Determinación de Especies de Erwinia (grupo carotovora) como Agentes Causales de "Pudrición Blanda" en Cala (Zantedeschia spp.)

• Introducción
• Materiales y
  métodos
• Resultados
  y discusión
• Conclusiones
• Literatura
  citada

ABSTRACT: During the 2002 growing
season a research was conducted in order to establish the causal
agents responsible for "soft rot" in stems and tubers of calla
(Zantedeschia spp.) in greenhouse productions in Southern
Chile. In order to compare with local bacterial isolates, "soft
rot" was induced in potato (Solanum tuberosum L.) tubers
from commercial productions near the city of Valdivia. To
establish differences in virulence, potato isolates were
inoculated on calla tissues and viceversa. 33 isolates were
determined to belong to the genus Erwinia
(carotovora group) (E.c.) accordingly to the
following characteristics: Gram (-), oxidase (-), potato rot.
Complementary and more specific tests included, sensitivity to
erythromycin, utilization of palatinose, reducing substances from
sucrose, acid production from a-methyl glucoside and growth at
37ºC. Finally, it was possible to identify two isolates of
E.c. subsp. atroseptica and 21 E.c. subsps.
carotovora isolatedfrom calla plants tubers. There was no
evidence of the phytopathogenic species E. chrysanthemi
among the isolates studied, an indication that this bacterial
pathogens is absent in Chile. This is the first report indicating
that isolates of Erwinia carotovorasubsp.
atroseptica are affecting a new crop in Chile, such as
calla. The cross inoculations performed demonstrated that
virulence is more aggressive with isolates originated obtained
from calla tissues. Chances that the isolates obtained from calla
came from abroad are very high, and may interfere with local
crops such as potato.

Key words: Erwinia, soft rot, calla,
Zantedeschia.

RESUMEN: Durante la temporada 2002 se
realizó una investigación para establecer los agentes
causantes de pudriciones húmedas en tallos y
túberos de cala (Zantedeschia spp.) provenientes de
producciones bajo invernadero en el Sur de Chile. Para comparar
con cepas locales se realizaron aislamientos a partir de
tubérculos de papa (Solanum tuberosum L.) obtenidas
de una producción comercial cerca de la ciudad de
Valdivia. Para analizar las diferencias en virulencia, las cepas
de papa fueron inoculadas sobre cala y vice versa. De los
aislamientos bacterianos obtenidos se determinaron 33
pertenecientes al género
Erwinia (grupo
carotovora)(E.c.) de acuerdo a las siguientes
características: Gram (-), oxidasa (-) y pudrición
de rodajas de papa (+). Pruebas
complementarias y más especificas incluyeron sensibilidad
a la eritromicina, utilización de la palatinosa,
sustancias reductoras a partir de sacarosa, producción de
ácido a partir de a-metil glucósido y crecimiento a
37ºC. Finalmente, fue posible identificar dos cepas de
E.c. subsp. atroseptica y 21 E.c. subsp.
carotovora de túberos y plantas de cala.
No hubo evidencia de la presencia de la especie
fitopatógena E. chrysanthemi entre los aislamientos
estudiados, una indicación que esta especie está
ausente en Chile. Este es el primer informe sobre la
presencia de aislamientos de la subespecie 
atroseptica afectando un nuevo cultivo como la cala en
Chile. Las inoculaciones cruzadas demostraron que la virulencia
es mayor con las cepas obtenidas de tejidos de cala.
Las posibilidades que estas cepas sean foráneas son
bastante altas, y pueden interferir con producciones de cultivos
locales como la papa.

Palabras clave: Erwinia, pudrición
húmeda, cala, Zantedeschia.

INTRODUCCIÓN

La X Región de Chile es una zona que se
caracteriza por presentar en gran parte una agricultura
tradicional, sin embargo, en la actualidad se están
explorando nuevos rubros productivos. Existen diversas empresas y
agricultores que están invirtiendo e incursionando en el
cultivo industrial de calas de colores
(Zantedeschia spp.) para la producción de flores de
corte. Nuevas y llamativas variedades son producidas para ser
comercializadas tanto a nivel nacional como internacional; el
volumen de
unidades se ha incrementado año tras año, como
también la superficie plantada. A pesar que una importante
parte de esta actividad se realiza al aire libre, el
cultivo intensivo bajo plástico
está incrementando. Algunas de estas explotaciones se han
iniciado importando túberos desde el extranjero,
implicando importantes inversiones
iniciales.

