UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE
DEPARTAMENTO DE ANÁLISES CLÍNICAS E TOXICOLÓGICAS
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DOCENTE: GEORGE QUEIROZ

DETERMINAÇÃO DE METEMOGLOBINA NO SANGUE

NATAL
2013
INTRODUÇÃO
Agentes metemoglobinizantes são substâncias capazes de induzir a oxidação do ferro da hemoglobina. Esta oxidação resulta em um pigmento chamado metemoglobina, que não é capaz de transportar e fornecer oxigênio aos tecidos. A metemoglobina não pode se ligar ao oxigênio devido à carga positiva do ferro.
O fenômeno da metemoglobinemia ocorre pela auto oxidação da hemoglobina (Hb), usando oxigênio a pressões parciais fisiológicas, cujo heme se apresenta sob a forma ferrosa (Fe++). Na metemoglobina o átomo de …exibir mais conteúdo…

O aumento da metemoglobina no sangue periférico pode ocorrer por uma exposição a substâncias químicas ou fármacos conhecidamente oxidantes (nitritos, dapsona e outras). OBJETIVOS Determinar a concentração de metemoglobina no sangue de um paciente.

METODOLOGIA
AMOSTRA:
Colheu-se uma amostra de sangue de um paciente e usando heparina ou EDTA como anticoagulante, adicionou-se água destilada (2,2mL para 0,8mL de sangue) e misturou-se com 1,0 mL da solução tampão de fosfato somente após 3 min e centrifugou-se por 15 min.

MATERIAL Espectrofotômetro para a região do visível – 632nm; Solução de K3Fe(CN)6 5%- Conservar em frasco escuro e preparar mensalmente; Solução Tampão Fosfato 0,5M, pH 7,2- Misturar 7,0 mL de Na2HPO4 0,5M e 3,0 mL de KH2PO4 0,5M; Reativo Ferricianeto-Fosfato – Misturar 0,2 mL de solução K3Fe(CN)6 a 5% e 2,5mL da solução de sol. tampão fostato e completar até 10 mL com água destilada. Preparar diariamente; Cianeto de Sódio, sol. 10% de preparo recente; Ácido acético, sol. a 12%; Solução de Cianeto neutralizado – Misturar 1 mL de solução de Cianeto de sódio 10% com 0,9mL de solução ácido acético 12%. Usar dentro de 6 horas.

TÉCNICA Após centrifugação da amostra por 15 minutos (10.000 rpm) transferiu-se o sobrenadante, com auxilio de pipeta de Pasteur para um tubo de ensaio. Deste tubo, transferiu-se 2,4 mL de sobrenadante para a cubeta (I) e 0,2 mL de