Inducción del proceso Embriogénico en henequén.

Introducción

El henequén es una planta textil de primer orden.
El principal producto extraído de sus hojas, y el de mayor
utilidad en la industria textil, son sus fibras. No obstante, la
cantidad de subproductos que de él se obtienen permite que
pueda ser aprovechado integralmente, lo que lo convierte en una
planta muy útil.

Entre sus múltiples bondades se encuentran su
capacidad fitorremediadora, su uso como abono orgánico,
para la producción de biogás, su utilidad como
alimento para rumiantes como dieta basal en situaciones de
escasez de pastos y su empleo como cerca viva.

Por otra parte este cultivo ofrece un gran potencial de
uso en zonas donde los suelos son infértiles y es limitado
el desarrollo agrícola, pues se trata de una especie que
prospera donde otras plantas son incapaces de sobrevivir, por
tanto, no compite con los cultivos utilizados para la
alimentación humana y animal.

A pesar de esto su cultivo está marginado y la
falta de material de propagación ha conllevado al uso de
todo tipo de material, lo cual trae como consecuencia
plantaciones no uniformes, que han contribuido al deterioro
gradual de las mismas. Esta situación determina la
necesidad de producir material de propagación de alta
calidad que por la vía tradicional es imposible resolver
en un periodo corto de tiempo. El desarrollo de una
metodología eficiente de propagación vegetativa
como la embriogénesis somática se
convertiría en una poderosa herramienta para obtener
volúmenes de producción superiores en un menor
período de tiempo.

Palabras clave: henequén; 2,4-D; Picloram;
embriogénesis.

Materiales y
métodos

Esta investigación se desarrolló en el
Centro de Estudios Biotecnológicos de la Universidad de
Matanzas "Camilo Cienfuegos".

• 1. Técnicas y procedimientos
  generales

Se utilizó el medio de cultivo MS (Murashige y
Skoog, 1962) con las modificaciones propuestas por Robert et
al., (1992), suplementado con sacarosa (3% p/v) y
myo-inositol (100 mg/L-1). Se emplearon frascos de vidrio de 250
ml con 25 ml de medio de cultivo. La esterilización de los
medios de cultivo se realizó en autoclave a una
temperatura de 121° C y 1,2 kg/cm2 de presión durante
20 minutos. La solidificación se hizo con Agar
Técnico # 3 (BIOCEN). El pH se ajustó a 5.7 con HCl
(0,1 N) previo a su esterilización. Los cultivos se
incubaron en cámaras de luz solar con una
iluminación aproximada de 3000 lux (37,5 mol/m-2/s-1) y
fotoperíodo de 16 horas luz. La temperatura osciló
entre los 25 y 28°C.

• 2. Selección del material vegetal

Para este trabajo se utilizaron plantas de
henequén de la variedad Sac Ki o henequén blanco
crecidas en condiciones de plantación
comercial.

Para realizar la desinfección superficial los
explantes se colocaron en una disolución de hipoclorito de
sodio al 5%, durante 20 minutos, posteriormente se realizaron 3
enjuagues con agua destilada estéril y a
continuación se eliminaron las partes dañadas por
el cloro. A partir de este momento el tejido se condujo al flujo
laminar y se sometió a una segunda desinfección,
para ello el material vegetal se colocó en una
disolución de hipoclorito de sodio al 5%, durante 10
minutos; posteriormente se realizaron 3 enjuagues con agua
destilada estéril y se eliminaron los fragmentos
dañados por el cloro. Una vez concluida la
desinfección los explantes se sembraron en el medio
propuesto para el establecimiento.

• 3. Evaluación de la respuesta
  morfogénica de explantes de henequén sembrados
  en altas concentraciones de auxinas

Explantes correspondientes a hojas inmaduras cultivadas
in vitro en medios de establecimiento según
Garriga et al., (2006) se seleccionaron y se plantaron
en medio de inducción de callo: 0; 2,5; 5 y 10 mg/L de
2,4-D y Picloram. Todas las concentraciones de auxinas se
combinaron con 2,0 mg/L de BAP. El tamaño corresponde a
ocho frascos con tres explantes cada uno. Se evaluaron en todos
los explantes, a los 30 días de realizada la
explantación, el porcentaje de formación de callo
primario y el porcentaje de callo con estructuras
embriogénicas.

• 4. Evaluación de indicadores del
  crecimiento en callos de henequén inducidos con altas
  concentraciones de auxinas

A los 30 días de realizada la explantación
se procedió a la evaluación de la producción
de masa seca. Esta variable se determinó después de
secar el callo en estufa a 70oC hasta obtener un peso constante.
Para ello se emplearon 5 explantes por tratamiento.