Estabelecimento in vitro de porta-enxertos de videira através de ápices meristemáticos e segmentos nodais

RESUMO: Visando aumentar a eficiência de estabelecimento in vitro dos porta-enxertos de videira `Jales' e `Campinas', foram conduzidos alguns experimentos com ápices meristemáticos e segmentos nodais, retirados de brotações de estacas lenhosas. Foram testadas diversas concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) em meio de cultura MS com a metade da concentração de sais. O efeito desta citocinina foi marcante sobre o crescimento dos explantes. O aumento da concentração de BAP estimulou o crescimento e expansão foliar dos ápices meristemáticos e das gemas axilares até a concentração de 10µM. O uso de 20µM de BAP reduziu o crescimento dos segmentos nodais. Conclui-se que o estabelecimento dos porta-enxertos pode ser realizado em meio MS, com a metade da concentração de sais, suplementado com 10µM de BAP. Descritores: cultura de tecidos, estabelecimento, porta-enxertos de videira, citocinina

In vitro establishment of grapevine rootstocks through shoot tips and nodal segments

ABSTRACT: Aiming to increase the efficiency of in vitro establishment of grapevine rootstocks `Jales' and `Campinas', some experiments were carried out with shoot tips and nodal segments, taken from shoots of hardwood cuttings. Several 6-benzylaminopurine (BAP) concentrations were tested in MS medium with half salt strength. This cytokinin had a markedly effect on the explant growth. The increase of BAP concentration stimulated growth and foliar expansion of shoot tips and axillary buds up to 10µM. The use of 20µM, BAP led to a reduced growth of nodal segments. It was concluded that rootstock establishment can be done in an half strength MS medium supplemented with 10µM of BAP. Key Words: tissue culture, establishment, grapevine rootstocks, cytokinin

A micropropagação da videira é utilizada com diversos objetivos, entre eles a multiplicação rápida de plantas, a propagação de novos híbridos, a obtenção de matrizes livres de vírus e a preservação de germoplasmas (Krul & Mowbray, 1984).

Através da técnica de cultura de meristemas, em conjunto com a termoterapia, é possível a obtenção de material livre de vírus, os quais dificilmente são eliminados apenas com o tratamento térmico (Barlass, 1987; Barlass et al., 1982; Koruza & Jelaska, 1993).

O isolamento de explantes tão pequenos como os ápices e os meristemas, também permitem o estabelecimento de culturas com baixíssimo índice de perdas por contaminação e possibilita a eliminação de outros patógenos, como viróides, organismos semelhantes a micoplasmas e bactérias (Barlass, 1987).

A micropropagação também tornou-se uma alternativa viável para a multiplicação de videiras muscadíneas, que apresentam grande dificuldade de enraizamento através de estaquia (Gray & Benton, 1990; Gray & Fisher, 1985; Lee & Wetzstein, 1990; Wetzstein & Myers, 1994).

Para induzir o crescimento dos explantes in vitro, geralmente adiciona-se uma citocinina ao meio de cultura inicial, sendo a 6-benzilaminopurina (BAP) a mais utilizada e mais efetiva para um grande número de cultivares (Bass et al., 1988; Botti et al., 1993; Blazina et al., 1991; Gray & Fisher, 1985).

Novák & Juvová (1983) comprovaram que BAP foi a citocinina mais eficiente, superior à cinetina e à 2-isopenteniladenina (2iP), para estimular o crescimento de meristemas (0,5mm) e a proliferação de novas brotações em oito clones de videira. A concentração de 10M de BAP em meio MS, estimulou o crescimento de meristemas axilares 20 dias após o isolamento, ocasionando a formação de múltiplas brotações. Diversos autores também observaram a superioridade de BAP em relação a outras citocininas (Barlass & Skene, 1980b; Goussard, 1982; Gray & Benton, 1990).

Para o cultivar A Dona, as concentrações de 2 e 5M de BAP em meio básico NN (Nitsch & Nitsch, 1969), foram as mais apropriadas para desenvolvimento e diferenciação de meristemas com um ou dois primórdios foliares (Passos et al., 1985).

Chée & Pool (1983) trabalhando com 21 genótipos de videira utilizaram para a fase de estabelecimento inicial o meio de cultura MS com 3M de tiamina, 55,5M de mio-inositol, 8M de ácido nicotínico, 5M de piridoxina, 5M de BAP e 0,5M de ácido naftalenoacético (ANA).

Para o híbrido `Baco', Harris & Stevenson (1982) encontraram os melhores resultados nesta fase cultivando ápices de 3 a 8mm em meio MS com 0,4mg/L de tiamina, 100mg/L de inositol, 30g/L de sacarose, 80mg/L de adenina, 170mg/L de fosfato de sódio monobásico, 3mg/L de BAP. Os autores também utilizaram este meio para micropropagar outros 21 genótipos de videira, reduzindo o concentração de BAP para 2mg/L.

Para os cultivares Ribier, Thompson Seedless e Black Seedless, Botti et al. (1993) isolando ápices com 0,5 a 1,5mm, utilizaram para a fase inicial o meio MS com 3/4 de sua concentração normal mais 2mg/L de BAP.

Este trabalho foi realizado para encontrar a melhor concentração de BAP para o estabelecimento de ápices meristemáticos e segmentos nodais dos porta-enxertos `Jales' e `Campinas'.