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Clonación




Enviado por claudy_cm



    Indice
    1.
    Introducción

    2. Materiales
    3. Método
    4. Resultados Y
    Discusion

    5. Conclusiones
    6.
    Bibliografía

    1.
    Introducción

    Uno de los organismos más estudiados en el campo
    de la genética
    para el tema de las mutaciones es la mosca del vinagre Drosophila
    melanogaster. En el estado
    salvaje es una pequeña mosca diploide cuyo tamaño
    es aproximadamente la tercera parte de una mosca
    doméstica. El ciclo de vida
    del díptero Drosophila melanogaster incluye las etapas de
    huevo, larva pupa y adulto, a partir del huevo, los primeros
    hechos embrionarios producen en estado
    larvario conocido como I instar, con un crecimiento
    rápido; la larva muda 2 veces /II III instar), y entonces
    se forma el estado de
    pupa, en el cual la cutícula de la larva es remplazada por
    las estructuras
    adultas y un imago. Un adulta emerge de la cáscara de la
    pupa listo para aparearse, en el caso del macho.(Strickberger,
    1978).
    Drosophila melanogaster posee cuatro pares de cromosomas, de
    los cuales: el par I es sexual siendo en la hembra (XX), largo y
    telocéntrico, mientras que en el macho, uno largo y
    telocéntrico (X) y otro corto y acrocéntrico; los
    pares II y III, son Largos y metacéntricos; y el par IV,
    corto y telocéntrico.
    La asignación de cromosomas X y Y
    en el cariotipo de D melanogaster fue realizada por Wilson y
    Stewens, quienes vieron en la hembra dos cromosomas largos X, en
    el macho uno solo y un cromosoma corto Y (Puertas,
    1992)

    Se ha determinado el sexo
    homogamético a la hembra por la presencia de dos gametos
    iguales (XX) y heterogamético al macho, que solo posee un
    cromosoma X. En especies con machos heterogaméticos como
    Drosophila los descendientes machos sus cromosomas X solamente de
    sus madres (Strickberger, 1988)

    Drosophila melanogaster tiene un número
    cromosómico bajo (2n = 8) y sus larvas presentan
    cromosomas gigantes en sus glándulas salivares por lo que
    es de gran utilidad para
    estudiar la morfología
    cromosómica y la evolución cariotípica. Además
    se cuentan con gran cantidad de líneas mutantes que
    producen fenotipos claros tales como los que muestran diferencias
    en forma, color y
    tamaño de diversas partes de su cuerpo entre
    otras.

    Por tales motivos, Drosophila melanogaster es un
    organismo ideal para la demostración de muchos principios
    biológicos y el análisis de ciencia
    descriptiva, bioquímica
    y molecular, se utiliza para estudiar problemas de
    desarrollo y
    nutrición
    fisiológicas y conducta animal,
    comportamiento, reacciones en el apareamiento y
    respuestas a la luz de diversos
    colores.

    Dada la variación de mutaciones que presenta la
    Drosophila melanogaster se ha escogido como material
    biológico preferido para estudiar el fenómeno de la
    herencia.
    Existen varios factores que contribuyen a su elección como
    organismo adecuado para la demostración de muchos principios
    genéticos en eucariotas, como son: Su bajo número
    de cromosomas (4 pares), la disponibilidad de una gran variedad
    de mutaciones, su fácil mantenimiento
    en el laboratorio, y
    su corto período generacional. (Carrera y Rueda,
    1995)

    Para la realización de este trabajo se utilizaron
    mutantes específicos tales como hembras yellow-white y
    machos salvajes para cruces hasta la segunda generación
    filial cuyos resultados fueron sometidos a un análisis cuantitativo y cualitativo con
    base en pruebas
    estadísticas y utilizando la teoría
    como base para el análisis reflexivo de los resultados
    obtenidos