A medida que las actividades de este rubro han ido
avanzando en el tiempo, se ha
podido establecer la presencia de factores que disminuyen su
rentabilidad.
Uno de ellos es la enfermedad que se presenta en túberos y
base de tallos de plantas, conocida como "pudrición
blanda". Esta patología es universalmente atribuida a
bacterias del
género Erwinia, patógenostípicos
causantes de este tipo de daños. De acuerdo a Wright y
Burge (2000), en Nueva Zelanda, nación
que exporta un gran volumen de flores y túberos, sufre
pérdidas anuales que alcanzan los dos millones de
dólares.

La taxonomía
del género Erwinia es compleja y está
constituida por varios grupos. El
más relevante es el grupo carotovora que se
caracteriza por incluir la especie  E.
chrysanthemi (Ech) y las subespecies E. carotovora
subsp. carotovora (Ecc) y E. carotovora subsp.
atroseptica (Eca). De acuerdo a Hauben et al.
(1998) éstas han sido clasificadas en el antiguo
género Pectobacterium, como P. chrysanthemi,
P. carotovorumsubsp. carotovorum y P.
carotovorum subsp. atrosepticum, sin embargo, esta
nomenclatura
no ha sido ampliamente aceptada por los fitopatólogos. Los
síntomas causados por estas bacterias en túberos y
base de los tallos son la clásica alteración
enzimática de los tejidos, que se tornan blandos y
húmedos. Asimismo, también como acción
bacteriana se puede presentar una errática emergencia de
los tallos y la posterior caída de los mismos. Otro
síntoma, es el colapso del pedúnculo de la flor ya
cortada durante el período de postcosecha. Además,
el  tejido degradado y macerado por las Erwinia spp.
bajo condiciones naturales es de consistencia blanda, de aspecto
opaco, de color blanco y
desprende un fuerte olor a podrido (Welsh, 1991; Dole y Wilkins,
1999).

En la actualidad, en Chile, y en particular en la X
Región, no se han realizado estudios tendientes a
determinar los agentes causantes de esta enfermedad. Como
hipótesis de la presente
investigación, se postula que las severas pudriciones de
túberos y tallos de plantas de cala detectados en el sur
de Chile, son provocadas por especies de Erwinia
pertenecientes al grupo carotovora. Por lo tanto, el 
objetivo
principal de este trabajo fue
llevar a cabo procedimientos de
aislamiento y diagnóstico bacteriológico para
establecer los agentes responsables involucrados en el desarrollo de
síntomas de "pudrición blanda", en tejidos
sintomáticos provenientes de túberos de cala de la
X Región. Como objetivo secundario se realizaron
comparaciones de virulencia entre aislamientos bacterianos
provenientes de cala con aquellos que inducen similar
patología en tubérculos de papa (Solanum
tuberosum L.).

MATERIALES Y MÉTODOS

Material biológico

Las variedades y el número de túberos
colectados con síntomas de pudrición en la
localidad de Cayumapu, Valdivia (39º38’ lat. Sur,
73º5’ long. Oeste) fueron los siguientes:
‘Chianti’ (8), ‘Pot of Gold’ (8),
‘Sensation’ (12), ‘Florex Gold’ (8),
‘Majestic Red’ (7),
‘Aurora’ (10) y ‘Hot Shot’ (10). En
Puerto Octay se obtuvieron 15 túberos de la variedad
‘Majestic Red’ y desde la Estación
Experimental Santa Rosa de la Universidad
Austral de Chile, Valdivia, se colectaron dos túberos de
una variedad no identificada. También se contó con
dos muestras que presentaban tallos con pudrición blanda,
la primera formada por 15 plantas de la var. ‘Hot
Shot’, y la segunda por dos plantas de
‘Aurora’. Ambas obtenidas de una plantación de
calas de colores en las cercanías de Valdivia (Cayumapu).
Para la obtención de aislamientos bacterianos causantes de
pudriciones húmedas a partir de papa se utilizaron 20
tubérculos de papa cv. Desirée.

Medios de cultivo

El medio para realizar los aislamientos fue agar peptona
(AP). Para determinar las pruebas de sensibilidad a eritromicina
se usó agar nutritivo adicionado con glucosa al 1%.
Para detectar sustancias reductoras a partir de sacarosa se
usó el medio sacarosa (MS). El medio levadura y sales (LS)
se utilizó para determinar el crecimiento a 37°C y el
medio oxidación/fermentación (O/F) para determinar la
utilización de la palatinosa y del
a-metil-glucósido. La composición y
preparación de estos sustratos se realizó de
acuerdo a  Schaad (1994) y Pérombelon y Van der Wolf
(1998).