Caracterización de las fibras del músculo gluteus medius en equinos por métodos histoquímicos e inmunohistoquímicos
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RESUMEN: Se tomó una biopsia
a cuatro centímetros de profundidad en el músculo
Gluteus medius de 16 equinos. Los animales
tenían una edad promedio de 6 años y durante 3
meses previo a la toma de la biopsia no habían realizado
entrenamiento.
Las muestras fueron analizadas por medio de la técnica
mATPasa miofibrilar, NADH-TR e inmuno-histoquímica. Los
porcentajes de fibras tipo I, IIA, IIB oxidativas y no oxidativas
fueron de un 14, 39, 30 y 17%, respectivamente, para la
técnica histoquímica y un 16, 35, 29 y 20% para las
fibras tipo I , IIA, IIX y IIA+IIX para la técnica
inmuno-histoquímica. El análisis estadístico demostró
que no existen diferencias signifi-cativas entre ambas técnicas
para la determinación de las fibras. Los resultados
obtenidos permiten concluir que la inmunohistoquímica es
una técnica que permite realizar una clasificación
adecuada de la población fibrilar del músculo
Gluteus medius en equinos adultos.
SUMMARY: Biopsies were taken at a depth of 4cm
from the Gluteus medius muscle of 16 horses. The animals
were 6 years old and had not been trained during 3 months before
the study. The samples were analized by mATPase miofibrillar
technique to determine the fibrillar composition by NADH-TR
technique to determine the oxidative capacity of the fibres and
immunohistochemistry to determine the fibre type.
The histochemical study revealed an average fibrillar
composition of 14, 39, 30 and 17 % for fibres typed I, IIA, IIX
oxidative and IIX no oxidative and the inmunohistochemistry study
showed 16, 35, 29 y 20% for fibres type I, IIA, IIX and
IIA-IIX.
The statistical analyses showed a good relationship
between the histochemical and inmunohistochemical method in the
determination of fiber types.
The immunohistochemical method allows a good
identification of the fiber in adult horses.
Palabras Claves: músculo,
histoquímica, inmunohistoquímica, caballos Key
words: muscle, histochemistry, immunohistochemistry,
horses.
INTRODUCCIÓN
Los estudios sobre las características
histoquímicas de los músculos esqueléticos
de los equinos desarrollados en los últimos 25 años
han establecido que estos son altamente complejos y que las
propiedades contráctiles y metabólicas de ellos
pueden determinar las cualidades funcionales y la capacidad de un
individuo.
Tradicionalmente, la técnica histoquímica
miosina adenina trifosfatasa miofibrilar (mATPasa) ha sido la
metodología usada convencionalmente para la
identifica-ción de las fibras musculares
(López-Rivero y col., 1993), determinándose fibras
tipo I, IIA y IIB, según las propiedades
contráctiles y metabólicas de ellas,
clasificándose en fibras lentas, rápidas e
intermedias. La capacidad metabólica de las fibras se
evalúa con la tinción nicotin adenina
dinucleótido tetrazolium reductasa (NADH-TR), que permite
clasificar las fibras tipo IIB en oxidativa y no oxidativa,
según la intensidad de la tinción (Brooke y Kaiser
1970; Valberg y col., 1988).
Se ha demostrado que las propiedades contráctiles
del músculo e intensidad de la tinción con mATPasa
dependen de las cadenas pesadas de miosina de las fibras
(Bottinelli y col., 1994) y que las técnicas
histoquímicas no permiten identificar algunos tipos de
fibras, en particular las hibridas que presentan
coexpresión de las cadenas pesadas de miosina, (Shina y
col., 1992) existiendo una alta diversificación de los
porcentajes de los subtipos de las fibras rápidas en las
regiones mas superficiales del músculo Gluteus medius en
equinos jóvenes (López-Rivero y col.,
1999).
La molécula de miosina es el componente primario
de los miofilamentos y es la principal proteína
contráctil de la fibra muscular. Esta molécula
está compuesta por dos cadenas pesadas de miosina (MHC,
Myosine Heavy Chain) y cuatro cadenas livianas de miosina (MLC
Myosine Light Chain), identificándose en el músculo
esquelético de los mamíferos distintas isoformas (Serrano y
col., 1996).
Las técnicas de electroforesis e
inmuno-histoquímicas utilizando anticuerpos mono-clonales
han permitido una identificación mas específica de
las MHC de las fibras musculares (Pette y Staron 1990). En estos
estudios se ha demostrado que existen 4 formas de MHC en
músculos de algunos mamíferos (I, IIA, IIX/IID y
IIB), (Bärr y Pette, 1988), y fibras tipo I, IIA y IIX en
músculos humanos (Smerdu y col., 1994), fibras puras tipo
I, IIA y IIX y fibras mixtas (I+IIA y IIA+IIX) en equinos
(Linnane y col., (1999), lo que indicaría que esta
técnica permite una clasificación más
objetiva de las fibras al compararla con la técnica
histoquímica. Con la técnica
inmuno-histoquímica las fibras denominadas IIX y IIA+IIX
corresponden a las fibras clasificadas como IIB oxidativas y IIB
no oxidativas utilizando la técnica mATPasa.
Este estudio tiene como objetivo
comparar las técnicas histoquímicas e
inmunohistoquímicas en la clasificación de la
composición fibrilar del músculo Gluteus
medius en caballos adultos.
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