    Marco teórico
    Los primeros estudios acerca de los mecanismos de la herencia, son
    atribuidos a Gregorio Mendel quien
    por primera vez utiliza diferentes variedades del tipo de
    guisantes para formular toda una experimentación
    cuantitativa basado en un procedimiento
    científico capaz de darle explicación a las
    observaciones cotidianas que apuntaban a la existencia de un
    proceso
    complejo de herencia. Sus trabajos fueron redescubiertos en 1900,
    son la base fundamental de la Genética
    Moderna, pues constituyen la primera aproximación lógica,
    descriptiva y racional del estudio de los mecanismos de la
    herencia.
    Mendel
    formuló dos grandes leyes; la primera
    expone que los miembros de la pareja genética se
    distribuyen separadamente entre los gametos (segregan), de forma
    que la mitad de los gametos llevan un miembro de la pareja
    génica y la otra mitad llevan el otro miembro de la pareja
    génica. Las proporciones fenotípicas que obtuvo
    Mendel para la segunda generación filial fueron de
    3:1.(Griffiths, 1995, p.27)

    En su segunda Ley, Mendel
    propone que: "Durante la formación de los gametos, la
    segregación de los alelos de un gen se produce de manera
    independiente de la segregación de los alelos de otro
    gen". Las proporciones fenotípicas para la segunda
    generación filial fueron 9:3:3:1.(Griffiths, 1995,
    p.30.)

    A Mendel se le atribuye haber establecido las reglas
    básicas del análisis genético, ya que su
    trabajo permitió conocer la existencia de unidades
    hereditarias, que contenían la información hereditaria que se
    transmitía de una generación a otra. Los
    términos dominante y recesivo fueron acuñados por
    Mendel, los mismos se mantienen en la actualidad; a las unidades
    hereditarias las denominó factores
    En 1912 Sutton y Boveri, propusieron la teoría
    cromosómica de la herencia, que estableció que los
    factores de Mendel eran los genes ubicados en una estructura
    definida llamada cromosoma y que estos los genes, estaban
    ubicados sobre los cromosomas. Los trabajos de estos
    investigadores fueron reforzados y esclarecidos por los trabajos
    de Morgan quien estudió los mecanismos de la herencia,
    utilizando mutaciones en Drosophila melanogaster como marcadores
    genéticos, que le permitieron observar y entender estos
    procesos.
    No obstante, mientras Mendel Solo necesitó obtener 34
    variedades de semillas, Morgan tenía que generar sus
    propias variedades de organismos. Morgan esperaba que diferentes
    variedades o mutantes del tipo silvestre aparecieran y así
    cruzar las suficientes cantidades de moscas. En un año
    aproximadamente, y entre miles de moscas, encontró su
    primer mutante, tenía ojos blancos, en lugar de rojos como
    era la normal.

    Posteriormente T.H. Morgan, en 1910, presentó
    pruebas de que
    un carácter
    específico de Drosophila melanogaster, ojos blancos, se
    hallaba ligado a la herencia del sexo y muy
    probablemente asociado a un cromosoma determinado, el cromosoma
    X. Según los datos de Morgan
    en un cultivo normal de moscas de ojos rojos había
    apreciado que un macho de ojos blancos que entonces fue cruzado
    con sus hermanas de ojos rojos, todos los individuos de la F1 de
    dicho cruzamiento presentaban los ojos rojos con excepción
    de tres machos con ojos blancos que Morgan atribuyó a
    mutaciones posteriores. Lo que presentaba un interés
    especial era el hallazgo de que al cruzar entre sí las
    moscas con ojos rojos de la F1 daban lugar a hembras con los ojos
    blancos.

    Sin embargo, aparecían hembras con los ojos
    blancos al efectuar el cruzamiento retrógrado de las
    hembras con ojos rojos de F1 con el progenitor masculino de ojos
    blancos, este último tipo de cruzamiento dio lugar a
    cuatro clases de descendiente, hembras y machos de ojos blancos,
    hembras y machos de ojos rojos.
    Para dar explicación a estos resultados Morgan propuso que
    las hembras de la F1 de ojos rojos eran heterocigotas para el
    carácter ojos blancos, recesivo. De este
    modo la aparición de hembras de ojos blancos solo
    podía darse en las hembras homocigotas para el gen white.
    Por otra parte, un descendiente masculino tenía la misma
    probabilidad
    de tener los ojos rojos que blancos si su madre era un
    heterocigoto sin reportar el genotipo de su padre. Estos
    resultados se relacionan con los hallazgos de Wilson, Stevens y
    otros de que el macho sólo tenía un cromosoma X y
    la hembra dos.

