Criação e produção de animais transgênicos e nocautes
Eliana Saul Furquim Werneck Abdelhay

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ANDRADE, A., PINTO, SC., and OLIVEIRA, RS., orgs. Animais de Laboratório: criação e experimentação
[online]. Rio de Janeiro: Editora FIOCRUZ, 2002. 388 p. ISBN: 85-7541-015-6. Available from SciELO Books
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Figura 2 – Modificação genética introduzida em um lócus

Fonte: modificado de Stephane Viville em Houdebine (1997).

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Criação e produção de animais transgênicos e nocautes

A) Modificação por troca do DNA no lócus.
B) Modificação do lócus pela inserção de um fragmento de DNA.

INFECÇÃO POR RETROVÍRUS
Neste caso, o DNA exógeno deve ser inserido num vetor retroviral que será, então, injetado diretamente no oócito fertilizado.
Figura 3 – Construção retroviral para transferência de um transgene
SEQÜÊNCIAS VIRAIS

Outras metodologias têm sido tentadas alternativamente, mas com menor eficiência.
Em todos os casos o primeiro passo dessa tecnologia consiste na obtenção de oócitos fertilizados ou embriões no início do desenvolvimento. Tendo em vista que cada fêmea de camundongo produz, por ciclo, cerca de 8 a 12 ovos que serão liberados naturalmente, torna-se necessário encontrar maneiras de se aumentar o número de ovos obtidos. Isso é possível estimulando as fêmeas com um regime hormonal; este consiste na injeção de 5UI de PMS (pregnant mare serum) e 46 horas após 5UI de HCG (human chorionic gonadotrophin).
O acasalamento das fêmeas logo após a última injeção pode levar à obtenção de 30 a 60 ovos de cada fêmea dependendo da linhagem utilizada. Desses ovos, aqueles que estiverem fertilizados poderão ser, então, utilizados para microinjeção. No caso de se estar trabalhando