Efeitos de operações sobre o baço no lipidograma de ratas (página 2)

O presente trabalho foi realizado de acordo com as recomendações das Normas Internacionais de Proteção aos Animais e do Código Brasileiro de Experimentação Animal (1988) e foi aprovado pela Comissão de Ética do Departamento de Cirurgia da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)^16,17.

Foram utilizadas 40 ratas Wistar com peso médio de 133 ± 19 gramas, procedentes do Biotério do Instituto de Ciências Biológicas da UFMG e mantidas no Biotério da Faculdade de Medicina da UFMG.

Os animais foram alocados em gaiolas apropriadas, com até cinco ratas por gaiola, à temperatura ambiente de 25°C e iluminação diária natural. Elas receberam água e ração balanceada padrão para ratos à vontade. Antes do experimento, as ratas foram submetidas a exame para descartar possíveis afecções, durante o período de adaptação de 15 dias. Os animais foram distribuídos aleatoriamente nos seguintes grupos:

Grupo 1 (n = 10) - Controle: não foram submetidos a intervenção cirúrgica.

Grupo 2 (n = 10) - Esplenectomia total: o estômago foi tracionado para fora da cavidade abdominal, expondo o baço. Em seguida, foram realizadas três ligaduras do pedículo vascular esplênico com fio de categute cromado 5-0 e retirada completa do órgão.

Grupo 3 (n = 10) - Esplenectomia subtotal: ligadura vascular do baço com fio de categute cromado 5-0, deixando apenas o pólo superior suprido pelos vasos esplenogástricos, secção do baço entre as partes isquêmica e irrigada. Sutura contínua da superfície cruenta do pólo esplênico superior com fio de categute cromado 5-0.

Grupo 4 (n = 10) - Esplenectomia total complementada por implante de tecido esplênico autógeno no omento maior. Após a retirada do baço, seguindo as etapas descritas no Grupo 2, fatiou-se o órgão em 5 segmentos que foram suturados sobre o omento maior, com fio de categute cromado 5-0.

Todos os procedimentos foram realizados nas dependências do Laboratório de Cirurgia Experimental do Departamento de Cirurgia da Faculdade de Medicina da UFMG, obedecendo às normas técnicas de assepsia e anti-sepsia.Todos os procedimentos operatórios foram conduzidos sob anestesia geral com éter etílico e através de laparotomia mediana, de aproximadamente 4 cm, iniciada 0,5 cm abaixo do apêndice xifóide, no sentido crânio-caudal. A cavidade abdominal das ratas foi fechada em dois planos de sutura contínua (no primeiro, o peritônio e plano músculo aponeurótico e, no segundo, a pele), utilizando fio de algodão 5-0.

As ratas foram acompanhadas diariamente durante 120 dias. Decorrido esse prazo, elas foram anestesiadas com éter etílico e submetidas a laparotomia mediana. Identificou-se a veia cava caudal, que foi puncionada sob sistema de coleta a vácuo, no qual se coletaram 5 ml de sangue em tubos com gel e revestidos com papel alumínio para proteção da luz, que foram imediatamente enviados para análise laboratorial. Após a centrifugação a 2000 rpm por 5 minutos, do plasma separado dosaram-se as concentrações de triglicérides, colesterol total e HDL pelo método colorimétrico enzimático. As concentrações das frações do colesterol VLDL e LDL foram calculadas pela fórmula de Friedwald. Em seguida, os animais foram mortos com dose inalatória letal de éter.

Os valores de colesterol total e suas frações e de triglicérides foram avaliados nos diferentes grupos pelo teste de Normalidade de Kolmogorov-Smirnov (KS) para testar a distribuição gaussiana dos dados e, em seguida, pelo teste de Bartlett para testar as variâncias. Caso os dados apresentassem distribuição gaussiana e mesma variância, realizava-se a análise de variância (ANOVA), seguida pelo teste de Tukey-Kramer de comparação múltipla. Os valores foram considerados significativos para p < 0,05.