    Según esto, el macho original de ojos blancos
    tenía un gen white localizado en un cromosoma X
    único, aunque white es recesivo ese macho presentaba de
    todas formas los ojos blancos a causa de la ausencia de otro
    cromosoma X normal. Sin embargo, en las hembras el color de los ojos
    depende de los genes presentes en los dos cromosomas X y
    sólo pueden presentarse ojos blancos cuando ambos
    cromosomas X llevan el gen recesivo white.

    Un factor de gran interés en
    el estudio de la genética, son las mutaciones,
    según Griffiths (1995) "las mutaciones son cambios que se
    dan en los organismos de un estado
    hereditario a otro".
    Las mutaciones han constituido una herramienta fundamental en el
    estudio genético, pues se han convertido en verdaderos
    marcadores especiales que permiten seguir los procesos
    biológicos y se pueden utilizar con dos propósitos
    (1) para estudiar el proceso de
    mutación por si mismo y (2) para analizar una función
    biológica desde un punto de vista genético.
    Las mutaciones más fáciles de detectar son las
    mutaciones morfológicas, que afectan al color o la forma
    de cualquier órgano de un animal o planta, pues son
    rápidamente visibles y medibles.(Puertas,
    1992).

    Los estudios de mutaciones estudios han permitido
    evidenciar situaciones en las cuales las Leyes de Mendel
    se ven alteradas en las proporciones fenotípicas, como lo
    son las interacciones alélicas que se dan entre alelos de
    un mismo gen, por ejemplo la codominancia la dominancia
    incompleta, pleiotropía, dominancia completa, y las
    interacciones no alélicas que surgen entre alelos de
    diferentes genes como las epístasis.
    Otro tipo de situaciones que afectan las proporciones
    fenotípicas de Mendel son las referidas a la existencia de
    ligamientos físicos absolutos y parciales. El ligamiento
    es una concepción que surge del estudio de
    ubicación y observación de los genes en los cromosomas,
    estableciendo que si dos genes se encuentran en un mismo
    cromosoma estarán ligados físicamente por lo cual
    no podrán segregar de forma independiente uno del otro tal
    como lo exponía Mendel. El ligamiento constituye entonces
    un mecanismo que permitió explicar aquellas situaciones
    donde las leyes de Mendel no podían explicar los procesos
    de la herencia.

    Con el estudio detallado de los procesos de herencia y
    el establecimiento de los procesos de Mitosis y
    Meiosis, se
    determinó que durante la Meiosis los
    cromosomas homólogos eran capaces de intercambiar material
    genético, proceso al que se denominó
    recombinación, y que se ve evidenciado en la
    formación de estructuras
    visibles llamadas quiasmas. Para que ocurra la
    recombinación deberán acontecer una serie de
    procesos que lleven a la formación del complejo
    sinaptonémico, que mantendrá unidos a los
    cromosomas homólogos y permitirá el intercambio de
    material genético entre estos.
    La hembra en Drosophila melanogaster, constituye el sexo
    homogamético, puede recombinar ya que presenta ligamiento
    que le permiten poder romper
    porciones del cromosoma y establecer quiasmas para el intercambio
    de material genético. En el macho, que constituye el sexo
    heterogamético, existe un ligamiento absoluto que impide
    la recombinación por no darse los procesos de rompimientos
    cromosómico, esenciales para el intercambio de material
    genético.

    La recombinación en un proceso que puede influir
    en la herencia, los estudios han determinado que los gametos que
    resultan de la recombinación siempre serán en
    frecuencia menor a los que llevan genes donde no se ha dado la
    recombinación, es decir, los parentales. Sturtevant,
    propuso la existencia grosso modo de la siguiente
    proporcionalidad: conforme mayor es la distancia entre genes
    ligados, mayor es la probabilidad de
    que ocurra un entrecruzamiento entre cromátidas no
    hermanas en la zona que separa esos genes y, por lo tanto, mayor
    la proporción de recombinantes que se producen.
    En el estudio experimental y teórico de los procesos de la
    herencia, se ha desarrollado métodos
    matemáticos y estadísticos que tienen como objeto
    realizar comprobaciones de fenómenos en estudio, tal es el
    caso de cruces experimentales en Drosophila
    melanogaster.

