antibiótico.

En este medio las bacterias se

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