Variación de la Tasa de Enraizamiento Asociada al Número de Subcultivo y Diámetro de Microtallos de Castaño Castanea sativa Mill

• Introducción
• Materiales
  y métodos
• Resultados
  y discusión
• Conclusiones
• Reconocimientos
• Literatura
  citada

ABSTRACT: This study had the
objective of determining  the subculture number and the
shoot basal diameter that produces the best  rooting rate
ex vitro of chestnut, Castanea sativa Mill.,
microshoots obtained via in vitro culturing.  The
plant material corresponded to  microcuttings obtained from
embryo cultures with between 7 and 12 subcultures in the
proliferative  stage, for which Driver and Kuniyuki Walnut
(DKW)  medium was used with the macronutrients reduced to a
half and  supplemented with 1 mg L-1
6-benzylaminopurine (BAP) and 0.1 mg L-1
indole-3-butiric acid (IBA). The quick induction rooting method
was used, submerging the base of the microcuttings in a solution
of 0.5 mg mL-1 of IBA for 15 min. For the rooting
stage, pine bark:perlite (4:1, v/v) substrate was used, carrying
out the evaluation of results at 20 days after culturing. The
evaluated variables were
survival rate (%), rooting rate (%), root number, root length
(mm), callus presence and visual aspect of the rooting system.
The results showed a decrease of rooting capacity as the
subculture number increases. The factor microcutting diameter did
not present significant differences  with respect to the
evaluated variables.

Key words: chestnut, micropropagation, in
vitro culture.

RESUMEN: Este estudio tuvo por objeto determinar
el número de subcultivo y el diámetro basal en el
cual se obtiene la mayor tasa de enraizamiento ex vitro
para microtallos de castaño, Castanea sativa Mill.,
obtenidos vía cultivo in vitro.  El material
vegetal correspondió a microtallos provenientes del
cultivo de embriones con entre 7 y 12 subcultivos durante la
etapa de proliferación, para la cual se utilizó
medio Driver y Kuniyuki Walnut (DKW) con los macronutrientes
reducidos a la mitad y suplementado con 1 mg L-1
6-benzilaminopurina (BAP) y 0,1 mg L-1 de ácido
indol 3-butírico (AIB). Se utilizó el método de
inducción rápida de enraizamiento
sumergiendo los tallos en una solución de 0,5 mg
mL-1 de AIB durante 15 min. Para la etapa de
enraizamiento, se utilizó como sustrato corteza de
pino:perlita (4:1, v/v) evaluando los resultados a los 20
días de cultivo. Las variables evaluadas fueron tasa de
supervivencia (%), tasa de enraizamiento (%), número de
raíces, largo de raíces (mm), presencia de callo y
aspecto del sistema
radicular. Los resultados mostraron una disminución de la
capacidad de enraizamiento a medida que aumenta el número
de subcultivo. El factor diámetro de microtallo no
presentó diferencias significativas respecto a las
variables evaluadas.

Palabras clave: castaño,
micropropagación, cultivo in vitro.

INTRODUCCIÓN

El castaño (Castanea sativa Mill.)
presenta ventajas importantes para su cultivo en Chile respecto
de otros países. Según Loewe et al. (1995),
los rendimientos en producción de frutos son mayores a los
promedios europeos, aún con un manejo rústico y sin
elección de variedades, a lo que es posible agregar la
ausencia de agentes patógenos de importancia (Benedetti y
Subiri, 2000). Sin embargo, pese a las ventajas que presenta
Chile para su cultivo, existen también inconvenientes
importantes, entre ellos la escasez de
oferta de
castaño, que ha determinado en gran medida los bajos
niveles de comercialización y los altos precios que
alcanza la madera. En lo
relativo al fruto, uno de los grandes problemas en
la comercialización se debe a la falta de homogeneidad,
calibre y desconocimiento de las variedades cultivadas, entre
otras (Loewe et al., 1998).

Para corregir las limitaciones mencionadas
anteriormente, es imprescindible contar con un stock suficiente
de plantas de
castaño de las variedades adecuadas para la
comercialización del fruto. Esto no es posible a partir de
plantas originadas de semillas, ya que se produce una gran
variabilidad genética
de los individuos resultantes. Por otro lado, dentro de las
técnicas de propagación asexual, la
macropropagación se hace difícil, ya que el
castaño es una especie altamente recalcitrante, lo que
dificulta su enraizamiento (Sierra, 2001). Sin embargo, mediante
la micropropagación es posible producir masivamente
plantas de diferentes variedades de castaño, cuyas
características de producción y tipo de fruto ya se
encuentran establecidos (Hartmann y Kester, 1998).

No obstante, es importante considerar que las
características anatómicas y fisiológicas
(como el diámetro de tallo y contenidos hormonales
endógenos de las plantas micropropagadas) hacen necesaria
para su supervivencia en condiciones ex vitro, una
adaptación o aclimatación gradual a las condiciones
medioambientales del invernadero y posteriormente del campo,
siendo imprescindible contar con un sistema radicular adecuado
(Gonçalves, et al., 1998).

Pierik (1990) señala que el proceso de
formación del sistema radicular está influenciado
por diversos factores. Entre éstos se menciona el
número de subcultivos que han sufrido los microtallos
antes de su enraizamiento. En cuanto a la importancia de este
factor, se ha demostrado que la formación de raíces
declina con los subcultivos sucesivos (Norton y Norton, 1986,
citados por Pierik, 1990). Sin embargo, en cultivos de manzano
(Malus domestica) var. Jonathan, se ha encontrado que con
un número creciente de subcultivos, el porcentaje de
enraizamiento aumenta, desde 0 hasta 100% después de nueve
subcultivos. Respecto al cultivo del castaño,
Sánchez et al. (1997) encontraron tendencia de un
aumento del porcentaje de enraizamiento con subcultivos
jóvenes (desde el 1° al 6° subcultivo). Sin
embargo, no aclaran si esta tendencia continúa con
subcultivos posteriores, o si se revierte. Por lo tanto, queda de
manifiesto que el número de subcultivos influye en la tasa
de enraizamiento de una especie micropropagada.

Por lo anterior, el  objetivo del
presente trabajo fue
determinar el número de subcultivos y el diámetro
basal en el cual se obtiene la mayor tasa de enraizamiento ex
vitro para microtallos de Castanea sativa obtenidos
vía cultivo in vitro, parámetros necesarios
de establecer cuando se necesita un programa de
producción de plantas mediante técnicas de
micropropagación.