Estabilidad química del Parthenium hysterophorus, Linn (página 2)

RESULTADOS Y
DISCUSIÓN

Estabilidad en fase sólida
inicial.

La selección
de estas técnicas
se justifica por la posibilidad de identificar y cuantificar la
partenina presente en el polvo en presencia de otros
sesquiterpenlactonas y compuestos afines sin que estos
constituyan interferencias (Tabla 1) (Fig. 1). Los resultados
obtenidos fueron los siguientes:

• Análisis de las características
  organolépticas: La observación de las características
  organolépticas del polvo permitió comprobar que
  el mismo no sufrió alteraciones visuales, mantuvo su
  color y
  apariencia con respecto a la muestra que no
  fue sometida a las condiciones señaladas.
• Análisis Químico: Se
  determinó la concentración del componente
  principal a tiempo cero
  y a los tres meses de almacenamiento bajo las condiciones de evaluación de la estabilidad acelerada y
  de vida estante. (Tabla 1) (Fig. 1).

Tabla 1. Resultados de la
concentración de partenina obtenidos mediante la
HPLC.

Fig. 1. Cromatogramas obtenidos
mediante HPLC al evaluar la influencia de las condiciones de
almacenamiento del polvo.

Al realizar la comparación de ambas condiciones
evaluadas a los 15 días, se aprecia una reducción
significativa de la concentración de ingrediente activo en
las muestras sometidas a 75 % de humedad relativa y un 40
ºC. La concentración de ingrediente activo
experimenta una marcada disminución al desarrollarse la
evaluación a los 30 días de almacenamiento bajo
ambas situaciones experimentales, con una mayor incidencia de la
segunda variante ensayada.

Se apreciaron diferencias significativas entre las
condiciones evaluadas (30ºC/ 60% HR y 40ºC/ 75% HR)
comparadas con la concentración del ingrediente activo a
tiempo cero y entre ambas variantes, lo cual demuestra la
incidencia más marcada de la segunda condición en
la estabilidad química del principal
componente presente en el polvo de la planta, donde se emplea una
temperatura de
40ºC a una humedad relativa de 75%. El procesamiento
estadístico de los resultados mediante el paquete
estadístico Anova se refleja en la Tabla 2.

Tabla 2. Procesamiento estadístico de los
resultados de la estabilidad en fase sólida
inicial.

Multiple-Sample Comparison

Dependent variable: Concentraciones

Factor: Tiempos

Summary Statistics for Concentraciones

Tiempos Count Average Standard deviation Standard error
Minimum

————————————————————————————————-

T 0 8 2.79125 0.0756755 0.0267553 2.78

T1 8 2.34325 0.0616297 0.0217894 2.12

T2 7 2.19414 0.14221 0.0537505 1.96

————————————————————————————————-

Total 23 1.32565 0.162588 0.0339019 0.92

Tiempos Maximum Coeff. of variation

————————————————————————————————-

T 0 2.89 5.14362%

T1 2.4 4.61214%

T2 2.33 12.3969%

————————————————————————————————-

Total 2.89 12.2647%

ANOVA Table for Concentraciones by Tiempos

Analysis of Variance

——————————————————————————————

Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio
P-Value

——————————————————————————————

Between groups 0.393547 2 .196774 20.93
0.0000

Within groups 0.188018 20 .00940089

——————————————————————————————

Total (Corr.) 0.581565 22

————————————————-

Variance Check

Cochran's C test: 0.726552
P-Value = 0.0117475

Levene's test: 5.31078 P-Value = 0.0135981

▲ Control
microbiológico: El análisis microbiológico realizados
evidenció menos de 10 ufc/mL, valor que se
mantuvo durante el tiempo de estudio (tres meses). Este valor se
encuentra por debajo del límite establecido para
preparaciones internas, pues se plantea que no deben existir
más de 10³ ufc/mL al analizar bacterias
(European Pharmacopeia). Se consideró el sólido
pulverulento apto para su uso desde el punto de vista
microbiológico.

