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Formulación de hongos entomopatógenos como control biológico




Enviado por ifragas



     

    1. Resumen
    2. Consideraciones
      generales
    3. Control de calidad de las
      formulaciones
    4. Formulaciones
      desarrolladas
    5. Conclusiones
    6. Bibliografía

    Resumen:

    Las plagas agrícolas han sido controladas durante
    años mediante el empleo de
    plaguicidas químicos de fuerte impacto negativo sobre los
    organismos benéficos presentes en el ambiente. Con
    el objetivo de
    promover y acelerar el uso de hongos en el control de
    plagas en los cultivos es necesario el desarrollo de
    formulaciones eficaces y estables que permitan su manejo y
    aplicación en el campo. En este artículo se
    presentan consideraciones que se deben tener en cuenta para el
    desarrollo de productos de
    origen fungoso, los tipos de formulaciones en que pueden ser
    presentados y los logros obtenidos en este tema considerando que
    la forma granulado y polvo humedecible son las más usada
    hasta estos momentos en la presentación de este tipo de
    producto.

    Palabras claves: hongos, formulaciones, control
    biológico

    ENTOMOPATHOGENIC FUNGI FORMULATION
    AS BIOLOGICAL CONTROL

    Abstract:

    Agricultural pests have been controlled during years by
    means of the use of chemical pesticides of strong negative impact
    on the beneficent organisms present in environment. In order to
    promote and accelerate the fungus use in the control of pests in
    cultivations is necessary the development of stable and efficient
    formulations that allow their management and application in the
    field. In this article,considerations that should be kept in mind
    for the development of fungous products, the types of
    formulations in which they can be presented and the achievements
    obtained in this topic were present considering that the forms
    granulate and wettable powder are the most used nowadays in the
    presentation of this type of product.

    Key words: fungi; formulations; biological
    control.

    INTRODUCCIÓN:

    El desarrollo y aplicación de agentes de control
    biológico de plagas adquiere una importancia relevante
    como una alternativa en el desarrollo de una agricultura
    sostenible que preserve los recursos
    naturales y el medio ambiente para las futuras generaciones.
    La aplicación controlada en agroecosistemas de organismos
    vivos o sus metabolitos para el control de plagas y enfermedades, implica el
    mejoramiento de los cultivos, al proteger las plantas del
    deterioro producido por agentes fitopatógenos
    (Gómez et al, 2002).

    En la naturaleza,
    los hongos entomopatógenos pueden eliminar o mantener las
    plagas en niveles que no ocasionan daños económicos
    a los cultivos (Azevedo J.L. y Melo I.S. 1998) Estos
    hongos se encuentran en rastrojos de cultivos, estiércol,
    en el suelo, las
    plantas; logrando un buen desarrollo en lugares frescos,
    húmedos y con poco sol. Constituyen, además, el
    grupo de mayor
    importancia en el control biológico de insectos plagas.
    Prácticamente, todos los insectos son susceptibles a
    algunas de las enfermedades causadas por hongos (López y
    Hans Börjes, 2001)

    Se conocen aproximadamente 100 géneros y 700
    especies de hongos entomopatógenos. Entre los
    géneros más importantes están:
    Metarhizium, Beauveria, Aschersonia, Entomophthora,
    Zoophthora, Erynia, Eryniopsis, Akanthomyces, Fusarium,
    Hirsutella, Hymenostilbe, Paecelomyces
    y Verticillium
    (López y Hans Börjes, 2001)

    Para utilizar hongos entomopatógenos como
    insecticidas deben producirse cantidades masivas del hongo, el
    cual debe mantener su capacidad infectiva por un período
    de tiempo
    considerable. Los hongos se han reproducido para su uso como
    agentes biológicos de plagas desde hace 100 años,
    para lo cual se ha utilizado diferentes métodos de
    reproducción. Entre ellos, el uso de
    sustratos como arroz, trigo y medios
    líquidos mediante técnicas
    más sofisticadas (Vélez et al, 1997)

    La explotación de los hongos para el control de
    plagas (invertebrados, malezas y enfermedades) implica una amplia
    investigación donde se involucran
    disciplinas como la patología, ecología, genética,
    fisiología, producción masiva, formulación y
    estrategias de
    aplicación (Butt, Jackson y Magan, 2001).

