Engenharia de Bioprocessos

2009

Resumo
Este trabalho experimental reside num conjunto de ensaios laboratoriais os quais tiveram como objectivo a extracção, purificação, concentração e quantificação do DNA

plasmídeo/vector de clonagem (pUC19) de uma estirpe de Escherichia coli. Este último constitui, por assim dizer o objectivo principal de todo o trabalho, já que as todas etapas anteriores foram realizadas com a finalidade de visualisarmos o DNA e de quantificarmos o seu tamanho. Para isso, realizaram-se os seguintes trabalhos/etapas:  TP1: Extrair, purificar, concentrar e quantificar o plasmídeo/vector de clonagem (pUC19) de uma estirpe de E.coli recorrendo à técnica da lise alcalina;  TP2: Extrair, purificar, concentrar e …exibir mais conteúdo…

1.1 - Citologia Existe dois tipos básicos de células; as procariotas e eucariotas.

Figura 1: Esquematização de um célula eucariota e procariota[1].

Como se pode verificar na figura anterior as células eucariotas são mais evoluídas pois, possuem o núcleo individualizado, envolvendo o material nuclear (ex: protistas, fungos, vegetais e animais). No que concerne às procariotas estas são organismos unicelulares (compostos por uma única célula), ou seja não possui membranas internas nem um núcleo individualizado.

Extracção, purificação, concentração e quantificação de DNA plasmídico e cromossómico de uma estripe de Escherichia coli

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Assim, a grande diferença entre as células procariotas e eucariotas é a existência ou não de um núcleo delimitado. Para além disso, nas procariotas não existem membranas internas, a membrana que o separa do meio envolvente sofre invaginações para dentro da célula. Enquanto nas células eucariotas existe uma série de membranas internas com diferentes funções na célula. A ausência destas membranas indica que, na célula procariota, é a membrana citoplasmática que desempenha grande parte das funções celulares. Adicionalmente, as procariotas também possuem uma dimensão mais reduzida,

comparativamente com as eucariotas. Contudo, ambas as células contem o material genético que é constituído por uma ou varias moléculas de DNA (ácido