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Diagnóstico de VPH



  1. Diagnóstico
  2. Biología Molecular del Virus del
    Papiloma Humano

El Virus del Papiloma Humano (VPH) es el principal
causante del cáncer de cérvix. Es el virus
más comúnmente transmitido por vía sexual.
Uno de los avances más significativos ha sido la
identificación de la etiología del cáncer
cérvico uterino, al esclarecer el papel que juega en el
desarrollo de las lesiones intraepiteliales el Virus de Papiloma
Humano (VPH)

De acuerdo con estimaciones estadísticas se
calcula que el 80% de las personas con vida sexual activa tienen
contacto con el VPH y aunque la mayoría elimina la
infección de forma natural, el 1% adquiere una
infección persistente y está en riesgo de
desarrollar un tumor maligno.

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Existen alrededor de 120 tipos de VPH registrados en el
mundo. De estos, 18 están asociados al cáncer
cervicouteríno (CaCu). La relación entre VPH y el
CaCu es tan alta que se ha demostrado que el 99.9% de los casos
de tumores en el cérvix contienen una infección por
VPH. Los profesores Harold zur Hausen y Lutz Gissman descubrieron
entre 1981 y 1984 los VPHs asociados a neoplasias genitales: los
tipos 6 y 11 asociados a neoplasias benignas, como el condiloma
acuminado y los tipos 16 y 18 asociados al cáncer
cervical. Con estos descubrimientos se inició el estudio
intenso de los VPhs a nivel mundial y su asociación con
esta enfermedad

Los tipos de VPH se dividen en dos grupos, el de Alto
Riesgo y el de Bajo Riesgo dependiendo de su asociación
con el desarrollo del cáncer. Esta clasificación
resalta la relevancia de identificar el tipo de VPH que
esté provocando una infección, puesto que esto
determinará la atención que requiera la paciente.
Se ha comprobado que entre los VPH de Alto Riesgo los tipos "16"
y "18" son responsables del 70% de los tumores malignos. Por otro
lado los VPH tipos "6" y "11" (de Bajo Riesgo) ocasionan entre el
85 y el 95% de los casos de verrugas genitales.

Otro factor de riesgo importante son las coinfecciones,
las cuales tienen una prevalencia del 40%. El porcentaje de
coinfecciones de virus de Alto y Bajo Riesgo juntos es de un
20%.

TIPO DE VPH

LESIÓN
ASOCIADA

Cutáneos1,42,43,105,8,14,17,2079,12,15,19,21-25,36,46,4741

Verruca plantarisVerruca
vulgarisVerruca planaEpidermodisplasia
verruciformisVerrugas del carniceroEpidermodisplasia
verruciformisCarcinoma de células escamosas
cutáneas

Mucosos61113,3216,18,31,33,35,45,51,52,56303934,584042434454555759

Condiloma acuminadoPapiloma
laríngeoHiperplasia epitelial focalNIC, Carcinoma de
cérvixNIC, Carcinoma laríngeoNIC, Carcinoma
de cérvix y peneNICNIC, NIPNIC, papiloma vulvarNIC,
hiperplasia vulvarNIC, condiloma vulvarCondiloma
acuminadoPapulosis BowenoideNICNIV

Cuadro 1. Lesiones asociadas a
diferentes tipos de VHP. NIC = Neoplasia
intraepitelial del cérvixNIP = Neoplasia
intraepitelial del pene NIV = Neoplasia
intraepitelial de la vulva 

Diagnóstico

La detección temprana y el tratamiento oportuno
del VPH en lesiones precancesoras pueden evitar la
progresión a cáncer. Los métodos principales
de diagnosticos han sido la histopatología y
métodos citológicos como el papanicolaau, que busca
cambios en células de la zona trasformada. Recientemente
se han introducido los métodos moleculares para detectar
VPH. El sistema actual de reporte para clasificar la
citología cervical es el de Bethesda.

EL Papanicolaou. La prueba se desarrolla en
células obtenidas de un raspado de la pared cervical, que
son posteriormente colocadas en una laminilla, fijadas,
teñidas y estudiadas al microscopio. La presencia de
koilocitos es el indicador clave de una infección por VPH,
sin embargo el grado de avance de la lesión debe ser
determinado por un estudio histopatológico.

El diagnóstico histopatológico se logra al
estudiar al microscopio fragmentos de tejido cervical obtenidos a
partir de una biopsia. Este estudio permite diferenciar los
estratos del epitelio cervical, detectando así el nivel de
infiltración de las células infectadas, así
como áreas de invasión. El diagnóstico
histopatológico es la prueba de oro para la
detección y etapificación de las lesiones
cervicales inducidas por VPH.