    En este articulo se reseñan los tipos de
    formulaciones que se pudieran desarrollar con hongos para ser
    utilizados como control biológico, además de los
    principales resultados obtenidos hasta el momento en este
    tema.

    Consideraciones
    generales

    Una buena formulación es la base para el éxito
    de un bioplaguicida de origen microbiano; la posibilidad de
    obtener productos adecuados depende de las propias
    características del microorganismo
    y su relación con los componentes de la formulación
    (excipientes) y el ambiente de almacenamiento
    (Tanzini, Batista, Setten,y Toschi, 2001)

    Para el desarrollo de nuevos productos de origen
    biológico se deben tener en cuenta diferentes aspectos:
    primeramente definir un medio de cultivo óptimo y el mejor
    sistema para la
    obtención masiva de inóculo que permita una buena
    relación costo
    rendimiento en la producción; establecer ensayos de
    producción a pequeña escala;
    garantizar la estabilidad del producto y determinar las
    condiciones de almacenamiento; poder utilizar
    la maquinaria standard de cualquier explotación
    agrícola para su aplicación, y ser efectivo a unas
    dosis parecidas a las utilizadas para los agroquímicos
    así como bioensayos de laboratorio,
    invernadero y campo que confirmen la efectividad del producto una
    vez formulado (Carballo,1998)

    El objetivo de una formulación de hongos
    entomopatógenos es aumentar la estabilidad durante el
    almacenamiento y después de la aplicación Las
    propiedades físicas y biológicas de la
    formulación deben permanecer estables por un tiempo
    mínimo de 12 meses, pero es recomendable que se mantengan
    durante 18 meses para permitir su comercialización. Además de mejorar
    la adhesión a la cutícula del insecto; aumentar o
    mantener la virulencia y permitir su aplicación con
    equipos de volumen ultrabajo
    (Carballo,1998)

    En condiciones de laboratorio es difícil mantener
    la viabilidad de hongos entomopatógenos por mucho tiempo.
    De esta manera, formular un entomopatógeno consiste en
    adicionarle determinados compuestos que mejoran su desempeño en el campo, facilitando su
    manejo, aplicación y permita su almacenamiento en
    condiciones que disminuyen el costo, con una pérdida
    mínima de las cualidades del producto (Batista, Alves,S.,
    Alves, L., Pereira y Augusto, 1998) Para ser formulado, la
    viabilidad del hongo no debe ser menor de 95 % y el contenido de
    humedad entre 4 – 6 %. (Monzón, 2001)

    Los materiales
    utilizados en la formulación no deben tener actividad
    biológica; ni afectar la actividad del hongo, deben ser
    inocuos al ambiente, presentar características
    físicas adecuadas para mezclarse con los conidios;
    facilitar la aplicación del producto y ser economicamente
    rentables (Carballo, 1998)

    Existen varios tipos de formulaciones, el que una
    sustancia activa dada se presente de una forma u otra
    dependerá básicamente de sus propiedades
    físico-químicas (solubilidad, tamaño de
    partícula, densidad,
    fluidez), de la maquinaria de que dispone el aplicador y de
    factores económicos.

    En la siguiente tabla se detallan algunas de los tipos
    de formulaciones más usadas en el desarrollo de productos
    fitosanitarios.

    Tabla I: Tipos de formulaciones

    Tipos de
    Formulaciones

    Ventajas

    Desventajas

    Descripción

    Polvo (P=Powder o Dusts)

    No necesita dilución, ni mezclado antes de
    usar

    Riesgo de inhalación o adhesión a la
    piel

    Sustancia activa más un portador
    inerte.

    Apropiada para aplicaciones directamente al
    suelo.

    Granulados (G=Granules)

    Dosificación más fácil,
    reducción de la cantidad de producto adherido a los
    envases, equipo de aplicación simple y menos
    riesgo
    para los aplicadores.

    Liberación lenta del principio activo y
    puede necesitar humedad para empezar a actuar.

    Sustancia activa con un soporte mineral y un
    agente humectante que le de cohesión.

    Útil para aplicaciones directamente al
    suelo.

    Polvos humedecible (WP = Wettable
    Powder.):

    Fácil almacenamiento, transporte y manejo, menos peligro de
    absorción por la piel y
    los ojos en el momento de aplicación.

    Requiera agitación buena y constante;
    Abrasivo a muchas bombas y
    boquillas provocando desgaste de los equipos de
    aplicación. Riesgo potencial por inhalación
    .