    Planteamiento del cruce entre hembras yellow-white (yw)
    y machos salvajes(y+w+)
    Con La finalidad de demostrar fenómenos que difieren de
    los principios Mendelianos, se realizó un cruce con 2
    hembras yw y 5 machos salvajes
    Las hembras son vírgenes con mutaciones en el cromosoma I
    sexual en el locus 0.0 (yellow) y 1.5 (white) siendo silvestres
    para los demás locus, y los machos son salvajes o normales
    para todos los locus.
    Las mutaciones yellow-white están ligadas al sexo por lo
    que se encontrará segregación no independiente
    entre los genes yellow-white por estar físicamente ligados
    (en el mismo cromosoma) y dominancia completa de los alelos
    salvajes sobre los mutantes.
    Se utilizaron mutantes de cepas específicas como hembras
    yellow-white y machos salvajes, para cruces hasta la segunda
    generación filial, posteriormente los resultados fueron
    analizados con base en un análisis cuantitativo y
    cualitativo, basándose en pruebas estadísticas y utilizando la teoría
    como basa para su análisis.

    Objetivos
    Objetivo
    general.-

    • Plantear y realizar cruces experimentales con D.
      melanogaster, con la finalidad de demostrar, interacciones
      génicas, herencia ligada al sexo, ligamiento y
      recombinación.

    Objetivos específicos.-

    • Demostrar que las mutaciones yellow (y) y white (w),
      al estar ubicadas en el mismo cromosoma, segregan de forma
      dependiente.
    • Demostrar que las mutaciones (y) y (w), son
      caracteres ligados al sexo
    • Demostrar la presencia de herencia
      cruzada
    • Determinar los tipos de gametos posibles en cruces
      genéticos y calcular las frecuencias gaméticas
      esperadas.
    • Determinar si se presentan recombinantes y cual es su
      proporción
    • Demostrar si los descendientes parentales son
      más numerosos que los descendientes
      recombinantes
    • Determinar frecuencia genotípicas y
      fenotípicas esperadas hasta la segunda generación
      filial.
    • Determinar si las descendencias esperadas en la
      F1 y F2 y comparar con las descendencias
      observadas.
    • Verificar la validez de la hipótesis planteadas para la
      F1 y F2, a través de la
      aplicación de la prueba chi cuadrado.

    Hipótesis
    Primera generación Filial (F1)
    Al realizar el cruce experimental donde las hembras son yw
    homogaméticas y los machos y+w+
    heterogaméticos, cuyos genes para la mutación yw
    son recesivas y están ubicados en el cromosoma I (sexual)
    X; es de esperarse que en la primera generación filial,
    todos los machos expresen el fenotipo de la madre (yw) y todas
    las hembras sean salvajes expresando el fenotipo del padre
    (y+w+ ), evidenciando así herencia
    cruzada.

    Segunda generación filial (F2)
    Al realizar un segundo cruce (endocruce), entre individuos de la
    primera generación filial cuyas hembras son homocigotas y
    los machos hemicigotos, para cualquier carácter ligado al
    sexo, es de esperarse que ocurra segregación
    dependiente.
    En el cruce para los genes considerados "y" y "w", los cuales se
    encuentran en el mismo cromosoma (X), es de esperarse ligamiento
    físico, interacciones no alélicas y ligamiento al
    sexo, siendo más frecuentes estas mutaciones (yw en los
    machos, así como también proporciones
    fenotípicas de diferentes caracteres como Yellow-white
    (yw), salvajes (y+w+ ),yellow (y
    w+ ) y white (y+ w).
    Por encontrarse los locus 0.0 "y" y 1.5 "w" muy cercanos en el
    mapa genético del cromosoma X, es de esperarse que la
    probabilidad de recombinación sea
    mínima.

