Hplc

4457 palavras 18 páginas
MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS EM FASE LÍQUIDA
1. Definição
9. Eficiência da coluna, N e H
2. Histórico
9.a. Gaussiana
3. Classificação
10. Alargamento das bandas
10.a. Equação de van Deemter
3.a. Planar vs coluna
10.b. Efeitos extra coluna
3.b. Modos de desenvolvimento
11. Resolução; Rs em função das
3.c. Mecanismos de separação condições 4. Coeficiente de partição
5. Fator de retenção, k
6. Fator de separação, α
7. Teoria cinética versus Teoria dos pratos
8. Seqüência de eventos (pratos)

DEFINIÇÃO
A cromatografia é um método físico-químico que permite a separação de componentes de uma mistura, através da distribuição destes componentes em duas fases, que estão em contato íntimo.
Em todas as separações cromatográficas, a
…exibir mais conteúdo…
CREMER e PRIOR: primeiros a descrever um cromatógrafo a gás completo. PRETORIUS e col., e McWILLIANS e DEWAR: detector por ionização em chama, ampliando a sensibilidade do método cromatográfico. GOLAY: introdução das colunas capilares, tornando GC o método analítico mais usado no mundo (o número de cromatógrafos atualmente em uso no mundo é estimado em 200.000).

HISTÓRICO – anos 50
1951: LERMAN e col. realizaram as primeiras experiências em cromatografia por bioafinidade, separarando anticorpos em coluna recheada com celulose, contendo antígenos apropriados.
ANFINSEN e col. aperfeiçoaram a técnica com o uso de gel de dextrano contendo grupos específicos quimicamente ligados.
ADAMS e HOLMES: síntese das primeiras resinas de troca iônica, baseadas e, fenil e formaldeido para cátions.
COHN utilizou resinas de poliestireno-divinilbenzeno, para a separação de aminoácidos, e MOORE e STEIN aperfeiçoaram o método utilizando bombas peristálticas para empurrar a fase móvel e um fotômetro para a detecção (derivatização pós-coluna dos aa com ninidrina).
1959: HAMILTON e ANDREWS modificaram o sistema para análises de aa, introduzindo a bomba tipo pistão, similar às usadas hoje na cromatografia líquida de alta eficiência.

HISTÓRICO – anos 60
KARR e col., JENTOFT e GOUW, HUBER e HULSMAN, SNYDER,
KIRKLAND aperfeiçoaram os sistemas de bombeamento e detecção para cromatografia líquida, operando a

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