    Sustancia activa con un soporte mineral y
    sustancias que contribuyan a su suspendibilidad,
    dispersabilidad y estabilidad

    Puede ser utilizada para aspersiones
    foliares.

    Polvos floables secos o gránulos
    dispersables (WG= Wettable Granules):

    Fácil manejo y aplicación y
    raramente obstruye las boquillas.

    Agitación constante y puede dejar
    residuos.

    Granulado del ingrediente activo junto a otros
    componentes similares al polvo mojable. Puede ser utilizada
    para aspersiones foliares.

    Materiales microencapsulados:

    Productos más seguros
    para operarios de campo; la liberación gradual de la
    parte activa aumenta la eficacia; el producto sufre menor
    volatilización y menos olores.

    Agitación constante necesario en
    tanque.

    Tecnología cara

    Partícula sólida o líquida
    del ingrediente activo cubierta por un material
    sintético

    Apropiada si se necesita proteger al principio
    activo del medio circundante y controlar el tiempo de
    liberación del mismo.

    Concentraciones emulsionables (EC = Emulsifiable
    Concentrate.):

    Emulsiones que tienen una actividad
    biológica mucho más elevada que una
    suspensión de partículas sólidas de la
    misma sustancia activa y pueden manipularse con
    facilidad.

    Por la presencia de los disolventes
    orgánicos que son caros e inflamables, requieren
    instalaciones especiales de fabricación y
    almacenamiento y suelen presentar cierta toxicidad por
    inhalación o por contacto con la piel.

    Sustancia activa más un disolvente
    orgánico.

    Se obtiene una acción rápida del principio
    activo.

    Floables o Suspensiones Concentradas
    (SC=Suspention Concentrate):

    Las suspensiones concentradas son de fácil
    manipulación y aplicación por ser
    formulaciones líquidas.

    Tienen las mismas dificultades que los EC cuando
    hay derrames o salpicaduras.

    Tienen poder abrasivo sobre boquillas y
    bombas.

    Ingrediente activo con emulsificantes y
    dispersantes. Se obtiene una acción rápida
    del principio activo.

    Existen, además, las Bolsas hidrosolubles que
    más que una formulación es un modo de
    presentación de una WP o SP mediante la cual se eliminan
    los riesgos de
    malas dosificaciones, se elimina el manipuleo y se minimizan los
    riesgos por la toxicidad de los productos. Estos envases
    predosificados se dejan caer en el agua del
    tanque del equipo de aplicación y allí la envoltura
    plástica se disuelve rápidamente, se libera la
    formulación y se mezcla uniformemente con el agua. No hay
    riesgos de contacto, inhalación ni salpicadura. Una vez
    lograda la mezcla de aplicación, ésta no es
    más ni menos segura que cualquier otra formulación
    similar de igual principio activo. (Denis, Burges, 1998;Jones y
    Burges, 1998)

    Varios productores de biocontroles han elegido a polvos
    humedecible, entre las formulaciones secas, debido a su larga
    vida de estante, buena miscibilidad en agua, y fácil
    aplicación con un equipo de atomización
    convencional ya que sus propiedades físicas le
    proporcionan la habilidad al producto de mezclarse con agua y
    formar una suspensión homogénea atomizable
    (Medugno, Ferraz y Freitas, 1997, Aroonrat, Manop y Uthai,
    2003)

    Control de
    calidad de las
    formulaciones:

    La comercialización de controles
    biológicos basados en hongos entomopatógenos
    requieren de un control adecuado de las propiedades
    biológicas, físicas y químicas realizadas
    por el departamento de Control de la Calidad de la firma
    productora que aseguren al usuario un producto de máxima
    eficacia en condiciones de campo (Vélez, 1997;Carballo,
    1998;Monzón, 2001)

    Algunas pruebas
    microbiológicas recomendadas son:

    • Concentración de esporas: Establece la
      dosificación del producto.
    • Germinación de esporas: Determina la
      viabilidad del hongo en la formulación.
    • Pureza: Revela la proporción del agente
      biológico en la formulación e identifica los
      microorganismos contaminantes con el objetivo de mejorar el
      proceso de
      producción y formulación de los
      entomopatógenos.