    2.
    Materiales

    Sustancias e instrumental

    • Frascos de vidrio con
      tapones y medio de cultivo
    • Frascos de vidrio
      vacíos con tapones
    • Lupa estereoscópica
    • Agujas de disección
    • Frasco eterizador
    • Cápsula de petri
    • Tubo transportador
    • Pincel fino de cerdas naturales
    • Placas de porcelana
    • Almohadilla de anime
    • Eter dietílico
    • Morgue ( frasco de vidrio con aceite de motor
      )

    Biológicos

    • Lineas mutantes de Drosophila
      melanogaster
    • Dos (2) hembras vírgenes
      yellow-white
    • Cinco (5) machos salvajes

    Descripcion y designacion de las lineas mutantes
    y : yellow ( I-0.0 )- cuerpo
    Origen : espontáneo
    Descubrió : E. Wallace
    Fenotipo : cuerpo amarillo, pelos y cerdas café
    con puntas amarillas. Las setas y las partes bucales de la larva
    son café,
    distinguibles del café oscuro del tipo silvestre.
    w : white ( I-1.5 ) – ojos
    Origen: espontáneo
    Descubrió: Morgan
    Fenotipo: ojos color blanco puro. Los ocelos, la cubierta de los
    testículos
    de adultos y los tubos de Malpighi de las larvas son incoloros.
    Los alelos de tipo silvestre no dominan completa sobre white, w/+
    tiene menos pigmento rojo que +/+.

    3.
    Método

    Para llevar a cabo estudios experimentales con
    Drosophila melanogaster se utilizaron dos (2) hembras
    vírgenes yellow-white y cinco (5) machos con el fenotipo
    salvaje, observando con detenimiento las características de estas moscas al
    presentar estas mutaciones. Para observarlas se utilizó la
    técnica del blanqueo, que permite narcotizar al grupo de
    moscas de un cultivo determinado para observarlas mientras se
    encuentran dormidas.

    Procedimiento para narcotizar y transportar Drosophila
    melanogaster.
    1.- En un frasco limpio y vacío con un tapón de
    algodón previamente impregnado con 5 ó 6 gotas de
    éter dietílico, se esperan 2 minutos mientras se
    formaba una atmósfera de
    éter en el interior del mismo, construyéndose
    así el frasco eterizador.
    2.- Se golpeaba firmemente 2 ó 3 veces el frasco de
    cultivo, (tomando en cuenta las condiciones del cultivo) sobre
    una lámina de anime, de manera que las moscas pasaran a la
    parte inferior del frasco. Este paso se realizó con mucho
    cuidado a fin de evitar que el frasco se rompa o que las moscas
    se precipiten contra el medio y queden pegadas a él, lo
    que ocasionaría su muerte.
    3.- Inmediatamente y en forma rápida se procedió a
    destapar ambos frascos colocándolos boca a boca ubicando
    el eterizador en la parte superior. Los tapones de los frascos
    debían siempre estar agarrados por el responsable del
    blanqueo para evitar la
    contaminación de los mismos.
    4.- Se invirtió la posición de los frascos,
    haciendo que el frasco eterizador quedara en la parte que hace
    contacto con el anime. Se golpea suavemente unas dos o tres veces
    de manera que todas las moscas del medio de cultivo pasaran al
    frasco eterizador.
    5.- Se tapaban inmediatamente los dos frascos con sus respectivos
    tapones, y se esperaban unos segundos a que las moscas se
    durmieran para empezar a observarlas.
    6.- Con ayuda de un pincel fino se transportaba y manipulaba a
    las moscas del frasco eterizador a las lupas, láminas o
    cápsula narcotizantes.
    7.- Una vez dormidas se transportaron a la baldosa y se
    observaron a la lupa, si se evidenciaba que las moscas estaban
    despertando, se utilizaba una cápsula de petri con un
    pedazo de gasa con unas gotas de éter para tapar el
    área donde se encontraban las moscas y volverlas a
    dormir.

    Eliminación de moscas: Si se desea transportar
    algunas moscas que quedaron en el cultivo, se utilizaba el
    transportador, que son tubos de vidrio con extremo en bisel y el
    otro conectado a una manguera, entre la manguera y la boquilla se
    coloca una gasa que impida el paso de moscas, este transportador
    permitía succionar las moscas y mantenerlas en un sitio
    determinado cerrando el extremo en bisel del transportador, para
    posteriormente; por un lado del tapón del cultivo
    insertarlas sin necesidad de abrir el frasco del cultivo, o de
    sacarlas sin necesidad de realizar un nuevo blanqueo.

