Concentraciones de inmunoglobulinas séricas y calostrales de vacas selenio-deficientes y en el suero sanguíneo de sus terneros
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Resumen: Se estudió el efecto
de una dieta selenio-deficiente en vacas gestantes sobre la
concentración de inmunoglobulinas en el calostro y en el
suero sanguíneo de las crías en sus primeras horas
de vida. Para ello se trabajó con 12 vacas gestantes (7-8
meses) entre 4-9 años de edad, mantenidas en
estabulación permanente y sometidas a una dieta deficiente
en selenio (0.04 ppm de materia seca),
constituida por heno y un alimento concentrado comercial
seleniodeficiente. Un grupo de seis
vacas fueron suplementadas con selenato de bario (1 mg Se/kg,
s.c.). El balance de selenio fue medido a través de la
actividad de GSH-Px eritrocítica. La medición de inmunoglobulinas en el suero y
calostro de las vacas y en el suero de los terneros se
realizó por inmunodifusión radial.
Los resultados demostraron que no existen diferencias (P
< 0.05) en la concentración de IgG, IgM e IgA entre
vacas suplementadas y no suplementadas. La deficiencia de Se no
afectó la concentración de IgG total, IgM e IgA en
calostro; sin embargo la suplementación con selenio
disminuyó (P < 0.05) la concentración de IgG1.
Por otra parte, la deficiencia nutricional de Se en las vacas no
afecta la concentración de IgG total, IgG1, IgM e IgA en
el suero de terneros en sus primeros seis días de
edad.
Palabras Claves: selenio, calostro, terneros,
inmunoglobulinas.
Summary: The colostrum immunoglobulin
concentrations of selenium-deficient cows and in the blood of
their calves were studied in twelve Friesian cows of 4-9 year
old. The animals were 7 months pregnant at the beginning of the
experience and it were fed with a selenium deficient diet
consisted in hay and a commercial concentrate (diet 0.04 ppm dry
matter) and kept under permanent housing condition with water ad
libitum. The cows were allocated into two homogeneous groups of
six animals each, selenium supplemented (Se-S) and selenium
deficient (Se-D) and the animals of the Se-S group were
supplemented with barium selenate (1 mg/Se/kg s. c.) ± 45
days before calving, whilst the Se-D group received
nothing.
The balance of selenium was assessed by GSH-Px activity
in blood and the concentration of immunoglobulin in serum and
colostrums by immunodiffusion radial method. Selenium deficiency
did not affect serum and colostrum total IgG, IgM and IgA
concentration in cows (P > 0.05). However, the IgG1 colostrum
concentrations decreased in selenium supplemented cows (P <
0.05). On the other hand, the nutritional deficiency of selenium
did not affect total IgG, IgG1, IgM and IgA in calves serum
concentrations until 6 days of age.
Key Words: selenium, colostrum, calves,
immunoglobulins.
INTRODUCCION
El selenio (Se) juega un rol importante en la integridad
funcional del tracto reproductivo, la función
tiroidea y el normal funcionamiento del sistema
inmunológico del ganado (López Alonso y col.,
1997). La principal fuente de Se para los bovinos a pastoreo
proviene de la alimentación con
praderas naturales y forrajes conservados, que en el Sur de
Chile, en un alto porcentaje, son deficientes en este
microelemento (Ceballos y col., 1998). Para compensar la
deficiencia nutricional de Se se utiliza la suplementación
con este mineral, permitiendo optimizar con ello las variables
productivas, de fertilidad y otorgar mayor protección a
los animales contra
las enfermedades
infecciosas (Wittwer y col., 2002). En este sentido, en los
últimos años hemos estudiado el efecto de la
deficiencia nutricional de Se en vacas lecheras estabuladas y en
vaquillas en pastoreo, demostrando sus efectos sobre la
función tiroidea (Contreras y col., 2002; Matamoros y
col., 2003), la glándula mamaria (Kruze y col., 2000) y el
sistema inmune (Pesutic y col., 2001). En esta última
investigación se observó que la
suplementación con Se en vaquillas a pastoreo no favorece
la respuesta inmune humoral ni celular.
Con relación al efecto del Se sobre la
concentración de inmunoglobulinas en el calostro y la
absorción de ellas en el ternero recién nacido, los
estudios realizados son escasos y presentan resultados variables.
Por una parte, se ha informado que la
administración de Se solo o con vitamina E en vacas de
carne, a mitad de preñez y pastoreando en praderas
selenio-deficientes, aumenta las concentraciones de IgG en el
calostro y en el suero de los terneros (Swecker y col., 1995).
Sin embargo, otros estudios señalan que el Se y la
vitamina E favorecen la producción de calostro y leche pero no
benefician la inmunidad pasiva (Lacetera y col.,
1996).