    Además, es necesario realizar algunas pruebas
    fisicas de acuerdo al tipo de formulación. (Vélez,
    1997;Carballo, 1998) Por ejemplo los polvos humedecibles es
    necesario realizar pruebas de suspendibilidad, humectabilidad,
    contenido de humedad y tamaño de partícula
    (Aroonrat, Manop y Uthai, 2003)

    Formulaciones
    Desarrolladas

    En el mundo numerosos grupos de
    investigadores y empresas
    productoras se concentran en el desarrollo de productos
    comerciales a partir de hongos en forma de granulos o polvo
    humedecible entre los que se citan Biofox C (F.
    oxysporium
    y F. moniliforme SIAPA, Italia), Mycotal
    (V. lecanii, Koppert, Holanda), Mycotrol GH
    (B. bassiana, Mycotech, USA), Green Muscle
    (M. flavoviride, CABI Bioscience, UK), DiTera
    (M. verrucaria, Valent (Sumitomo), USA, Japón)
    (Burges, 1998;Butt y Copping, 2000).

    Algunas formulaciones granuladas muy sencillas son las
    del hongo en arroz o arroz molido obtenidas mediante el proceso
    de producción masiva del hongo. Otras como las de
    gránulos de aceite
    hidrogenado es utilizada para conidios de B. bassiana
    (Carballo, 1998)

    Se han evaluado formulaciones en gránulos de
    alginato usando agentes aumentadores como cáscara de
    naranja seca molida. Existen, además, procedimientos
    para la preparación de formulaciones de micelio o conidios
    en gránulos de alginato (Carballo, 1998)

    La temperatura y
    la humedad son las principales limitaciones para la eficacia de
    hongos. Varios adjuvantes mejoran la germinación de las
    esporas, como es el caso del aceite de maíz sin
    refinar, que mejora la actividad de Colletotrichum
    truncatum
    (Schwein) Andrus y Morre y reduce los
    requerimientos de humedad necesarios para su germinación.
    Surfactantes como Tween 20 permiten a las plantas a reducir la
    tensión superficial y mejoran la dispersión de las
    esporas en las gotas. Hay que tener en cuenta la posible
    acción inhibitoria / estimuladora del surfactante en la
    germinación de las esporas, infección y desarrollo
    (Fernández y Juncosa, 2002)

    Lecanicillium lecanii (Verticillium
    lecanii
    ) esta disponible en dos productos
    producidos por la Koopert Biological System en Inglaterra los
    cuales contienen diferentes aislamientos del ingrediente activo:
    "Vertalec" se utiliza contra áfidos y "Mycotal" contra
    mosca blanca y thrips. "Vertalec" introducido en 1981, es
    formulado con una fuente de nutrientes en forma de polvo
    humedecible y demostrado su eficacia contra diferentes especies
    de áfidos (Milner, 1997;Burges,2000;Yeo, Pell, Alderson,
    Clarck, Pye, 2003;Shah y Pell, 2003)

    Estos productos son utilizados exclusivamente en casas
    de cultivo donde el ambiente de humedad puede ser modificado.
    Recientes avances de la Koopert en tecnología de
    formulaciones a logrado un adyuvante basado en un aceite vegetal
    emulsificable llamado "Addit" con el cual se le puede cambiar la
    actividad de Mycotal a bajas humedades pero no es compatible con
    "Vertalec". El poco mercado de estos
    productos es devido a los requerimientos de humedad que limita su
    uso en campo abierto (Milner, 1997; Shah y Pell, 2003)

    B. bassiana, fue registrada en 1999 como
    "Mycotrol" por la Enviromental Protection Agency en Estados Unidos,
    que es utilizado en campo para el control de saltamontes, mosca
    blanca, thrips, áfidos y muchos otros plagas de insectos.
    Este producto es estable por más de 12 meses almacenado a
    25 ° C.
    (Wraight, Jackson, Kock, 2001) Existen otros dos formulados a
    partir de B. bassiana comercializados como
    "BotanicGard" que es recomendado para el uso en casas de cultivos
    y "Mycotrol O" que contiene ingredientes en la formulación
    que permite su uso por agricultores en Estados Unidos (Shah y
    Pell, 2003)