    Selección de hembras vírgenes
    Para ello existen tres métodos
    diferentes:
    a.- Colectas a partir de imagos: este se da en un ciclo de diez
    días, el primer día se siembra la línea de
    moscas, el quinto se retira a los progenitores para evitar que se
    confundan con la progenie; luego el décimo día se
    eliminan las moscas que hayan emergido durante la noche. Se
    procede a separar hembras y machos, se colocan las primeras en
    medio fresco y se elimina a los machos
    b.- Colecta a partir de larvas del tercer estadio: para ello se
    recurre a la observación de las gónadas larvarias
    (que son de distinto tamaño en ambos sexos) utilizando un
    microscopio de
    disección a 4x o 10x. Una vez colectadas las hembras se
    colocarán en frascos con medio fresco para que completen
    su desarrollo.
    c.- Colecta a partir de pupas: Ya que el sexo puede determinarse
    si se examina la superficie ventral de esta con ayuda de un
    microscopio de
    disección. En las pupas machos () se distingue los
    peines sexuales, lo que facilita este método.
    Cabe mencionar que este fue el método
    utilizado por la profesora para la colecta de hembras
    vírgenes, las cuales fueron entregadas a cada equipo de
    trabajo para su estudio y experimentación.

    Procedimiento para el cruce experimental
    A.- Montaje del cruce P1 x P1:
    Para este primer cruce se colocaron en un frasco con medio de
    cultivo 2 hembras vírgenes (yw) y 5 machos salvajes, estas
    moscas constituyeron nuestra primera generación parental.
    Al cabo de 8 días, se eliminaron los padres;
    encontrándose muchas larvas que se constituirían en
    las moscas de la primera generación filial, se
    examinó meticulosamente el fenotipo de cada una,
    realizándose el primer conteo de machos y hembras.
    B.- Montaje del Endocruce F1 x F1:
    Se tomaron 8 hembras héterocigotas en
    representación de la primera generación filial, y
    se cruzaron con 16 machos hemicigotos en representación de
    la primera generación filial, se transportaron a un nuevo
    medio de cultivo, y se identificó fecha, características y tipo de cruce realizado.
    Al cabo de ocho días se retiraron los padres, comprobando
    que existían suficientes larvas y pupas en el frasco, el
    día 16 luego de montado el endocruce se realizó el
    primer conteo de la segunda generación filial,
    determinando los fenotipos y sexos de las moscas adultas
    emergidas en este endocruce, a los 8 días posteriores se
    realizó el segundo conteo, determinando los mismos
    elementos.

    4. Resultados Y
    Discusión

    Después de realizar las cruces en el laboratorio se
    obtuvieron los siguientes resultados:
    Primera generación filial (F1)
    Cruce teórico
    yw x y+w+
    (2 hembras) (5
    machos)

    Designación:
    y: yellow (I- 0.0) – cuerpo
    w: white (I- 1.5) – ojos
    P1:

    Cuadro I: Fenotipos observados en la Primera
    eneración filial (F1),entre machos salvajes y hembras
    mutantes "yw"

    Nº individuos

    FENOTIPO

    MACHOS

    HEMBRAS

    TOTAL

    salvajes

    0

    10

    10

    yellow-white (yw)

    136

    0

    136

    TOTAL

    146

    Análisis y discusión de resultados en la
    F1
    Al observar los resultados obtenidos en la primera
    generación filial encontramos que las hembras muestran el
    carácter salvaje y los machos las mutaciones yellow-white
    como la madre lo que es evidencia de una herencia cruzada dado
    que las mutaciones presentes en el macho se ubican en el
    cromosoma sexual X el cual fue aportado por la madre;
    además encontramos una dominancia completa del alelo
    salvaje sobre el mutante. De esta forma se demuestra la
    hipótesis
    planteada para F1.
    Cabe destacar, que un hecho curioso, es la aparición
    escasa o insignificante de hembras salvajes en los 2 conteos
    realizados, hecho el cual, no pudo ser explicado, con base en la
    bibliografía, sin
    embargo se puede inferir que debido a factores ambientales, las
    proporciones, en cuanto a números, no se cumplieron, no
    obstante, los fenotípos hallados corresponden con las
    hipótesis.