La terminología utilizada en el
diagnóstico citológico e histopatológico de
las lesiones cervicales pre-malignas ha cambiado gradualmente. Lo
que inicialmente se conocía como Displasia Leve
corresponde a NIC1, de igual forma la Displasia Moderada
corresponde a NIC2 y la Displasia Severa a NIC3, en la
clasificación citológica del Sistema Bethesda la
infección por VPH y la NIC1 han sido agrupadas como
Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Bajo Grado (LSIL por sus
siglas en inglés), mientras que las NIC2 y NIC3 han sido
designadas Lesiones Intraepiteliales Escamosas de Alto Grado
(HSIL por sus siglas en inglés).

También pueden ser visualizadas áreas
específicas de células infectadas por VPH gracias a
la reacción producida por la aplicación de
ácido acético diluído sobre el tejido
afectado. La reacción produce la formación de zonas
blanquecinas (lesión acetoblanca) temporales, que indican
la presencia del virus. La visualización de tales zonas se
hace a través de un colposcopio, y esta técnica es
normalmente usada como una herramienta para la toma dirigida de
biopsias a ser analizadas por histopatología, y
posteriormente para el tratamiento de las lesiones.

Además de las técnicas del laboratorio
clínico existen hoy en día métodos
moleculares para la detección del VPH.

En Biología Molecular Diagnóstica
contamos con las siguientes pruebas moleculares para detectar la
infección con el VPH:

• PCR e hibridación reversa: El PCR
es una técnica específica y sensible que permite la
detección genérica de un amplio número de
tipos de VPH, o que puede también ser utilizada para la
detección específica de un solo tipo viral. Esta
prueba tiene la ventaja de que permite detectar coinfecciones,
identifica el tipo viral tanto de bajo como de alto riesgo,
cuenta con un control interno que garantiza que la muestra fue
bien tomada

• PCR y secuenciación: La
Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es un
método que permite la detección de cantidades
ínfimas de DNA viral, mismo que se localiza
específicamente incluso si se encuentra mezclado con
millones de hebras de DNA de la célula hospedera. Esta
prueba tiene la ventaja que permite identificar el tipo viral
tanto de bajo como de alto riesgo, cuenta con un control interno
que garantiza que la muestra fue bien tomada, pero no detecta
coinfecciones.

• Captura de Híbridos: La captura de
híbridos ha sido diseñada para detectar grupos
virales, por lo que se puede aplicar para la búsqueda de
grupos de virus de bajo riesgo o de alto riesgo. Esta prueba
tiene la ventaja que permite detectar coinfecciones pero no
identifica el tipo viral, solo detecta virus de alto riesgo, y no
cuenta con un control interno que garantice que la muestra fue
bien tomada. la Captura de Híbridos es una técnica
para la detección del DNA viral que utiliza un
método colorimétrico para la determinación
de muestras humanas positivas a la presencia del virus. La
captura de híbridos se basa en la formación de
híbridos de moléculas de DNA viral con sondas
específicas de RNA, estos híbridos se exponen al
reconocimiento de anticuerpos especialmente diseñados y
que se encuentran acoplados a moléculas coloridas, las que
son finalmente detectadas en un luminómetro.

Sensibilidades de los métodos de
diagnóstico de VPH

Método

Sensibilidad

Citología líquida

75%

Detección molecular

94%

Citología + Molecular

98%

Beneficios de las Pruebas Moleculares:

Es posible realizar una sola toma de muestra para la
citología de base liquida y de ahí tomar material
para detectar al VPH por cualquiera de las técnicas de
biología molecular. Las técnicas moleculares
ofrecen una alta sensibilidad, lo que permite una
detección precoz de la enfermedad.

El Papanicolaou no detecta presencia de VPH, sólo
la transformación de células anormales causada por
el VPH. Un dato importante es que entre el 10 y el 30 % de las
mujeres que presentan un Papanicolaou normal, están
infectadas con el VPH. Existen métodos por biología
molecular para la detección directa del virus, este tipo
de diagnóstico es altamente recomendable, con una alta
sensibilidad y resulta ser preventivo ya que puede determinar el
riesgo de desarrollar cáncer del cuello
uterino.

Biología
Molecular del Virus del Papiloma Humano

El virus del papiloma, VP, pertenece a la familia
Papillomaviridae, una familia recientemente reconocida como
distinta de los polyomavirus por el Consejo Internacional para la
Taxonomía de los Virus (ICTV). Estos virus están
ampliamente distribuidos en la naturaleza. Infectan
específicamente el epitelio escamoso de más de 20
especies diferentes de mamíferos, así como aves y
reptiles.

La partícula viral del papiloma humano tiene una
cápside de 72 capsómeros (60 hexámeros y 12
pentámeros), con un diámetro aproximado de 55nm y
que contiene al genoma viral. Los capsómeros están
hechos de dos proteínas estructurales: l1 en mayor
proporción y L2. El VPH es relativamente estable y debido
a que no tiene una envoltura, permanece infeccioso en un ambiente
húmedo pos meses.

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Autor:

Kelly Zambrano Zambrano

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