No Grupo 2, dos animais esplenectomizados, houve três mortes na primeira semana pós-operatória, sem causa aparente ao exame macroscópico da cavidade abdominal. Esses animais foram substituídos para manter a uniformidade do número de animais em cada grupo. Não foram verificadas adversidades nos outros grupos. Os animais recuperaram-se rapidamente do procedimento cirúrgico.

Todas as dosagens de colesterol total apresentaram valores com distribuição dentro da curva normal (p > 0,10) (distância KS de 0,1572 para o Grupo 1, KS de 0,3355 para o Grupo 2, KS de 0,1396 para o Grupo 3 e KS de 0,1949 para o Grupo 4). As variâncias não foram diferentes (p = 0,9325, pelo teste de Bartlett). Os animais submetidos a esplenectomia total (Grupo 2) apresentaram maiores concentrações de colesterol total (p = 0,0093 ANOVA) em relação aos demais grupos. Não houve diferença entre os outros grupos (Tabela 1).

As dosagens da fração VLDL do colesterol apresentaram valores com distribuição dentro da curva normal (p > 0,10) (distância KS de 0,2140 para o Grupo 1, KS de 0,2271 para o Grupo 2, KS de 0,1822 para o Grupo 3 e KS de 0,2800 para o Grupo 4). As variâncias não foram diferentes (p = 0,4665, pelo teste de Bartlett). Não houve diferença com significância estatística entre os grupos (p = 0,2030, ANOVA) (Tabela 1).

As dosagens da fração LDL do colesterol apresentaram valores com distribuição dentro da curva normal (p > 0,10) (distância KS de 0,2142 para o Grupo 1, KS de 0,2065 para o Grupo 2, KS de 0,2912 para o Grupo 3 e KS de 0,1967 para o Grupo 4). As variâncias não foram diferentes (p = 0,6111, pelo teste de Bartlett). Os animais submetidos a esplenectomia total (Grupo 2) apresentaram maiores concentrações de colesterol LDL (p < 0,0001 ANOVA) em relação aos demais grupos. Não houve diferença entre os outros grupos (Tabela 1).

As dosagens da fração HDL do colesterol apresentaram valores com distribuição dentro da curva normal (p > 0,10) (distância KS de 0,1900 para o Grupo 1, KS de 0,3416 para o Grupo 2, KS de 0,2034 para o Grupo 3 e KS de 0,1690 para o Grupo 4). As variâncias não foram diferentes (p = 0,8927, pelo teste de Bartlett). A fração HDL do grupo submetido a esplenectomia total (Grupo 2) foi menor do que a registrada nos demais grupos (p = 0,05, ANOVA). Não houve diferença significativa entre os outros grupos (Tabela 1).

As dosagens de triglicérides também apresentaram valores com distribuição dentro da curva normal (p > 0,10) (distância KS de 0,2370 para o Grupo 1, KS de 0,2352 para o Grupo 2, KS de 0,1776 para o Grupo 3 e KS de 0,2559 para o Grupo 4). As variâncias não foram diferentes (p = 0,4310, pelo teste de Bartlett). Não houve diferença entre os grupos estudados (p = 0,1882, ANOVA) (Tabela 1).

O baço destaca-se na prática médica em decorrência de suas atribuições, parcialmente já bem conhecidas, como o seu papel imunitário, de filtração e hematopoiético¹⁸. Além dessas funções, a sua participação no controle metabólico vem merecendo uma atenção crescente^{1,2,3,4,5,6,7,8,9}. Sua importância na fisiopatologia de muitas doenças fez com que se optasse pela preservação desse órgão, reduzindo os índices de sepse e distúrbios hematológicos pós-operatórios¹⁹. A esplenectomia total, que resultava de muitas indicações no passado, vem sendo progressivamente substituída por procedimentos conservadores do baço, como a sutura esplênica, a esplenectomia parcial, a esplenectomia subtotal ou o implante autógeno de tecido esplênico, após a remoção do baço^{18,20,21,22,23}. Mais recentemente, passou a ser bem aceita a abordagem não operatória do trauma esplênico, com resultados melhores do que os operatórios²⁴.