    Segunda generación filial (endocruce)
    Cruce experimental
    P2: F1 x F1 (8 hembras y 16 machos )

    Fenotipos

    machos

    hembras

    total

    ++

    155

    155

    310

    yw

    159

    141

    300

    y

    0

    1

    1

    w

    0

    1

    1

    Cálculos:
    1.- Fracción recombinante de la hembra
    r = 1.5 – 0.0 = 0.015
    100

    2.- Fracción parental de la hembra
    p = 1 – 0.015 = 0.985

    3.- Fracción de cada gameto parental de la
    hembra
    0,985 / 2 = 0.4925

    4.- Fracción de cada gameto recombinante de la
    hembra
    F = r/2 = 0.015 / 2 = 0.0075

    5.- Fracción de cada gameto parental del
    macho
    p = 1 / 2

    6.- Frecuencia genotípica
    Parental : 0.4925 x 1/2 = 0.244625
    Recombinante : 0.0075 x 1/2 = 0.00375

    7.- Frecuencia fenotípica parental de hembras
    yw = 1 x 0.24625 = 0.24625
    y+w+ = 1 x 0.24625 = 0.24625

    8.- Frecuencia fenotípica para machos
    yw = 1 x 0.24625 = 0.24625
    y+w+ = 1 x 0.24625 = 0.24625

    9.- Frecuencia fenotípica recombinante para
    hembras
    y = 1 x 0.00375 = 0.00375
    w = 1 x 0.00375 = 0.00075

    10.- Frecuencia fenotípica para machos y hembras
    esperada de recombinantes más parentales

    PARENTALES

    RECOMBINANTES

    fenotipo

    hembras

    machos

    hembras

    machos

    total

    ++

    0.24625

    0.24625

    0.4925

    yw

    0.24625

    0.24625-

    0.4925

    y

    0.00375

    0.00375

    0.0075

    w

    0.00375

    0.00375

    0.0075

    11.- Número de individuos esperados para cada
    fenotipo
    n = f x N

    Hembras:
    y+w+ = 0.24625 x 612= 150.705
    yw = 0.24625 x 612= 150.705
    y = 0.00375 x 61 = 2,2952
    w = 0.00375 x 61 = 2,2952

    Machos:
    y+w+ = 0.24625 x 612= 150.705
    yw = 0.24625 x 612= 150.705
    w = 0.00375 x 61 = 2,2952
    y = 0.00375 x 61 = 2,2952

    12.- Cálculo de
    chi cuadrado
    g l = 4 – 1 = 3
    Cuadro 2: Calculo del chi cuadrado para fenotipos de las
    hembras

