ESPECTROFOTOMETRIA

INSTRUMENTACIÓN Y METROLOGÍA I
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

2012

OBJETIVOS

* Aprender a usar de forma adecuada el espectrofotómetro. * Medir la absorbencia de tres soluciones coloreadas en todas las longitudes de onda permitidas por el equipo. * Realizar las mediciones necesarias para evaluar la exactitud y precisión del espectrofotómetro, mediante la realización de los cálculos respectivos. * Evaluar es comportamiento del espectrofotómetro a través del tiempo, haciendo pruebas de estabilidad fotométrica.

INTRODUCCIÓN

La espectrofotometría es el estudio de la energía transmitida, absorbida y reflejada en una superficie dada, en función de la longitud de onda (λ); se …ver más…

En el siguiente informe se describen y se explican los resultados obtenidos al realizar las pruebas anteriormente mencionadas.

RESULTADOS

* Lectura espectro de Absorción para soluciones coloreadas:

| ABSORBANCIA | λ | ROJO | AZUL | AMARILLO | 340nm | 0,938 | 0,205 | 8,509 | 405nm | 0,489 | 0,214 | 8,680 | 500 nm | 1,912 | 0,463 | 0,702 | 546 nm | 1,486 | 1,359 | 0,004 | 578 nm | 0,527 | 1,571 | 0,000 | 620 nm | 0,017 | 0,598 | 0,005 | 670 nm | 0,002 | 0,025 | -0,003 |

Longitud de onda óptima encontradas:
Rojo: 1,912
Azul: 1,571
Amarillo: 8,680

* Control de exactitud y precisión fotométrica: Repetición | Absorbancia | 1 | 0,510 | 2 | 0,512 | 3 | 0,512 | 4 | 0,512 | 5 | 0,509 | 6 | 0,510 | 7 | 0,511 | 8 | 0,512 | 9 | 0,511 | 10 | 0,511 | | 0,511 | | %E | 7,58% | S | 1,05×10-3 | CV | 0,21% |

Limites de aceptabilidad:
Exactitud (%E): ±3%
Precisión (CV): ≤1.5%

* Control de la estabilidad fotométrica: | S | 0,5103 | 4,70×10-3 | | Ruido (CV) | 0,09% | Deriva | -0,20%