- Resumen
- Historia
- Fundamento del
RIA - La
quimioluminiscencia - Fundamento de
CLIA - Menú de pruebas para los
sistemas antes mencionados - Conclusiones.
- Bibliografía
Se han desarrollado sistemas
automatizados para el uso de inmunoensayos por
quimioluminiscencia (emisión de luz asociada con
la energía) desplazando aquellas metodologías como
el Radioinmunoanálisis (RIA), Inmunoradiometría
(IRMA) y otras, haciendo hincapié que cada vez son
más sencillas las determinaciones inmunológicas con
esta tecnología de vanguardia, es
un método de
lectura que se
basa en el principio de emisión luminosa a través
de una reacción (Enzima-Sustrato). La variedad de pruebas que
conforman esta metodología permite realizar diferentes
determinaciones de casi todas las áreas del Laboratorio
Clínico tales como: Endocrinología,
Inmunología, Virología, Epidemiología,
Hematología, Bioquímica
Clínica, etc.
Los laboratorios de investigación que han desarrollado estos
ensayos de
quimioluminiscencia han demostrado la excelente
correlación con los ensayos de
referencia, como los automatizados y Radioinmunoanálisis,
donde encuentran precisión, baja reactividad cruzada, gran
sensibilidad analítica sobre el orden de diez veces
más sensible que la mayoría de los ensayos de hoy
en día. La mayor parte de los ensayos se determinan en
aproximadamente 15 a 30 minutos y por su simplicidad se ha
convertido en una opción muy propia para evitar los
riesgos
inherentes en la metodología del RIA como lo son la
utilización de isótopos radioactivos.
Este sistema posee una
gran especificidad y sensibilidad ya que con este método
radiométrico se puede determinar una reacción
antígeno-anticuerpo aunque su concentración sea del
orden de los picogramos y con un mínimo de
desnaturalización. Hoy en día los principios del
RIA se aplican a otros sistemas que usan
agentes inmunológicos como receptores de membrana, factor
intrínseco, enzimas (en
farmacología clínica, oncología,
hematología, etc.), y es aplicado ampliamente en el campo
de la endocrinología clínica para cuantificar
hormonas con
exactitud.
En esta revisión bibliográfica se
mostraran las ventajas del nuevo método de
quimiolumniscencia en comparación con el RIA a fin de dar
una opción más al laboratorista para realizar
pruebas de
inmunoensayo.
El descubrimiento de las diferentes técnicas
inmunológicas se remonta aproximadamente un poco
más de 100 años, y ahora una de las técnicas
más sensibles y exactas es el radioinmunoanálisis
(RIA) que se utiliza para la determinación de sustancias
de tipo no hormonal y hormonal den sangre u otros
líquidos corporales.
Descubrimiento del RIA
El fenómeno de emisión de luz por
moléculas orgánicas se ha conocido por más
de cien años, desde que Radzis Zenski descubrieron en 1877
compuestos luminiscentes.
En 1928 Albrech descubrió las propiedades de un
compuesto emisor de luz conocido como
luminol. Al ser oxidado con peróxido de
hidrógeno en un medio alcalino y en presencia de un
catalizador, el luminol emite luz individualmente como
fotones.
El potencial de aplicación analítica de la
quimioluminiscencia no fue reconocido hasta 1947 cuando se
aisló por primera vez la luciferasa de la
luciérnaga.
En 1952 Sthreler y Totter descubrieron la
aplicación de de la luciferasa a una técnica
analítica para la medición de ATP.
En 1959 el trabajo de
Berson y Yalow sobre la hormona insulina desvió la
atención de las moléculas bio y
quimioluminiscentes para análisis y la enfocó en el uso de
radioisótopos en una técnica analítica
conocida como radioinmunoensayo (RIA).
Berson y Yalon fueron los primeros en observar la gran
sensibilidad posible mediante el uso de indicadores
radioisótopos en la reacción antígeno
anticuerpo. Además reconocieron que el antígeno
marcado combinado tiene una relación cuantitativa con la
cantidad de insulina (antígeno no marcado en la muestra), cuando
la concentración de anticuerpo y antígeno marcado
en el sistema, se
mantiene constante.
Esto formó la base de la teoría
de enlace competitivo empleada en la mayoría de las
pruebas de RIA.
Página siguiente  |