    Fenotipo

    Observados

    O

    Esperados

    E

    (O-E)2

    (O-E)2

    2

    y+w+

    155

    151

    16

    0.1059

    yw

    159

    151

    64

    0.4238

    y+w

    1

    2

    1

    0.5

    yw+

    1

    2

    1

    0.5


    X2

    1,52

    Cuadro 3: Calculo de chi cuadrado para fenotipos en
    machos

    Fenotipo

    Observados

    O

    Esperados

    E

    (O-E)2

    (O-E)2

    2

    y+w+

    155

    151

    16

    0.1059

    yw

    141

    151

    100

    0.6622

    y+w

    O

    2

    4

    2

    yw+

    0

    2

    4

    2


    X2

    4,76

    X2 (experimental ) = 1,52
    X2 (experimental ) = 4,76
    X2(crítico ) = 7,815

    Se aceptan todas las hipótesis
    establecidas para la segunda generación filial
    Análisis y discusión de los resultados para
    F2
    Al realizar el endocruce entre los individuos
    obtenidos en la F1 tenemos que se encontraron sólo cuatro
    (4) productos
    meióticos o fenotipos de los cuales dos de éstos
    eran iguales a sus padres y los otros dos eran "y" y "w" que eran
    los recombinantes. Si se considera el valor de la
    fracción recombinante r= 0,015 resulta bajo en
    comparación con el valor de la
    fracción parental p= 0,985.
    Al respecto puede decirse que la fracción recombinante
    representa 1,5% este indica que la distancia entre el locus en
    donde se encuentra ubicada la mutación "y" se haya
    bastante cercana de donde está ubicada la mutación
    "w", básicamente es una distancia entre 0,0 y 1,5 .Estos
    resultados corresponden con los estudios de Sturtevant (citado es
    Suzuki, D et al, 1995, p. 129) donde propone que "con forme mayor
    es la distancia entre genes ligados, mayor es la probabilidad de
    que ocurra un entrecruzamiento entre cromátidas no
    hermanas en la zona que separa estos genes y, por lo tanto, mayor
    la proporción de recombinantes que se produce ".
    El anterior estudio permite entender que en un cruce entre genes
    de loci tan cercanos genera un bajo porcentaje de individuos
    recombinantes tal y como se aprecia en la tabla respectiva, donde
    los productos
    meióticos recombinantes, son mínimos y en algunos
    casos no aparecen, cabe destacar que al aumentar la población, es posible que aumente el
    número de recombinantes.
    Al comparar el número de individuos parentales y
    recombinantes esperados se encuentra que en cuanto a fenotipos
    aparecen en igual cantidad sin embargo al analizar los valores
    entre hembras y machos de cada fenotipo se tiene que los
    parentales aparecen en mayor cantidad que los recombinantes esto
    se deba a que el valor de la fracción recombinante y al
    hecho de que en Drosophila melanogaster el macho no recombina
    La prueba Chi cuadrado indica que los valores
    experimentales tanto para machos como para hembras son menores
    que el valor crítico de la tabla lo que indica que se
    aceptaron las hipótesis para la segunda generación
    filial.
    En cuanto a los genes "y" y "w", ambos se ubican en un mismo
    cromosoma (I sexual) por lo tanto existe ligamiento físico
    entre ambos y por consiguiente segregan de forma no
    independiente.
    Estos resultados coinciden con los de Morgan, que
    estableció que "una frecuencia de recombinante
    significativamente inferior al 50% demuestra que los genes
    están ligados, por lo tanto también segregan de
    forma dependiente

    5.
    Conclusiones

    Se reportó la existencia herencia ligada al sexo
    en la F1 debido que los machos mostraron todos el
    fenotipo de la madre "y" y "w" mientras que las hembras
    resultaron ser todas salvajes, lo que indica que se trata de una
    herencia cruzada.
    Las mutaciones "y" y "w" están ligadas físicamente
    por encontrarse las dos ubicadas en el cromosoma I (sexual x )
    por lo tanto existe una una segregación no
    independiente.
    La cantidad de individuos parentales resulta ser mayor que el
    número de recombinantes, debido a la poca distancia entre
    los genes ligados lo cual se evidencia en una baja
    fracción recombinante de los gametos femeninos.
    Se demostró la dominancia completa de los alelos salvajes
    sobre los alelos mutantes "y" y "w"

    6.
    Bibliografía

    Carrera,S. y Rueda,I.(1995).Guia de laboratorio de
    Genética General. Trabajo no publicado. Instituto
    Pedagógico de Caracas, Departamento de Biología y Química.
    Cátedra de Genética General.
    Griffith,A; Miller, J; Suzuki, D; Lewontn, R. y Gelbart,
    W.(1995). Genética Editorial McGraw-Hill.
    Karp, G(1987). Biología Celular,
    Editorial Mc Graw -Hill, Mexico
    Puertas,M.(1993). Genética. Fundamentos y
    Perspectivas.Editorial McGraw-Hill.
    Ramos,P.(1993). Manual de
    Laboratorio de Genética.
    Strickberger, M (1982). Genética Edit. Omega, Barcelona,
    España,

     

     

    Autor:

    Ceballos Claudia

    Universidad
    Pedagógica Experimental Libertador
    Instituto Pedagogico De Caracas
    Dpto. Biologia y quimica
    Catedra: genetica y evolución

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