Estudio de estabilidad. Condiciones de
estrés

Atendiendo a la incidencia de factores tales como la
temperatura, humedad y luz en la
estabilidad química del sólido pulverulento,
evaluada en los estudios de estabilidad en fase sólida
inicial, se evaluó el polvo sometido a estrés de
humedad. El sólido pulverulento almacenado en frascos
protegidos de la luz, sin tapa y expuestos a una temperatura de
25 oC y 80 % HR (Fig.13), muestra una
disminución marcada en la altura del pico correspondiente
a la partenina, lo que evidencia la existencia de diferencias
significativas con relación a la concentración de
este ingrediente activo en el material vegetal. El
análisis de dicha condición de almacenamiento nos
permitió analizar la incidencia de la humedad como factor
independiente al controlar otros factores tales como la
temperatura y la luz. Lo anteriormente planteado nos permite
concluir que la humedad es un factor que afecta la estabilidad
del componente principal, caracterizada por una
degradación que no supera el 10 %. Se realizó la
evaluación química de la partenina bajo las
condiciones de análisis establecidas en comparación
con la determinación del componente principal en la
muestra inicial. (Tabla 3) (Fig 11). Considerando los resultados
de trabajos previos desarrollados con el sólido
pulverulento del Phartenium histerophorus, Linn y con el
objetivo de
tener criterios acerca de la estabilidad química de la
partenina en el mismo se desarrolló un estudio de
estabilidad acelerada y de vida de estante según se
describe en las ICH (2003) a muestras conservadas en envases que
controlan la incidencia de factores que aceleran su
degradación (Frasco de vidrio de color
ámbar con tapón de goma protegidos de la luz con
papel de aluminio).
Análisis de las características
organolépticas. Durante el tiempo de estudio
transcurrido en cada una de las condiciones de almacenamiento, no
se observó ningún cambio
significativo en el color, olor y el aspecto de los
sólidos pulverulentos.

Análisis químico. Al cabo de tres
meses de mantener al sólido pulverulento en condiciones de
envejecimiento natural y aceleradas la concentración de
partenina muestra una disminución significativa en ambas
condiciones, que alcanza valores de
degradación que no rebasan el 10 % para la
condición de 30° C y 60 % de HR (vida de estante) y
que es superior al 10 % en la condición acelerada (Tablas
3 ) y (Fig. 11 y 12). Existen diferencias significativas entre
las variantes analizadas en comparación con la
concentración de partenina en la muestra inicial,
además se evidenciaron diferencias significativas al
comparar las condiciones analizadas entre si (Tabla 4). Estos
resultados

ponen de manifiesto la inestabilidad química de
la partenina en el sólido pulverulento de Parthenium
hysterophorus, Linn, en las condiciones de almacenamiento
empleadas en este estudio, y la necesidad de evaluar alternativas
que incluyan la vías para disminuir el porcentaje de
humedad del sólido pulverulento y condiciones de
almacenamiento que favorezcan la estabilización. Por otra
parte, los resultados que se muestran en la Tabla 3 muestran que
la temperatura de almacenamiento es uno de los factores que
más acelera la degradación química de la
partenina.

Tabla. 3. Valores del % del ingrediente
principal sin degradar (partenina) en las muestras de
análisis.

Fig. 13. Cromatograma HPLC obtenido para la muestra de
análisis bajo las condiciones experimentales establecidas:
25°C ± 2°C/80% ± 5HR en frasco destapado
protegido de la luz.

Autor:

Msc. Yanelis Saucedo Hdez

Lic. Bassam Mohamad Safa

Dra. Mirtha Mayra González
Bedia

Dr. Dr. Luis Ramón
Bravo Sánchez

Dra. Elisa Jorge Rodríguez

Tec. Adalberto Quintana

Téc. Ana Hernández
Monzón

Universidad Central de las Villas. Departamento
Farmacia. Facultad de Química Farmacia. Cuba.