La presente investigación tiene por objetivo
estudiar el efecto de la deficiencia nutricional de selenio en
vacas gestantes sobre la concentración de inmunoglobulinas
IgG total, IgG1, IgM e IgA en el calostro y en el suero
sanguíneo de los terneros en sus primeras días de
vida.
MATERIAL Y MÉTODOS
Animales. Se utilizaron 12 vacas Frisonas de 4
a 9 años de edad (promedio de 5 años) con 7-8 meses
de gestación, provenientes de un predio lechero libre de
tuberculosis,
leucosis y brucelosis. Todos los animales fueron alimentados con
una dieta deficiente en Se (Se < 0.05 ppm) consistente en 9.5
kg de heno de pradera natural (Se=0.02 ppm de materia seca, MS),
más 1 kg de concentrado comercial (Cosetan, Biomaster
IANSA-Chile) (Se=0.12 ppm de MS) y fueron mantenidos en
estabulación permanente durante todo el período
experimental en cubículos individuales sobre piso de
hormigón y cama de paja, alimentados en comederos
individuales y agua a
voluntad. Las vacas fueron distribuidas en dos grupos de seis
animales, homogéneos en términos de edad (6.5
años), número de partos (3.5 partos), peso corporal
(594 kg), tiempo de
gestación (230 días) y producción de leche
en la última lactación (6.406 litros). Uno de los grupos
se suplementó con selenio (Se-S) y el otro grupo no
recibió suplementación (Se-D).
De las 12 vacas, una de ellas perdió el ternero
debido a un parto
distócico. El examen post mortem del ternero
descartó la presencia de enfermedades infecciosas. De los
11 terneros nacidos vivos, seis correspondieron a vacas Se-S y
cinco al grupo Se-D. Las vacas permanecieron tres días con
sus terneros y posteriormente se les aplicó ordeño
mecánico dos veces al día. En el transcurso del
período de estudio se registró la condición
corporal de todos los animales utilizando la escala 1 a 5
según Edmonson y col. (1989).
Suplementación con
selenio y toma de
muestras. Las vacas del grupo Se-S fueron suplementadas
por vía subcutánea con 1 mg de Se/kg usando
selenato de bario (Deposel®, Young Animal Health
Ltd., N. Zealand) en dosis única de 1 ml/ 50 kg/pv,
administrado 60 días antes de la fecha probable de los
partos. De cada vaca se tomaron simultáneamente dos
muestras de sangre (con y sin
heparina), por venopunción coccígea previo a la
suplementación (día 0) y luego cada 15 días
durante 90 días. Inmediatamente después del parto
se recolectaron muestras de calostro de todas las vacas de ambos
grupos y muestras de suero de los terneros en la primera hora
postnacimiento y cada dos días hasta el sexto día
de vida. Los sueros de las vacas, terneros y el calostro fueron
mantenidos a –20° C hasta su posterior análisis.
Evaluación de la
actividad sanguínea de
glutatión peroxidasa (GSH-Px). El
balance nutricional de Se se evaluó mediante la actividad
sanguínea de GSH-Px realizado en un hemolizado de las
muestras de sangre con heparina de ambos grupos de vacas,
empleando reactivos comerciales (RANSEL® .
Laboratorios Randox, Crumlin, UK), basados en una técnica
cinética compuesta NADPH-dependiente, según la
modificación del método
descrito por Paglia y Valantine en 1967 (Ceballos y col., 1999).
Las lecturas se realizaron en un espectrofotómetro Hitachi
4020 (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim). La actividad de GSH-Px
fue expresada en UI/g Hb e interpretada según Ceballos y
Wittwer (1996), quienes señalan que valores
menores a 60 UI/g Hb son considerados deficientes, entre 61 y 100
UI/g Hb son considerados bajo marginales, 101 a 130 son
marginales y valores superiores a 130 UI/g Hb son considerados
apropiados.
Determinación de la
concentración de inmunoglobulinas
en el suero y
calostro. La determinación de la
concentración de inmunoglobulinas IgG total, IgG1, IgM e
IgA en suero y calostro de las vacas y suero de los terneros se
realizó mediante un kit comercial de inmunodifusión
radial (BINDARID®. The Binding Site, UK). Previo a
la determinación se procedió a la separación
de la grasa del calostro mediante ultracentrifugación a
41.366 g por 1 hora, en una centrífuga refrigerada Sorvall
28S.
Análisis estadístico.
Establecida la normalidad de la distribución de los datos, mediante
la prueba de Kolmogorov y Smirnov, se calcularon los promedios y
desviación estándar para cada grupo y día de
muestreo. La
significancia de las diferencias dentro del grupo se
evaluó mediante análisis de varianza y cuando
éstas fueron significativas se identificaron con la prueba
de comparación múltiple de Tukey. Las diferencias
entre los grupos se evaluaron mediante la prueba "t" de Student
(Zar, 1996). Los análisis se realizaron con el programa
Graph-Pad-Prism (versión 3), usándose un valor de
significancia de P < 0.05.
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