    Actualmente, el mycoinsecticide basado en conidios secos
    de Metarhizium anisopliae se mezcla con aceite del
    diesel o querosén antes de atomizar (Bateman, Neethling y
    Osthuizen, 1998). La infección y muerte de
    70–90% de langosta o saltamontes ocurren dentro de
    14–20 días después de la aplicación,
    sin efecto perjudicial en organismos no diana (Lomer, Bateman,
    Johnson, Langewald, Thomas, 2001). El producto patentado, "Green
    Muscle", fue comercialmente disponible después de 12
    años de investigación involucrando a 40
    científicos y costando $17 millones (Shah y Pell, 2003) El
    "Green Muscle" se recomienda para locusts o grasshoppers por
    la
    Organización de las Naciones Unidas
    por la Alimentación y la Agricultura (Lomer,
    Bateman, Johnson, Langewald, Thomas, 2001)

    Conidios de Beauveria brongniartii
    crecidos en granos de la cebada se vende comercialmente bajo el
    nombres de "Engerlingspilz" y "Beauveria Schweizer." El uso de
    conidios en granos de la cebada se prefiere, desde que los
    productos pueden guardarse durante un año a 2
    ° C mientras las
    blastosporas formuladas en suspensión acuosa con leche
    descremada y un protector ultravioleta son más inestables
    y necesitan ser usadas dentro de 4 semanas de producción
    (Keller, 1992). En un reciente proyecto europeo,
    BIPESCO, se completará los estudios de producción,
    formulación y aplicación con B.
    brongniartii
    (Jung, Gonschorrek, Ruther, Zimmerman,
    2002).

    La producción y el uso de los
    entomopatógenos se han expandido rápidamente y
    Cuba ha
    desarrollado capacidades únicas en esta área. Se
    han elaborado muchas técnicas mejoradas de
    producción, cosecha, formulación, aplicación
    y control de
    calidad para numerosas bacteria y hongos.

    Los bioplaguicidas basándose en hongos producidos
    en los CREE, de amplio uso, son:

    Beauveria bassiana , usada para el control de plagas de
    coleópteros, como los gorgojos que atacan a la batata
    (camote) y al plátano común; Verticillium lecanii ,
    para controlar la mosca blanca (Bemisia tabaci), un vector de
    enfermedades virosas en tabaco, tomate, frijol
    y otros cultivos; Metarhizium anisopliae , para varias plagas de
    insectos; y Trichoderma spp, usado como antagonista de los
    patógenos del suelo en plántulas de tabaco. Entre
    los bioplaguicidas en proceso de desarrollo a gran escala
    están Nomuraea rileyei e Hirsutella thonsomii.( Rosset y
    Moore, 1998)

    El desarrollo de hongos entomophthorales como
    micoinsecticidas ha tenido obstáculos principalmente
    relacionados a la producción masiva y la estabilidad de
    propágulos para el almacenamiento y formulación
    (Gray, y Markham, 1997;Pell, Eilenberg, Hajek, Steinkraus, 2001;
    Wraight, Jackson, Kock, 2001). Investigación limitada en
    varias especies de Entomophthorales pueden haber superado algunos
    de estos problemas
    (Pell, Barker, Clarck, Wilding y Alderson, 1998;Shah, Aebi, Tuor,
    1998,2000,2002) pero hay barreras significativas que involucran
    la producción a gran escala así como la
    formulación apropiada y la tecnología de
    aplicación. Estos problemas requerirían
    significante inversión financiera en
    investigación y desarrollo que necesite unirse fuertemente
    con la identificación de mercados
    apropiados para cualquier producto eventual basado en un hongo
    entomophthoral (Shah y Pell, 2003)

    CONCLUSIONES

    El desarrollo de agentes de control biológico e
    investigaciones de su uso ha sido menor en su
    comienzo que el esperado, pero la utilización de estos
    productos está empezando a asumir un papel importante en
    el campo de la agricultura sostenible. La aplicación de
    los biocontroles junto a otros métodos alternativos
    permitirá lograr buenos rendimientos de las cosechas sin
    perjudicar al ecosistema

    Las formas granulados y polvo humedecible son las que
    mayor éxito han tenido en la presentación de este
    tipo de producto pero se necesita un mayor esfuerzo en
    investigaciones en esta línea a fin de obtener
    formulaciones de mayor estabilidad.

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    Ivis Fragas*

    Gema G. Fleitas**

    Hidalgo, L.***

    Dptos de * Química
    Farmacología, Dirección de Salud y Producción
    Animal

    ** Grupo de Desarrollo, Dirección de
    Producción Biofarmacéutica

    *** Grupo de Plagas Agrícolas, Dirección
    de Protección de Plantas

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