Existem, na literatura, trabalhos clínicos e experimentais que avaliaram a possível relação entre o baço e o metabolismo lipídico no hiperesplenismo^1,2,3,6,7,8 e em presença de asplenia ^1,2,5,7,9. Gilbert et al. (1981) descreveram decréscimo nos níveis séricos de colesterol total e de suas frações LDL e HDL em pacientes portadores de doenças mieloproliferativas associadas a hiperesplenismo⁸. Nos períodos de agravamento da doença de base, havia redução ainda maior dos níveis de colesterol. Após esplenectomia total ou quando a moléstia era controlada por agentes quimioterápicos ou com irradiação esplênica, ocorreu a reversão da hipocolesterolemia⁸. Outros autores também analisaram essa relação em pacientes portadores da doença de Gaucher tipo 1⁶ e talassemia maior tipo B³, tendo sido encontrados resultados semelhantes.

Por outro lado, em estudos experimentais, a esplenectomia total acompanhou-se de níveis elevados de colesterol e triglicérides ^2,4,5. Aviram et al. (1986) notaram que, após esplenectomia para tratar desordens mieloproliferativas, houve elevação da fração LDL do colesterol⁷.

A dislipidemia secundária à esplenectomia total poderia resultar em maior incidência de distúrbios ateroscleróticos ^{25,26,27,28,29}. Na tentativa de estabelecer essa relação, Asai et al. (1988) observaram que coelhos submetidos a esplenectomia total e que receberam alimentação rica em colesterol apresentaram, após quatro meses, placas ateroscleróticas na aorta⁵.

Existem algumas teorias para explicar os possíveis mecanismos implicados na regulação dos lípides plasmáticos pelo baço^1,3,5,6,7. Schmidt et al. (1997) compararam o baço a um reservatório lipídico, que se eleva em situações de hiperesplenismo. Os macrófagos esplênicos acumulariam grande quantidade de gordura, mediante aumento da fagocitose com conseqüente hipolipidemia¹. Outra explicação para a redução lipídica seria o efeito imunitário do sistema mononuclear fagocitário contra estruturas encontradas nas lipoproteínas HDL e LDL, resultando em sua depuração plasmática^3,6.

Com base nessas teorias, após a esplenectomia total, o efeito inverso provocaria o aumento dos níveis séricos dos lípides plasmáticos. Entretanto, há necessidade de prosseguir a investigação desse fenômeno para comprovar a veracidade dessas hipóteses e aprofundar suas explicações.

O presente trabalho também encontrou a elevação do colesterol total e de sua fração LDL. Por outro lado, a fração HDL apresentou concentração menor. Já os níveis de triglicérides e de VLDL foram inalterados, assim como havia sido descrito por Aviram et al. ⁷ (1986) e contradizendo outros autores^2,4,5.

É importante ressaltar que as cirurgias conservadoras do baço mantiveram o lipidograma em seus níveis normais. Portanto, a presença de tecido esplênico, mesmo em quantidade menor e até ectópico, é capaz de manter funções do órgão relacionadas à regulação do metabolismo lipídico. Além disso, considerando-se a hipótese de que a irrigação sangüínea do omento seria menos propícia que a irrigação própria do baço, diminuindo a funcionalidade do órgão, não houve diferenças no lipidograma do Grupo 4 em relação aos grupos 1 e 3.

É provável que o baço desempenhe um papel de destaque no metabolismo lipídico de ratas e que a esplenectomia total se relacione com alterações no controle do colesterol. É possível que a preservação de tecido esplênico previna tais distúrbios metabólicos.

Os autores agradecem o auxílio da Dra. Renata Figueiredo Rocha pela apresentação deste trabalho e ao CNPq e à FAPEMIG pelos auxílios financeiros.

Conflito de interesse: não há.

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